177515. lajstromszámú szabadalom • Eljárás TRH-analógok előállítására
9 177515 10 pároljuk. A maradékot kevés 0,1 n vizes ecetsav-oldatban oldjuk, és az oldatot 5,5 x 40,0 cm méretű, Sephadex LH-20 géllel töltött oszlopon bocsátjuk át. A kívánt termékben dús frakciókat egyesítjük és fagyasztva szárítjuk. 1,04 g terméket kapunk acetátsó formájában [a]fj = —62,6° (c = 0,63, vízben); Rf = 0,36 [az 1. példa (c) lépésénél ismertetett körülmények között]. Elemzés a Cl7H,404N6SCH3C00H-4 H20 képlet alapján : számított; C: 42,21%, H: 6,71%, N: 15,55%, S: 5,93%; talált: C: 41,88%, H: 5,20%, N: 15,63%, S: 6,42%. 4. példa Oct-His-Pro-NHCH2CH2CH2CH3 előállítása (a) lépés: Z-Pro-NHCH2CH2CH2CH3 előállítása 12,5 g (0,05 mól) Z-Pro-OH-t a 3. példa (a) lépésében közöltek szerint akvivált észterré alakítunk, majd az elegyhez 5,7 ml (0,06 mól) n-butilamint adunk, és 12 órán át keverjük. Az oldószerként alkalmazott dioxánt csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékot 150 ml etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos fázist 150-150 ml 5%-os vizes nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal kétszer és 100-100 ml 1 n vizes sósavoldattal ugyancsak kétszer mossuk, szántjuk, és az etilacetátot csökkentett nyomáson lepároljuk. A maradékhoz petrolétert adunk, a kivált nyers terméket leszűrjük, majd etilacetátból átkristályosítjuk. 14,0 g (92,7%) kristályos anyagot kapunk; op. : 94,0—95,0 C°, [“1d — —39,6° (c = 0,54, N,N-dimetilformamidban). Elemzés a C17H2403N2 képlet alapján: számított: C: 67,08%, H: 7,95%, N: 9,20%; talált : C ; 66,83%, H : 7,90%, N : 9,05%. (b) lépés: BOC-His-Pro-NHCH2CH2CH2CH3 előállítása A 3. példa (b) lépésében leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy 6,1 g (0,002 mól) Z-Pro-NHCH2CH2CH2CHrból indulunk ki. 4,4 g (53,5%) terméket kapunk; op. : 65,0—70,0 C°; [ajjj = —27,3 (c = 0,70, N,N-dimetilformamidban). Elemzés a C20H33O4N5 képlet alapján : számított: C: 58,94%, H: 8,16%, N: 17,19%; talált : C : 59,05%, H : 8,51 %, N : 16,47%. (c) lépés: Oct-His-Pro-NHCH2CH2CH2CH3 előállítása A 3. példa (c) lépésében leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy 1,63 g (0,004 mól) BOC-His-Pro-NHCH2CH2CH2CH3-ból indulunk ki. 1,16 g terméket kapunk acetátsó formájában; [o]p = —65,0° (c = 0,60, vízben), Rf = 0,62 [az 1. példa (c) lépésénél megadott körülmények között). Elemzés a C^H^O^S-CH^OOH-4 H20 képlet alapján : számított: C: 45,35%, H: 7,25%, N: 14,42%, S: 5,50%; talált: C: 44,85%, H: 5,75%, N: 14,94%, S: 6,36%. 5. példa Oct-His-Pro-NHCH2CH2C6H5 előállítása (a) lépés: Z-Pro-NHCH2CH2C6H5 előállítása A 4. példa (a) lépésében leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy 12,5 g (0,05 mól) Z-Pro-OH-ból indulunk ki. 16,0 g (90,9%) terméket kapunk; op. : 86,0—88,0 C° ; [<*]d = — 39,6° (c = 0,54, N,N-dimetilformamidban). Elemzés a C2lH2403N2 képlet alapján; számított: C: 71,57%, H: 6,86%, N: 7,59%; talált : C : 71,38%, H : 6,72%, N : 7,87%. (b) lépés: BOC-His-Pro-NHCH,CH,C6H5 előállítása A 3. példa (a) lépésében leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy 7,0 g (0,02 mól) Z-Pro-NHCH2CH2C6H5-ből indulunk ki. 6,5 g (71,4%) terméket kapunk; op.: 70,0—75,0 C° (bomlás); [a]p = — 21,7 (c = 0,75, N,N-dimetilformamidban). Elemzés a C,4H3304N5 képlet alapján: számított: C: 63,27%, H: 7,30%, N: 15,38%; talált: C: 63,41%, H: 7,49%, N: 14,59%. (c) lépés : Oct-His-Pro-NHCH,CH,C6H5 előállítása A 3. példa (c) lépésében leírt módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy 1,82 g (0,004 mól) BOC-His-Pro-NHCH2CH2-C6H5-ből indulunk ki. 1,37 g terméket kapunk acetátsó formájában: [ot]jj = —80,5 (c = 0,56, vízben) ; Rf = 0,64 [az 1. példa (c) lépésénél megadott körülmények között] Elemzés a C24H30O4N,,S CH,COOH-3H2O képlet alapján: számított: C: 52,52%, H: 6,43%, N: 14,13%, S: 5,39%; talált: C: 52,15%, H: 5,73%, N: 14,32%, S: 5,61%. 6. példa Cbl-His-Pro-NH2 előállítása (a) lépés : y-Karboxi^y-butirolakton előállítása 29,4 g (0,2 mól) H-Glu-OH-t 200 ml vízben szuszpendálunk, és a szuszpenzióban szobahőmérsékleten, 90 perc alatt, egyszerre 16,8 g (0,24 mól) nátriumnitrit 120 ml vízzel készített oldatát és 120 ml 2 n vizes kénsavoldatot csepegtetünk. A reakcióelegyet 12 órán át állni hagyjuk, majd a vizet csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékhoz forró acetont adunk. Az acetont lepároljuk, és az olajos maradékot csökkentett nyomáson desztilláljuk. 14,3 g (55,0%) terméket kapunk; fp. : 170,0—175,0 C /0,5 Hgmm; op. : 50 C°; [a]p = —11,4° (c = 0,77, 2 n vizes nátriumhidrox id-oldatban). Elemzés a H20 képlet alapján: számított: C: 44,61%, H: 4,87%, N: 0,00%; talált : C : 44,69%, H : 4,77%, N : 0,00%. (b) lépés : Cbl-His-Pro-NH2 előállítása 1,43 g (0,011 mól) y-karboxi-y-butirolakton és 3,46 g (0,013 mól) pentaklórfenol N,N-dimetilformamiddal készített oldatához jeges hűtés közben 2,37 g (0,0115 mól) DCC-t adunk, és az oldatot 4 órán át keverjük. 3,85 g (0,01 mól) Z-His-Pro-NH2-ből kiindulva az 1. példa (c) lépésében leírt módon N,N-dimetilformamidos H-His-Pro-NH2-oldatot állítunk elő. Ezt az oldatot egyesítjük az előző műveletben kapott oldattal, és a reakcióelegyet 48 órán át 4 C°-on keverjük. A melléktermékként kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és az oldószert vákuumban lepároljuk. A maradékot etilacetáttal eldörzsöljük, a kivált porszerű anyagot leszűrjük, 50—50 ml forró acetonitrillel kétszer, és végül 50 ml etilacetáttal egyszer mossuk. A kapott poralakú anyagot vízben oldjuk, és az oldhatatlan anyagot kiszűrjük. A szűrletet fagyasztva szárítjuk. 3,80 g terméket kapunk; [a]“ = —53,4° (c = 0,56, vízben), Rf = 0,43 (az 1. példa (c) lépésénél megadott körülmények között). Elemzés a Ci6H2|05N5-5,5H20 képlet alapján; számított: C: 41,56%, H: 7,17%, N: 15,15%; talált : C : 41,55%, H ; 5,41 %, N : 15,02. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
