176800. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsav és foszfinsavak amino-acil- és peptidil-származékainak előállítására

5

176800

6

atomszámü)-alkilaminnal pl. trietilaminnal, vagy N-etil-morfolinnal) iners szerves oldószerben (pl. tetrahidrofuránban, 1,2-dimetoxi-etánban, diklórmetánban, toluolban, petroléterben vagy ezek elegyében) reagáltatjuk, majd a kapott sót valamely klórhangyasav-észterrel (pl. klórhangyasavetil- vagy -izobutilészterrel) alacsony hőmérsékleten hozzuk reakcióba. A kapott vegyes anhidridet ezután előnyösen in situ reagáltatjuk a megfelelő (III) általános képletű vegyülettel.

Másik eljárás szerint a megfelelő (III) általános képletű vegyületet savazid alakjában védett végállású karboxil-csoportot tartalmazó megfelelően védett aminosavval, di-, tri- vagy tetrapeptiddel reagáltatjuk. A kondenzációs reakciót előnyösen iners szerves oldószerbn (pl. dimetilformamidban) alacsony hőmérsékleten hajthatjuk végre.

Eljárhatunk oly módon is, hogy a megfelelő (III) általános képletű vegyületet aktív észter (pl. p-nitro-fenil-, 2,4,5-triklór-fenil- vagy N-hidroxi-szukcinimid-észter) alakjában levő végállású karboxil-csoportot tartalmazó megfelelően védett aminosavval vagy di-, tri- vagy tetrapeptiddel hozzuk reakcióba. A kondenzációt előnyösen iners szerves oldószerben (pl. dimetilformamidban) vagy — amennyiben R40 és/vagy R41 jelentése kis szénatomszámú alkoxi-csoport — vizes alkanolban (pl. vizes etanolban) hajthatjuk végre.

Másik módszer szerint a megfelelő (III) általános képletű vegyületet savklorid alakjában levő végállású karboxil-csoportot tartalmazó megfelelően védett aminosavval vagy di-, tri- vagy tetrapeptiddel hozzuk reakcióba. A kondenzációt előnyösen bázis jelenlétében, alacsony hőmérsékleten hajthatjuk végre.

A találmányunk szerinti eljárással előállítható új peptid-származékok antibiotikumok (pl. penicillin- és cefalosporin-antibiotikumok és D-cikloszerin) aktivitását potencírozzák. így pl. az (lR)-l-(L-alanil-amino-etil-foszfonsav egy cefalosporin és penicillin-típusú antibiotikummal és D-cikloszerinnel képezett kombinációban mutatott gátlási koncentráció index-hányadát E. colival szemben Davis-féle minimális táptalajon az 1. táblázatban adjuk meg. A táblázatban az antibiotikum és a peptid-származék mennyisége súlyrészekben értendő.

1. táblázat

Antibiotikum

Minimális gátlási '

koncentráció ; _, ., .

1 Gátlási ! koncentráció Antibioti- 1 Antibiotikum + indexhányad

kúra önmagában

peptidszármazék

Amoxicillin

4

1+0,06

0,3

D-cikloszerin

64

0,25+0,25

0,25

Cephradine

16

4+0,25

0,5

Az alábbi táblázatban a következő (I) általános képletű vegyületek gátlási koncentráció index-hányadát mutatjuk be E. colival szemben Davis-féle minimális táptalajon D-cikloszerinnel képezett 2: 1 arányú kombinációban:

A-vegyület : ( 1 R)-1 -(L-alanil-amino)-etilfoszfonsav ; B-vegyület : ( 1 R)-(L-alanil-L-alanil-amino)-etil-foszfonsav;

C-vegyület : ( 1 R)-1 -(L-alanil-L-alanil-L-alanil-amino)-etil-foszfonsav;

D-vegyület: (lR>l-(L-alanil-L-alanil-L-alanil-L-alanil-amino)-etil-foszfonsa v ;

E-vegyület: (lR)-l-(L-fenilalanil-amino)-etil-foszfonsav; F-vegyület : ( 1 R)-1 -(L-valil-amino)-etil-foszfonsav ; G-vegyület: (lR)-l-(L-leucil-amino)-eti!-foszfonsav.

5

Peptid-származék

2. táblázat

D-cikloszeringátlás j koncentrációhányadosa i

Gátlási koncentráció index-hányad

A

0,06 '

0,3

10

B

0,03

0,2

C

1 0,05

0,1

D

0,10

0,2

E

0,13

0,48

F

0,13

0,60

15

G

! 0,12

0,27

A találmányunk szerinti eljárással előállítható peptid-származékokat az antibiotikummal képezett kombináció formájában adhatjuk be, vagy az antibiotikumot 20 és a peptid-származékot külön-külön — szükség esetén más úton — adagolhatjuk. A peptid-származék és az antibiotikum arányának alsó és felső határa tág tartományon belül változhat és több tényezőtől (pl. az adott (I) általános képletű vegyület és antibiotikum, az adago- 25 lás módja, az elpusztítandó mikroorganizmus) függ. így pl. az (I) általános képletű vegyületet és az antibiotikumot mintegy 100: 1 és mintegy 1: 100 közötti arányban adagolhatjuk.

Az (I) általános képletű peptid-származékok gramm- 30 pozitív és gramm-negatív mikroorganizmusok pl. E. coli, P. vulgaris, Ps. aeruginosa és S. aureus ellen fejtenek ki antibakteriális hatást.

Az (I) általános képletű vegyületek antibakteriális hatását az alábbi 3. táblázat adatai igazolják, melyekben 35 az (lR)-l-(L-alanil-amino)-etil-foszfonsav különböző patogén mikroorganizmusokkal szemben mutatott minimális gátlási koncentrációját tüntetjük fel.

3. táblázat

Mikroorganizmus

Minimális gátlási koncentráció (pg/ml)

E. coli NCTC 10418

0,25

C. coli NCIB 8879

0,25

Enterobacter Cl,5

2,00

Staphylococcus aureus

16,00

Klebsiella aerogenes 33 Ba

1,00

Strep, faecalis OGFS1

4,00

Haemophilus influenzae

8,00

Bacillus subtilis

32,00

Salmonella typhimurium

32,00

A találmányunk szerinti eljárással előállítható vegyületeket a gyógyászatban a hatóanyagot és megfelelő 55 hordozóanyagot tartalmazó készítmények alakjában alkalmazhatjuk. Hordozóanyagként szerves vagy szervetlen, iners, enterális (pl. orális) vagy parenterális adagolásra alkalmas anyagokat (pl. vizet, laktózt, keményítőt, magnéziumsztearátot, gumi arabikumot, zsela- 60 tint, polialkilénglikolokat, vazelint stb.) alkalmazhatunk. A gyógyászati készítményeket szilárd (pl. tabletta, drazsé, kúp vagy kapszula) vagy folyékony (pl. oldat, szuszpenzió vagy emulzió) alakban formulázhatjuk. A gyógyászati készítmények sterilezhetők, illetve adalék- 65 anyagokat (pl. stabilizálószereket, tartósítószereket,

3