176715. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17Ó-etinil-3,7,7ß-trihidroxi-ösztratrién-származékok előállítására
7 176715 8 Az átalakulás lefolyását a fermentléből vett minták metilizobutilketonos kivonatainak vékonyrétegkromatográfiás analízisével követjük. Teljes átalakulás után (45 órás kontakidő) a fermentor tartalmát 10—10 liter metilizobutilketonnal kétszer kikeverjük 5 és a kivonatot 50°C-os fürdőhőmérsékleten vákuumban bepároljuk. A maradékot a habzásgátló szer eltávolítása érdekében metanolban felvesszük, a szilikonolajat választótölcséren elkülönítjük, az oldatot redős szű- 10 rőn szűrjük és ezt követően a szűrletet szárazra pároljuk. A visszamaradó nyersterméket metilénkloridban oldjuk és tisztítás végett kovasavgél-oszlopon metilénkloríd-metilénklorid/aceton oldószereleggyel kromatografáljuk. Etilacetátból való átkristályosítás 15 után a tiszta, fehér 17o-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-3,7a,17/3-triol 234—235 °C-on (bomlás közben) olvad. C20H24O3 (Mólsúly = 312,4). Kitermelés: 710 mg. 2. példa 500 mg 17a-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-3,7a,17j8- -triolt 10 ml piridinben oldunk, az oldathoz 0,5 ml 25 ecetsavanhidridet adunk és az elegyet jéggel való hűtés közben keverjük. Ezután az oldatot 100 ml 8%-os hűtött kénsavba belekeverjük és a kivált csapadékot semlegesre mossuk. Szárítás után a csapadékot éter/hexán-elegyből átkristályosítjuk és ily 30 módon tiszta 3-acetoxi-17a-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-7a,17/3-diolt kapunk, amely 133-135 °C-on olvad. Kitermelés: 365 mg. 3. példa 100 mg 17a-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-3,7a,17/3-triol 5 ml etilacetáttal készített oldatához szobahőmérsékleten egymásután hozzáadunk 1 ml ecetsavanhid- 40 ridet és 1 csepp (70%-os) perklórsavat. Az elegyhez 3 perc elteltével hozzáadunk 1 csepp piridint, telített nátriumklorid-oldattal mossuk, szárítjuk és bepároljuk. Ily módon 78 mg 3,7a,17/3-triacetoxi-17a-etinil- l,3,5-(10)-ösztratriént kapunk amorf anyag- 45 ként. UV (metanol): e2 j 5 = 9760 e26i= 541 *267 = 715 e274 = 696 50 4. példa 150 mg 17a-etenil-l,3,5(10)-ösztratrién-3,7al7/3- -triol 3 ml piridinnel készített oldatához hozzáadunk 55 1 ml ecetsavanhidridet és az elegyet 16 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezután 25 ml dklohexánt vagy széntetrakloridot adunk az elegyhez, utána pedig szárazra pároljuk. A maradékot etilacetátban feloldjuk és vízzel mossuk, szárítjuk 60 és bepároljuk. Ily módon 120 mg nyersterméket kapunk, amelyet rétegkromatográfiával tisztítunk, így 110 mg 3,7a-diacetoxi-17a- etinil-1,3,5( 10)-ösztratrién-170-olt kapunk, amely 165-166 °C-on olvad. 65 200 mg 17a-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-3,7al7/3- -triolt 3 ml metanol és 1 ml ciklopentilbromid elegyében oldunk melegítés közben, ezután 200 mg káliumkarbonátot adunk az oldathoz és az elegyet nitrogéngáz légkörben 12 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet ecetsavas jeges vízbe öntjük és metilénkloriddal extraháljuk. A szerves fázist semlegesre mossuk, szárítjuk és bepároljuk. A kapott 150 mg nyersterméket rétegkromatográfiásan tisztítjuk és így 110 mg 17a-etinil-3-ciklopentiloxi-1,3,5( 10)-ösztratrién-7a, 17/3- -dióit kapunk, amelynek az olvadáspontja 126-128 °C. 5. példa 6. példa 350 mg 17a-etinil-3-ciklopentiloxi-l ,3,5(10)-ösztratrién-7a,17/3-diol 5 ml etilacetáttal készített oldatához hozzáadunk 1 ml ecetsavanhidridet és 1 csepp (70%-os) perklórsavat, majd az elegyet szobahőmérsékleten keverjük. Ezután 0,5 ml piridint adunk az elegyhez és telített nátriumklorid-oldattal mossuk, szárítjuk és. bepároljuk. Ily módon 310 mg 7a,17/3-diacetoxi-17a-etinil-3- ciklopentiloxi-l,3,5(10)-ösztratriént kapunk amorf anyag alakjában. UV (metanol): e22 2 =9060 62 2 7 = 8730 62 7 4 = 1460 e2 80 = 1920 *2 88 = 1770 7. példa 500 mg 17a-etinil-1,3,5( 10)-ösztratrién-3,7a, 17/3- -triolt 10ml piridinben oldunk, az oldathoz lm1 vajsavanhidridet adunk és az elegyet szobahőmérsékleten keverjük. Az oldatot ezután 100 ml 8%-os hűtött kénsavba bekeverjük és a kivált csapadékot semlegesre mossuk, amelyet szárítás után éter/hexán-elegyből kikristályosítunk. Ily módon tiszta 3-butiriloxi-17a-etinil-l,3,5(10)-ösztratrién-7a, 17/3- -diolt kapunk, amely 130-131 °C-on olvad. Kitermelés: 410 mg. 8. példa 500 mg 17a-etinil-1,3,5(10)-ösztratrién-3,7a, 17/3- -triolt 10 ml piridinben oldunk, az oldathoz 3 ml vajsavanhidridet adunk és az elegyet 72 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet ezután 100 ml 8%-os hűtött kénsav-oldatba keverjük bele és a kivált csapadékot semlegesre mossuk. További tisztítás végett a terméket kovasavgél-oszlopon kromatografáljuk és éter/hexátlelegyből átkristályosítjuk. A tiszta 3,7a-dibutiriloxi-17a-etinil-l ,3,5(10)-ösztratrién- 17/?-ol 132,5-133 °C-on olvad. lütermelés: 380 mg. 4
