176800. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsav és foszfinsavak amino-acil- és peptidil-származékainak előállítására
13 176800 14 Az utóbbi maradékot 400 ml vízben oldjuk és 1 mólos benzilamint adunk titrálásszerűen pH =4,5 érték eléréséig hozzá (titer 75 ml, elméleti folyás 56 ml). A kapott oldatot bepároljuk, a maradékot vízből kristályosítjuk. 5,3 g (lS)-l-[(N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót kapunk. Op.: 210—215 °C. Az anyalúgok bepárlása, majd vizes átkristályosítása után ( 1R)- l-[(N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót kapunk. Az első generáció súlya 0,59 g {op.: 226—228 °C bomlás, [«]“=— 32,3° (c=l, ecetsavban)} a második generáció súlya 0,825 g {op.: 225—227 °C (bomlás); [a]g>=-33° (c=l, ecetsavban)}. Az első generáció vízből történő átkristályosításakor 0,333 g tiszta R-sztereoizomer benzilaminsót kapunk, op.: 226—228 °C (bomlás): [«]□ = — 33,1° (c= 1, ecetsavban). b) Az eljárás 1,1 g (2,5 míllimól) (lR)-l-[(N-benziloxikarbonil-L-alanil)-amino]-etil-foszfonsav-benzilaminsót 4 ml 2 n ammóniumhidroxidban oldunk, az oldatot kationcserélő gyanta-oszlopon (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RSOjH, 120 g, savas ciklusban frissen regenerált) átvezetjük és vízzel eluáljuk. Összesen 200 ml savas eluátumot gyűjtünk össze, melyet 100 ml-re bepárolunk. Ezután egymásután 100 ml metanolt, 0,3 g 5%-os palládium katalizátort (szénhordozón) és 3 csepp jégecetet adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten és atmoszferikus nyomáson hidrogénezzük. A katalizátort leszűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. A visszamaradó gumiszerű anyagot 50—50 ml n-propanollal háromszor bepároljuk. 0,6 g gumiszerű maradékot kapunk, op.: 275—280 °C (bomlás). Víz—etanol elegyből történő újabb átkristályosítás után 0,2 g (lR)-l-(L-alanil-amino)-etil-foszfonsavat kapunk. Op.: 295—296 °C (bomlás); [<x]d = — 44° (c=l, vízben). 11. példa a) Kiindulási anyag előállítása 30 g (0,24 mól) (lR,S)-l-aminoetil-foszfonsav és 120 ml (0,48 mól) 4 n nátriumhidroxid oldatához 14 °C-on keverés közben 180 ml (0,72 mól) 4 n nátriumhidroxid-oldatot és 102 g (0,60 mól) klórhangyasavbenzilésztert adunk felváltva 4 részletben. A keverést folytatjuk, majd 2 óra múlva a hőmérsékletet 20 °C-ra emeljük. Az elegyet további 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 600 ml étert adunk hozzá és a fölös mennyiségű klórhangyasavbenzilészter kioldása céljából 2 órán át erőteljesen keverjük. A rétegeket elválasztjuk és a vizes fázist kb. 100 ml 5 n sósavval pH=2 értékre savanyítjuk, miközben a hőmérsékletet 10 °C alatt tartjuk. A képződő szuszpenziót a széndioxid eltávolítása céljából kis térfogatra bepároljuk. A maradékot 100 ml 2 n nátriumhidroxid és 50 ml víz elegyében oldjuk, kationcserélőgyanta oszlopon (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RSO3H; 750 g, savas ciklusban frissen regenerált) átvezetjük és vízzel eluáljuk. Összesen kb. 3,2 1 savas eluátumot kapunk, melyet szobahőmérsékleten bepárolunk és 3-szor 500 ml vízzel újra bepárolunk. A maradékot vízben oldjuk és kristályosodni hagyjuk. A kristályokat szűrjük, jéghideg vízzel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 39,2 g, op.: 111—113 °C (bomlás). Az egyesített anyalúgokat bepároljuk és a maradékot 75 ml víz és 10 ml metanol elegyéből hűtés közben kristályosítjuk. További 6,51 g terméket kapunk, op.: 110—112 °C (bomlás). Összesen 45,71 g (lR.S)-l-(benziloxikarbonilamino)-etil-foszfonsavat kapunk, melyet benzilaminsójaként jellemzünk, op.: 196—197 °C (bomlás). 42,2 g (163 millimól) (lR,S)-l-(benziloxikarbonil-amino)-etil-foszfonsavat 100 ml etanolban oldunk. Az oldatot 30,8 g (81,5 millimól) kinin-trihidrátnak 100 ml metanollal képezett oldatával kezeljük, az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán át keverjük, majd egy éjjelen át 0 cC-on keverjük. Az (lS)-l-(benziloxikarbonil-amino)-etil-foszfonsav-kininsót leszűrjük és metanollal mossuk. Az egyesített szűrleteket bepároljuk és a maradékot 300 ml 2 n ammóniumhidroxid-oldatban oldjuk. Az oldatot 3-szor 300 ml kloroformmal extraháljuk. Az egyes kloroformos extraktumokat 150—150 ml vízzel mossuk. Az egyesített vizes extraktumokat bepároljuk, kationcserélőgyanta-oszlopon (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RSO3H; 750 g, savas ciklusban frissen regenerált) átvezetjük, majd vízzel eluáljuk. Mintegy 2,3 liter savas eluátumot kapunk, melyet bepárolunk. A maradékot ismét bepároljuk, éspedig először 3-szor 200 ml vízzel, majd 3-szor 300 ml metanollal. Mintegy 24 g gumiszerű maradékot kapunk, melyet 100 ml vízmentes metanolban oldunk és dehidroabietilamin-oldattal kezelünk [82 millimól; 28,4 g (82 millimól) dehidroabietilaminacetátból ammóniumhidroxid-petroléter eleggyel frissen készített]. Az elegyet 0 °C-on állni hagyjuk, szűrjük és a szűrletet metanollal és éterrel mossuk. 47,4 g nyers (lR)-l-(benziloxikarbonilamino)-etil-foszfonsav-dehidroabietilamin sót kapunk, op.: 189—194 °C (bomlás); [?.]□'= [16,8° (c=0,5, metanolban). Metanol és víz elegyéből történő átkristályosítás után 33,0 g tiszta (lR)-l-(benziloxikarbonil-amino)-etil-foszfonsav-dehidroabietilaminsót kapunk, op.: 202—205 °C (bomlás); [«]d = + 18,10 (c=0,5, metanolban). 8,0 g (14 millimól) (lR)-l-(benziloxikarbonil-amino)-etil-foszfonsav-dehidroabietilaminsót 100 ml 2 n ammóniumhidroxid és 100 ml petroléter (fp.: 60—80 °C) között megosztunk. Az elegyet erősen rázzuk, a rétegek szétválnak. A vizes fázist 2-szer 50 ml petroléterrel extraháljuk. Minden petroléteres extraktumot 2-szer 50 ml vízzel extrahálunk. A vizes extraktumokat egyesítjük és szobahőmérsékleten bepároljuk. Az olajos maradékot vízben oldjuk, az oldatot kationcserélő oszlopon (B. D. H„ Zerolit 225, SRC 13, RSO3H; 250 g; savas ciklusban frissen regenerált) és vízzel eluáljuk. Összesen 800 ml savas frakciót gyűjtünk össze, melyet 400 ml-re bepárolunk. A kapott koncentrátumhoz egymásután 2,0 g 10%-os palládium katalizátort szénhordozón, 400 ml metanolt és 0,2 ml jégecetet adunk. Az elegyet hidrogénezzük. A katalizátort leszűrjük, a szűrletet bepároljuk. A maradékot 3-szor 100 ml n-propanollal ismét bepároljuk, és éterrel eldörzsöljük. A kapott szilárd anyag 285—288 °C-on olvad (bomlás). Víz és etanol elegyéből történő átkristályosítás után 1,0 g (lR)-l-amino-etil-foszfonsavat kapunk, op.: 294— 295 °C (bomlás); [«]“ = —16,9° (c=2,1 n nátriumhidroxidban). 0,4 g (3,2 millimól) (lR)-l-aminoetil-foszfonsav, 14 ml víz és 7 ml etanol oldatához 10 °C-on keverés közben 0,806 g (9,6 millimól) nátriumhidrogénkarbonátot adunk részletekben. Az elegyhez 0 °C-on keverés 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
