177482. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új uracil-származékok előállítására
9 177482 10 A termék elemi analízise az elméleti értékekkel jó egyezést mutat : Elemi analízis Cl6H23FN206 képletre : számított: C% = 53,62; H% = 6,47; F% = 5,30; N% = 7,82; talált: C% = 54,02; H% = 6,69; F% = 4,99; N% = 7,72. A termék NMR abszorpciós spektruma az alábbi adatokat tartalmazza (oldószer : CdCl3) : 5 = 1.17(91-1, s, CH3), 1.19(9H, s, CH3), 5.63(2H, s, CH,), 5.83(2H, s, CH2) és 7.70 (1H, d, J = 6, C6—H) A termék IR abszorpciós spektruma az alábbi jellemző abszorpciós sávokat mutatja : 3420, 2970, 1737(vs), 1685(s), 1482, 1470, 1450, 1366, 1268,1130(vs), 1050, 1035, 980, 927, 888, 855, 800, 774 és 762 cm- '. 15. példa 7,80 g (0,06 mól) 5-fluor-uracilt 100 ml dimetilformamidban oldunk. Az oldathoz előbb 10,24 g (0,06 mól) klónnetilbenzoátot adunk, majd lassan 6,07 g (0,06 mól) trietilaminnak 10 ml dimetilformamiddal képezett oldatát csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 6 órán át reagálni hagyjuk, majd a reakció lejátszódása után az oldhatatlan trietilamin-hidrokloridot szűréssel eltávolítjuk és a szőriéiből a dimetilformamidot ledesztilláljuk. A maradékot 100 ml kloroformban oldjuk és az oldatból az oldhatatlan anyagokat szűréssel eltávolítjuk, A szűrletet mossuk, szárítjuk és a kloroformot ledesztilláljuk. A maradékot szilikagél-oszlopon kromatografáljuk. Ily módon 2,73 g l-benzoiloximetil-5-íluor-uracilt (kitermelés: 17,1%, op. : 178—180 °C), és 8,43 g l,3-bisz(benzoiloximetil)-5-fluor-uracilt izolálunk (kitermelés: 35,4%, viszkózus olaj). Az l-benzoiloximetil-5-iluor-uracil NMR abszorpciós spektruma az alábbi jellemző adatokat tartalmazza (oldószer: L)MSO-d6): /7~A 5 = 5.87(2H, s, —CH2—), 7.4—8.1(5H, m,-// N ), 8.27(1H, d, 3 = 6, C6—H) és 12.00(1H, széles, NH) Afenti vegyület IR abszorpciós spektruma az alábbi jellemző abszorpciós sávokat mutatja: 3410, 3385, 3365, 3255, 1730, 1720, 1700, 1659, 1597, 1463,1449,1408,1372,1272,1260,1242,1200, 1165,1144, 1106, 1091, 1068, 1041, 1023, 962, 778 és 702 cm-’. Az l,3-bisz(benzoiloximetil)-5-fluor-uraeil NMR abszorpciós spektruma az alábbi adatokat tartalmazza (oldószer DMSO-d6): 8 = 5.5—6.4(4H, m, —CH—) és 7.4—8.2(11H,-ch—) A fenti vegyület IR abszorpciós spektruma az alábbi jellemző abszorpciós sávokat mutatja: 3110, 3078, 3000, 1768, 1755, 1743, 1707, 1608, 1591, 1462,1381,1329,1270,1190,1169,1100,1073,1055,1032, 984, 770, 714 és 692 cm-'. 16, példa 2,74 g (0,01 mól) 2,4-bisz(trimetiîsziliI)-5-fluor-uracilt és 2,71 g (0,013 mól) benzáldiacetátot és 20 ml kloroformban oldunk. A reakcióelegyhez lassan 2,0 g sztanniklorid és 10 ml kloroform oldatát csepegtetjük. Az adagolás befejezése után a kloroformot ledesztilláljuk és a maradékot vízzel extraháljuk. Az extrakciós maradékot kloroformban oldjuk, színtelenítjük, majd a kloroformot ledesztilláljuk. A maradékot kevés kloroformban oldjuk és az oldathoz petrolétert adunk. A kiváló csapadékot szűrjük. 1,06 g l-(a-acetoxi-a-fenil)-metil-5-fluor-uracilt kapunk. Op.: 172—6 C. A termék NMR abszorpciós spektruma az alábbi adatokat tartalmazza (oldószer DMSO-dfi) : 5 = 2.22(3H, s, CH3), 7.53(5H, s,—^)), 7.82(iH, s, CH), 7.91(1H, a, J = 6, C6—H) és 12.2(1H, széles, NH) A termék IR abszorpciós spektruma az alábbi jellemző abszorpciós sávokat mutatja : 3200, 3075, 2830,1765,1732,1700(g), 1657, 1467, 1378, 1250, 1200, 1108, 1020, 980, 897, 782, 720 és 690 cm T A találmányunk szerinti eljárással előállítható uracílszármazékok tumorellenes hatását az élet-tartam %-os meghosszabbításával (ILS%) fejezzük ki, mely a tumoiellenes hatás értékelésére elteijedten használatos teszt. Az eredményeket a II. táblázatban foglaljuk össze. A teszt-módszer a következő (L—1210): 6-6 BDF, egérből áEó állat-csoportokat alkalmazunk. Az egerekbe intraperitoneálísan 1 x 105 limfatikus leukémia L—1210 tumorsejtet (National Cancer Institute-tól kapott törzs) fecskendezünk. A tumorsejtek beoltása után 24 órával 6 egér naponta egyszer intraperitoneális injekció' formájában (ip.) vagy orálisan (p.o.) 5 napon át a teszt-vegyület 0,5%-os karboximetilcellulózos szuszpenzíóját kapja és a kezelt állatok túlélő napjainak számát feljegyezzük. Az ILS % értékét a kontroli-csoport egereinél mért értékekkel való összehasonlítás alapján az alábbi egyenlettel számítjuk ki : T__C ILS%=-i~xlOO ahol T = a kezelt egér-csoportnál a teszt-vegyület adagolása utáni első nap és az állat elpusztulása között eltelt napok száma; C = a kontroll egér-csoportnál a placebo beadása utáni első nap és az állat elpusztulása között eltelt napok száma. S—180 A 6 db ddN egérből álló csoportokat alkalmazunk; az egyes egerekbe 1 x 107 sarcoma 180—A tumorsejtet fecskendezünk intraperitoneálisan. A tumorsejtek befecskendezése után 24 óra elteltével 6 beoltott egér naponta egyszer a tesz't-vegyület 0,5%-os karboximetilcellulózos oldatát kapja 5 napon át intraperitoneális injekció alakjában. A tumorsejtek befecskendezése után 7 nappal az aszkitákat kivesszük a TTST (teljes töltött sejt térfogat) megmérése céljából: ■rcyj, tumor sejtek térfogata aszkiták térfogata ■ A TNH (tumomövekedési hányados) értékét az alábbi képlet alapján számítjuk ki: TNH (%) =-^x 100, ahol T = TTST a tesz-vegyület befecskendezése esetén és C = TTST a teszt-vegyület befecskendezése nélkül. A II. táblázat adatai igazolják, hogy az (I) általános képletö uraeíl-származékok erős tumoiellenes hatással rendelkeznek és tumorellenes szerként alkalmazhatók: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
