177435. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szomatosztatin analógok előállítására
5 177435 6 fennmaradó tizenkettőt is. A kapott védett tridekapeptid gyantát két azonos mennyiségű részre osztjuk. A felhasznált aminosavak, továbbá felhasználásuk sorrendje a következő: 1. N-tercier-butüoxi-karbonü-(0-benzü)-L-szerint 2. N-tercier-butüoxi-karbonU-(0-benzil)-L-treonin 3. N-tercier-butfloxi-karbonü-(0-benzü)-L-fenüalanin 10 4. N-tercier-butüoxi-karbonÜ-(0-benzü)-L-treonin 5. -Na-tercier-butüoxi-karbonil-Ne-orto- __-klórbenzüoxi-karbonÜ-L-lizin 15 6. Na-tercier-butüoxi-karbonü-(N-formil)-L-triptofán 7. N-tercier-butÜoxi-karbonü-L-fenUalanin 8. N-tercier-butüoxi-karbonü-L-fenüalanin 9. N-tercier-butüoxi-karbonü-L-aszparagin--para-nitro-fenÜészter 20 10. Na-terder-butfloxi-karbonil-Ne-orto-klórbenzüoxi-karbonü-L-lizin 11. N-tercier-b utüoxi-karbonÜ-( S-par a-metoxi-benzü)-L-cisztein 25 12. N-tercier-butüoxi-karbonÜ-glicin és 13. N-tercier-butüoxi-karbonü-D-valin. A védőcsoportok hasítását, a semlegesítést, az egyes aminosavaknak a peptidláncba való bevezeté- 30 sét az alábbiak szerint végezzük: 1. 1 g gyantára számítva 10-10 ml kloroformmal háromszor 3 percen át mossuk a terméket. 2. A butiloxi-karbonil-csoportok eltávolítására 35 1 g gyantára számítva 10-10 ml következő összetételű eleggyel kétszer, egyenként 20—20 percen át reagáltatjuk a gyantát: 29% trifluorecetsav, 48% kloroform, 6% trietil-szilán és 17% metilénklorid. 3. 1 g gyantára számítva 10. ml kloroformmal 40 két alkalommal 3—3 percen át mossuk a terméket. 4. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal 3 percen át mossuk a gyantát. 5. 90% tercier-butUalkoholt és 10% tercier-amilalkoholt tartalmazó eleggyel háromszor 3 percen át 45 mossuk a gyantát, a mosást lg gyantára számítva 10 ml eleggyel végezzük. 6. 1 g gyantára számítva háromszor, egyenként 10-10 ml metÜénkloriddal 3-3 percen át mossuk a készítményt. 50 7. Háromszor, egyenként 3 percen át 1 grammnyi gyantára számítva 10 ml 3% trietüamint tartalmazó metÜénkloriddal mosva semlegesítjük a készítményt. 8. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal 55 3 percen át, három alkalommal mossuk a készítményt. 9. 1 g gyantára számítva 10 ml 90% tercier-butüalkoholt és 10% tercier-amilalkoholt tartalmazó eleggyel 3—3 percen át háromszor mossuk a 60 gyantát. 10. 1 g gyantára számítva 10 ni metÜénkloriddal háromszor, 3-3 percen át mossuk a gyantát. 11. lg gyantára számítva 1,0mmól védett aminosavat és 1,0 mmól N^’-bicüdo-hexfl-karbodiimi- 65 det adunk a reakdóelegyhez 1 g gyantára számítva 10 ml metilénkloridban, majd 120 percen át keverjük a reakcióelegyet. 12. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 13. lg gyantára számítva 10ml 90% tercier-butüalkoholt és 10% tercier-amilalkoholt tartalmazó eleggyel három alkalommal, egyenként 3 percen át mossuk a gyantát. 14. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a gyantát. 15. lg gyantára számítva 10ml 3% trietüamint tartalmazó metÜénkloriddal háromszor, 3 percen át mosva semlegesítjük a reakcióelegyet. 16. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 17. 1 g gyantára számítva 90% tercier-butüalkoholt és 10% terder-amilalkoholt tartalmazó eleggyel három alkalommal, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 18. lg gyantára számítva 10ml metÜénkloriddal háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a gyantát. 19. 1 g gyantára számítva háromszor, egyenként 3 percen át dimetüformamiddal mossuk a készítményt. 20. 1 g gyantára számítva 1,0 mmól védett aminosavat és 1,0 mmól N,N’-biciklohexil-karbodümidet adunk a reakdóelegyhez, l g gyantára számítva 10 ml, dimetüformamid és metüénklorid 1 :1 arányú elegyében, majd 120 percen át keverjük. 21. lg gyantára számítva 10ml dimetilformamiddal három alkalommal, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 22. lg gyantára számítva 10nil metüénkloriddá háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 23. 1 g gyantára számítva 10 ni 90% terder-butüalkoholt és 10% tercier-amilalkoholt tartalmazó eleggyel háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt. 24. 1 g gyantára számítva 10 ml metÜénkloriddal három alkalommal, egyenként 3-3 percen át mossuk a gyantát. 25. lg gyantára számítva 10ml, 3% trietüamint tartalmazó metÜénkloriddal három alkalommal, egyenként 3 percen át mosva a készítményt semlegesítjük azt. 26. lg gyantára számítva 10ni metÜénkloriddal 3-3 percen át háromszor mossuk a készítményt. 27. 1 g gyantára számítva 90% tercier-butflalkoholí és 10% terder-amilalkoholt tartalmazó eleggyel háromszor, egyenként 3 percen át mossuk a készítményt, végül 28. lg gyantára számítva 10ni metÜénkloriddal 3-3 percen át háromszor mossuk a terméket. A fenti reakdósorrendet ismételjük mindegyik aminosavnak a peptidlánchoz való kötésekor, kivéve a gücint és az aszparagint. A glidn adagolásakor az 1-18. reakdólépést végezzük el. Az aszpa-3
