176800. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsav és foszfinsavak amino-acil- és peptidil-származékainak előállítására
9 176800 10 ziloxikarbonil-L-valil)-amino]-metil-foszfonsav benzilaminsóját állítjuk elő. Op. : 235—237 °C (bomlás); [a]o = —5,7° (c=0,l, ecetsavban). b) Az eljárás Az 1 b) példában ismertetett eljárással analóg módon [(N-benziloxikarbonil-L-valil)-amino]-metil-foszfonsav-benzilaminsóból kiindulva (L-valil-amino)-metil-foszfonsavat állítunk elő. Op.: 290—292 °C (bomlás). [a]g>=+67,9° (c=0,85, vízben). 4. példa a) Kiindulási anyag előállítása Az 1 a) példában ismertetett eljárással analóg módon N-benziloxikarbonil-L-leucin-N-hidroxi-szukcinimidészterből kiindulva az [(N-benziloxi-karbonil-L-leucil)-aminoj-metil-foszfonsav-benzilaminsót állítjuk elő. Op. : 175—178 °C (bomlás); [a£°=-10,l° (c=0,77, ecetsavban). b) Az eljárás Az 1 b) példában ismertetett eljárással analóg módon [(N-benziloxikarbonil-L-leucil)-amino]-rnetil-foszfonsav-benzilaminsóból kiindulva (L-leucil-amino)-metil-foszfonsavat állítunk elő. Op.: 262—264 °C (bomlás); [(x]d = +59,7° (c—0,67, vízben). 5. példa a) Kiindulási anyag előállítása Az 1 a) példában ismertetett eljárással analóg módon N2,N6 * *-bisz-(benziloxikarbonil)-L-lizin-N-hidroxi-szukcinimidészterből kiindulva {[N2,N6-bisz-(benziloxikarbonil)-L-lizil]-amino}-metilfoszfonsavat állítunk elő. Op.: 160—162 °C (bomlás); [a]“=-9,55° (c -0,5%, etanolban). A kapott vegyületet a következő lépésben a szabad sav alakjában dolgozzuk tovább. b) Az eljárás Az 1 b) példában ismertetett eljárással analóg módon {[N2,N6-bisz-(benziloxikarbonil)-L-lizil]-amino}-metil-foszfonsavból kiindulva 2 n sósav jelenlétében történő hidrogénezéssel (L-lizil-amino)-metil-foszfonsav-dihidrokloridot állítunk elő. Op. : 212—217 °C (bomlás); Wd =+22,35° (c= 1, vízben). 6. példa a) Kiindulási anyag előállítása Az la) példában ismertetett eljárással analóg módon dolgozunk azzal a változtatással, hogy az ioncserélésnél viz helyett metanol—viz elegyet alkalmazunk. N-ben-ziloxikarbonil-L-fenilalanin-N-hidroxi-szukcinimidész-terből kiindulva [(N-benziloxikarbonil-L-fenilalanil)-aminoj-metil-foszfonsavat állítunk elő. Op.: 181— 182 °C (bomlás); [«]“= —11,9° (c=l,0, metanolban). A vegyületet a következő lépésben a szabad sav alakjában alkalmazzuk. b) Az eljárás Az 1 b) példában ismertetett eljárással analóg módon [(N-benziloxikarbonil-L-fenilalanil)-aminoj-metil-foszfonsavból kiindulva (L-fenilalanil-amino)-metil-foszfonsavat állítunk elő. Op. : 252—255 °C (bomlás); Md = +67,8° (c=0,51, vízben). 7. példa a) Kiindulási anyag előállítása 0,91 g (0,005 mól) (L-alanil-amino)-metil-foszfonsavat 25 ml víz és 12,5 ml etanol elegyében oldunk és 1,26 g (0,015 mól) szilárd nátriumhidrogénkarbonátot adunk az átlátszó oldathoz. Az oldatot 0 °C-on keverjük, miközben 1,6 g (0,005 mól) N-benziloxikarbonil-L-alanin-N-hidroxi-szukcinimidészterek 16 ml etanollal képezett meleg oldatát adjuk hozzá, majd 2-szer 5 ml etanollal mossuk. A kezdetben heterogén elegy 5 perc alatt homogénné válik. Az elegyet 2 órán át 0 °C-on, majd szobahőmérsékleten 16 órán keresztül keverjük. Az etanolt ledesztilláljuk és a maradékot vízzel újra bepároljuk. A maradékot 100 ml vízben oldjuk és előbb 100 ml, majd 2-szer 50 ml kloroformmal extraháljuk. A vizes fázist kb. 15 ml 2 n sósavval pH = 2 értékre savanyítjuk, majd előbb 100 ml és utána 2-szer 50 ml kloroformmal extraháljuk. A termék vékonyrétegkromatográfiás meghatározás szerint a vizes fázisban van. A vizes réteget a szilárd anyag kiválásának megkezdődéséig bepároljuk. Átlátszó oldat képződéséhez szükséges legkisebb mennyiségű 2 n ammóniumhidroxidot adunk hozzá. Az oldatot kationcserélő gyanta oszlopon vezetjük át (B. D. H., Zerolit 225, SRC 13, RS03H; 150 g, frissen regenerálva savas ciklusban) és vízzel eluáljuk. A csupán a kívánt kiindulási anyagot tartalmazó savas eluátumokat (vékonyrétegkromatográfiás meghatározás szerint; 3-szor 100 ml) egyesítjük, bepároljuk, majd a sósav eltávolítása céljából vízzel újra bepároljuk. A nyers maradék [(N-benziloxikarbonil-L-alanil-L-alanil)-amino]-metil-foszfonsavból áll, melyet a következőképpen alakítunk a benzilamin-sóvá. A maradékot vízben felvesszük és titrálásszerűen pH=4,5 érték eléréséig 4 n benzilamint csepegtetünk hozzá (titer 1,6 ml, elméleti fogyás 1,25 ml). A termék állás közben kristályosodik, majd meleg vízben szuszpendáljuk, lehűtjük és egy éjjelen át állni hagyjuk. A kiváló csapadékot szűrjük, 25 ml vízzel klorid-ionmentesre mossuk (benzilaminhidroklorid). A szilárd anyagot egymásután etanollal és éterrel mossuk, majd szárítjuk. 1,085 g [(N-benziloxikarbonil-L-alanil-L-alanil)-amino]-metil-foszfonsav-benzilaminsót kapunk, op.: 232— 234 °C (bomlás); [aű^=— 22,1° (c=0,5, ecetsavban). Az anyalúgok bepárlásával további 0,3 g benzilaminsót kapunk, op. : 232—234 °C (bomlás). Az első generáció 60 ml vízből történő átkristályositáskor 0,71 g 232— 234 °C-on olvadó (bomlás) tiszta benzilaminsót kapunk, [a]j?=—20,3° (c=0,5 ecetsavban). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
