177515. lajstromszámú szabadalom • Eljárás TRH-analógok előállítására
5 177515 6 Az (I) általános képletű vegyületek szükséges napi dózisa az adott vegyülettől, az elérni kívánt hatástól, a kezelendő egyed fajától és általános egészségi állapotától, továbbá a kezelés módjától függően változik. Az (I) általános képletű vegyületeket parenterális adagolás esetén körülbelül 0,1—10 mg/kg-os, orális adagolás esetén pedig körülbelül 5—500 mg/kg-os dózisokban adhatjuk be. A találmány szerinti eljárást az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi példákban részletesen ismertetjük. Amennyiben egyebet nem közlünk, a példákban említett, aszimmetriacentrumot tartalmazó vegyületek L-konfigurációjúak. 1. példa Oct-His-Pro-NH, előállítása (a) lépés: 3-Oxo-5-karboxiperhidro-l,4-tiazin előállítása 40 ml vízben 3,6 g (0,02 mól) S-karboximetil-L-ciszteint szuszpendálunk, majd a szuszpenzióhoz 20 ml 1 n vizes nátriumhidroxid-oldatot adunk. A reakcióelegyet bombacsőben 48 órán át 110 C°-on tartjuk, majd 4,5 x 12,0 cm méretű Amberlite IR—120B gyantaoszlopon átbocsátva sómentesítjük. A gyantaoszlopot hidrogén-ciklusban használjuk fel. Az effluenst szárazra pároljuk, és ^maradékot jégecetben oldjuk. Az oldathoz étert adunk, majd a kivált kristályokat leszűrjük. 1,55 g (48,1%) kristályos anyagot kapunk; op. : 152—153 C ; [a]o = +l,l (c = 0,64, vízben). Elemzés a C5H703NS képlet alapján : számított: C: 37,26%, H: 4,38%, N: 8,69%, S: 19,89%; talált: C: 36,97%, H: 4,28%, N: 8,54%, S: 19,73%. (b) lépés : Z-His-Pro-NH2 előállítása 32,7 g (0,12 mól) £-Pro-NH2-t metanolos közegben, palládiumkorom jelenlétében ismert módon katalitikusán redukálunk. A katalizátort kiszűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott kristályos anyagot vákuumban szárítjuk. ‘ 36,4 g (0,12 mól) Z-His-NH-NH,-t 360 ml 1 n vizes sósavoldalban oldunk. Az oldathoz 480 ml etilacetátot adunk, majd 0 C -ra hűtjük, és erélyes keverés közben 8,3 g (0,12 mól) nátriumnitrit 30 ml vízzel készített oldatát csepegtetjük az elegybe. 3 perc elteltével az elegyhez 144 ml hideg, 50%-os vizes nátriumkarbonát-oldatot adunk. Az etilacetátos fázist elkülönítjük, és a vizes fázist 100-100 ml etilacetáttal kétszer extra háljuk. Az etilacetátos oldatokat egyesítjük, vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk, szűrjük, majd erélyes keverés közben hozzáadjuk az előző műveletben előállított,'szárított, porszerű terméket. A kapott reakcióelegyet 150 ml N,N-dimetilformamiddal hígítjuk, és 12 órán át 4 C -on keverjük. Ezután az oldószert lepároljuk, és az olajos maradékot hideg vízzel eldörzsölve kristályosítjuk. A kapott kristályos anyagot vízből átkristályosítjuk. 24,5 g (53,0%) terméket kapunk; op.: 112,0—118,0 C ; = -39,8° (c = 0,53, vízben). Elemzés a C„H23N504- J/2 H,0 képlet alapján: számított: C: 57,86%, H: 6,13%, N: 17,76%; talált: C: 58,16%, H: 6,03%, N: 17,65%. (c) lépés: Oct-His-Pro-NH2 előállítása v 1,20 g (0,00312 mól) Z-His-Pro-NH2-t 15 ml 25%-os ecetsavas hidrogénbromid-oldatban oldunk, és az oldatot 40 percig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Az elegyhez 150 ml étert adunk, majd a kivált csapadékot leszűijük, és exszikkátorban nátriumhidroxíd fölött 12 órán át szárítjuk. A száraz, poralakú anyagot 20 ml dimetilformamidban oldjuk, és az oldathoz hűtés közben 0,88 ml (0,00624 mól) trietilamint adunk. A kapott, kristályos sót kiszűrjük, és a szűrlethez 502 mg (0,00312 mól) 3-oxo-5-karboxiperhidro-l,4-tiazint és 670 mg (0,00374 mól) HONB-t adunk. Az oldatot 0 C°-ra hütjük, 722 mg (0,00374 mól) DCC-t adunk hozzá, majd 48 órán át hűtőszekrényben keverjük. A melléktermékként kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szűrletet vákuumban betöményítjük. A kapott olajos anyaghoz etilacetátot adunk, majd a kivált csapadékot 70 ml 1:9 arányú metanol : kloroform elegyben oldjuk. Az oldatot 4,5 x 6,0 cm méretű, szilikagéllel töltött oszlopon bocsátjuk át. Az oszlopot 300 ml 1:9 arányú metanol : kloroform eleggyel mossuk, majd folyamatosan 4:6 arányú metanol : kloroform eleggyel eluáljuk. Az eluátum kívánt termékben dús, 210 és 460 ml-e közötti frakcióit egyesítjük, és az oldószert lepároljuk. A kapott olajos anyagot vízzel elegyítjük, az oldhatatlan szilárd mellékterméket kiszűrjük, és a szűrletet fagyasztva szárítjuk. 771 mg terméket kapunk; [at]^5 = -57,5 (c = 0,53, vízben); Rf = 0,34 (szilikagél-vékonyrétegen 1:1:1:1 arányú n-butanol:etilacetát:ecetsav:víz eleggyel futtatva, Pauly-színreagenssel előhíva). Elemzés a Cl(lH2,N604S-5 H,0 képlet alapján: számított: C: 39,67%, H: 6,65%, N: 17,36%, S: 6,62%; talált: C: 39,39%, H: 5,12%, N: 17,43%, S: 6,79%. 2. példa Oct-His-Pip-NH2 előállítása (a) lépés : Z-Pip-NH2 előállítása 3,95 g (0,015 mól) Z-Pip-OH-t és 2,70 g (0,015 mól) NHOB-t 50 ml 4:1 arányú dioxán : etilacetát elegyben oldunk, és az oldathoz 0 C -on 3,09 g (0,015 mól) DCC-t adunk. A reakcióelegyet 5 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A melléktermékként kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, és a szűrlethez erélyes keverés közben, cseppenként 5 ml tömény, vizes ammóniumhidroxid-oldatot adunk. 5 óra elteltével az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk, és a maradékot etilacetátban oldjuk. Az etilacetátos oldatot 5%-os, vizes nátrium-hidrogén-karbonátoldattal és 1 n vizes sósavoldattal mossuk, majd szárítjuk. Az etilacetátot lepároljuk, és a maradékot petroléterrel eldörzsölve kristályosítjuk. A kapott terméket etilacetát és petroléter elegyéből átkristályosítjuk. 2,62 g (66,7%) kristályos anyagot kapunk; op.: 110,0—111,0 C ; MÍj = —36,1 (c = 0,42, metanolban). Elemzés a Cp4HlxO,N2 képlet alapján: számított: C: 64,10%. H: 6,92%, N: 10,68%; talált : C : 64,11 %, H : 6,90%, N : 10,67%. (b) lépés: Z-His-Pip-NH2 előállítása 5,3 g (0,02 mól) Z-Pip-NH>-t ismert katalitikus redukcióval H-Pip-NH2-vé alakítunfc-6,1 g (0,02 mól) Z-His-NHNH,-ből kiindulva az 1. példa (b) lépésében leírt módon azidot állítunk elő, és ezt a vegyületet 100 ml dimetilformamidban H-Pip-NH,-vel reagáltatjuk. A reakcióelegyet 4 napon át 4 C -on, majd 24 órán át szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert lepároljuk, és a maradékot 60:20:6:11 arányú etilacetát : piridin : ecetsav: víz eiegyben oldjuk. Az oldatot 3,0x20,0 cm méretű, szilikagéllel töltött oszlopon bocsátjuk át, és az oszlopot ugyanezzel az összetételű oldószer-eleggyel eluáljuk. A kívánt termékben dús, 260 és 310 ml közötti frakciókat egyesítjük és bepároljuk. 4,0 g (50,0%) olajos terméket kapunk; [ot]p = —48,6° (c = 0,54, dimetilformamidban). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
