176715. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 17Ó-etinil-3,7,7ß-trihidroxi-ösztratrién-származékok előállítására
3 176715 4 1. Táblázat Vegyület Küszöbérték (mg) p.o. Relatív hatékonyság vaginotrop uterotrop Disszociációs hányados p.o. ösztradiol 0,05-0.1 1 1 1 17a-etinilösztradiol 0,01 9,1 10,9 0,9 17a-etinil-1,3,5(10)-ösztratrién-3,7 a, 170-t riol 0,03 0,898 0,099 9,1 kapjuk a Q disszociációs értéket. Az ösztrándiol sztandard-vegyületre 0=1. Azok a vegyületek, amelyeknél Q >1, viszonylag vaginotropok, amelyeknél pedig Q> 1, viszonylag uterotropok. Az 1. Táblázatban megadott küszöbértékeket a 20 szokásos Allen-Doisy-teszttel patkányokon határoztuk meg. (J. Amer. med. Assoc. 81, /1923/ 819). A találmány szerinti eljárás kiterjed olyan gyógyszerkészítmények előállítására is, amelyek hatóanyagként az (1) általános képletű 7-hidroxi-öszt- 25 radiol-származékokat tartalmazzák. A gyógyszerkészítmények előállítása a szokásos módon történik, amelynek során a hatóanyagokat a galénusi gyógyszerészeiben szokásos vivőanyagok- 30 kai, higítószerekkel, ízjavító anyagokkal és hasonlókkal a kívánt alkalmazási termékekké, így tablettákká, drazsékká, kapszulákká, oldatokká és hasonlókká alakítjuk. Az így készített gyógyszerekben a hatóanyagkoncentráció függ a készítménytől. A 35 tabletták előnyösen 0,01-10 mg hatóanyagot, a parenterális beadásra alkalmas oldatok pedig 0,1-20 mg hatóanyagot tartalmaznak ml-ként. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények ada- 40 golása a beadás módja és a mindenkor kiválasztott vegyület szerint változik. Az adag ezenkívül a kezelt beteg állapotához is igazodik. Általában olyan koncentrációban adagoljuk a találmány szerinti vegyületeket, amelyek hatásos eredményekhez 45 vezetnek anélkül, hogy bármilyen hátrányos vagy káros mellékhatásokat okoznának. A találmány szerinti vegyületek például olyan dózisnagyságban adhatók be, amelyek körülbelül 0,02 mg és 20 mg közötti tartományban vannak, bár bizonyos körül- 50 mények között változtatásokat végezhetünk, így 20 mg-nál nagyobb, pl. egészen 50 mg-ig terjedő mennyiségek alkalmazhatók. Az adagnagyság előnyösen körülbelül 0,05 mg és 5 mg közötti tartományban van. Az (I) általános képletű 7-hidroxi- 55 -ösztradiol-származékokat a találmány szerint úgy állítjuk elő, hogy egy (III) általános képletű 17a-R4 -3,170- dihidroxi-ösztratrién-származékot, ahol Rt jelentése az alkilszulfonsavmaradék kivételével a fenti és R4 jelentése a fenti, egy, az 60 Absidia coerulia, Aspergillus luchuensis, Rhizopus stolonifer, Pellicularia filamentosa, Rhizopus oryzae, Rhizopus kazanensis, Rhizopus cohnii, Rhizopus shanghaiensis, Diplodia natalensis specieshez tartozó törzs, előnyösen az 65 Absidia coerulia ATCC 8990, Aspergillus luchuensis CBS, Rhizopus stolonifer ATCC 6227 b és ATCC 10404, Pellicularia filamentosa ATCC 13289, Rhizopus oryzae ATCC 4858, Rhizopus kazanensis ATCC 8998, Rhizopus cohnii ATCC 8996, Rhizopus shanghaiensis ATCC 10 329, Dipolodia natalensis ATCC 9055, törzsek tenyészetével fermentálunk, majd a kapott Rj, R2 és R3 helyén hidrogénatomot tartalmazó vegyületeket kívánt esetben az Rt, R2 és R3 helyettesítőnek a végtermékben kívánt jelentésétől függően éterezzük, vagy észterezzük, majd adott esetben az éter vagy acilcsoportot lehasítjuk. Az I általános képletű vegyületek mikrobiológiai úton való előállításánál a fermentációt ugyanolyan körülmények között végezzük, mint amilyeneket szteroidoknak gombakultúrákkal való ismert fermentációs átalakításainál alkalmazunk. A (III) általános képletű vegyületek fermentativ hidroxilezését előnyösen a fent megnevezett törzsekkel süllyesztett kultúrában aerob körülmények között végezzük. Ehhez a gombakultúrákat levegőztetés közben olyan táptalajon tenyésztjük, amely a gombák növekedéséhez szükséges szénhidrátokat, fehérjéket, tápsókat és növekedést elősegítő anyagokat tartalmaznak. A tenyésztés befejezése után az anyagot vizes szuszpenzióként vagy valamely alkalmas oldószerben, így metanolban, etanolban, glikolmonometiléterben, dimetilformamidban vagy dimetilszulfoxidban, oldva adjuk hozzá a kultúrákhoz. Az anyag átalakulását célszerűen kivett minták kivonatainak vékonyrétegkromatográfiás analízisével követjük. Ahogy a szteroidok minden ismert mikrobiológiai átalakításánál, a találmány szerinti eljárásnál is függ az optimális anyagkoncentráció és az optimális fermentációs idő az anyag fajlagos szerkezetétől és a fermentációs körülményektől, ezért ezeket a paramétereket a szakember előtt ismert előkísérletekkel meg kell határozni. A fermentáció befejeződése után a fermentációs termékeket önmagában ismert módon elkülönítjük. Az elkülönítés például úgy történhet, hogy a fermentációs elegyet valamely poláros, vízzel nem elegyedő oldószerrel, így etílacetáttal, butilacetáttal vagy metilizob utilketonnal, extraháljuk. Az extrák - tumokat betöményítjük és az így kapott nyerster-2
