176983. lajstromszámú szabadalom • Eljárás specifikus chromogén új tetrapeptid-származék enzim-szubsztrátumok előállítására

176.983

10 -a reakcióelegyet bepároljuk és a 2. vagy 3. példában ismertetett módon kromatografáljii* illetve az elkülönített terméket liofilizáljuk.

Hozam: 170 mg /75 #/•

TLC tanúsága szerint nomogén, ^=0,50

* -38,6° /c ■ 0,5, viz és HOAc 1 : 1 arányú elegye/

5« páda

Bz-Ile-Glu[0-CH2CH2N/CH3/2]-Gly-Arg-pUA . HCl /molekulasúly:

859,8/ előállítása

1,0 ml vízmentes, desztillált DMF-ban feloldunk 75 mg /0,1 millimól/ S-2222-t és 100 mg /0,8 millimól/ dimetilamino-etanol-hidrokloridot, majd a kapott oldathoz 10 mikroliter piridint, 10 mg /0,074 millimól/ HOBT-t és végül 25 mg /0,12 millimól/ DCCI-t adunk.

Közel 24 óra elteltével a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szürletet pedig csökkentett nyomáson bepároljuk. Az olajos maradékot 95 % MeOH és 5 % viz elegyéből kis mennyiségben oldjuk, majd a kapott oldatot QAS-25 ioncserélő gyantát /klorid-formáju/ tartalmazó oszlopon tisztítjuk, eluálószerként az előbb emlitett oldószerelegyet használva. így a cim szerinti vegyületet kapjuk, amely ugyan mentes más peptidektől, de tartalmaz kisebb mennyiségekben szennyeződéseket, például dimetilamino-etanol-hidrokloridot. JL terméket tartalmazó frakciót ezután bepároljuk, majd Sephadex G 15 gyantát /gyártja a Pharmacia Fine Chemicals/ tartalmazó oszlopon tisztítjuk 10 £-os vizes HOAc-oldattal eluálva. A kívánt végterméket tartalmazó oldatot végül liofilizáljuk.