176505. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új n-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-származékok előállítására
5 176505 6 vizsgálandó vegyületet testsúly-kilogrammonként 100 mg mennyiségben perorálisan adtuk be, és a beadás után 60 perccel mindegyik patkány farokvénájába 28 mg brómszulfoftaleint fecskendeztünk. A beadás után 30 perccel mindegyik patkány szívéből vérmintát vettünk, és szokásos kolorimetriás módszerrel meghatároztuk a brómszulfoftalein koncentrációját. A kontrolikísérletekben a vizsgálandó vegyület helyett perorálisan fiziológiás nátriumklorid-oldatot adtunk be. A kapott eredményeket a 2. táblázat szemlélteti. 2. táblázat Vizsgált vegyület brómszulfoftaleinmaradék (°/c) Kontroll 51,9 ±6,7 N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-17,3 ±8,4**-antranilsav (P 0,01) ** Student-féle T-próba átlagértéke b) Indocianozöld (ICG) próba Sprague—Dawley törzsbeli, 180—210 g súlyú nőstény patkányokat 15 óra hosszat tartó koplaltatás után 4 patkányból álló csoportokra osztottuk. A patkányokba a vizsgálandó vegyületet testsúly-kilogrammonként 100 mg mennyiségben perorálisan adtuk be, és a beadás után 60 perccel mindegyik patkány farokvénájába 2 mg indocianozöldet fecskendeztünk. A beadás után 15 perccel mindegyik patkány szívéből vérmintát vettünk, és szokásos kolorimetriás módszerrel meghatároztuk benne az indocianozöld koncentrációját. A kontrolikísérletekben a vizsgálandó vegyület helyett fiziológiás konyhasó oldatot használtunk. A kapott eredményeket a 3. táblázatban foglaltuk össze. 3. táblázat Vizsgált vegyület maradék (°/o) Kontroll (fiziológiás sóoldat) 7,8 ±1,5 N-(2'-karboxi-fenil)-4-klőr-5,1 ±0,2**-antranilsav (P 0,02) ** Student-féle T-próba átlagértéke ej Bilirubin kiválasztásra gyakorolt hatás Sprague—Dawley törzsbeli, 160—200 g súlyú nőstény patkányokat 15 óra hosszat tartó koplaltatás után 4 patkányból álló csoportokra osztottuk. A patkányokba a vizsgálandó vegyületet testsúly-kilogrammonként 100 mg mennyiségben perorálisan adtuk be, és’a beadás után 60 perccel mindegyik patkány farokvénájába 150 g bilirubint fecskendeztünk. A beadás után 20 perccel mindegyik patkány szívéből vérmintát vettünk, és a bilirubin koncentrációját a vérben szokásos módon meghatároztuk. A kontrolikísérletben a vizsgálandó vegyület helyett fiziológiás nátriumklorid-oldatot használtunk. Az eredményeket a 4. táblázat mutatja. 4. táblázat Vizsgált vegyület bilirubin-maradék (X) Kontroll (fiziológiás nátriumklorid-oldat) 85,4 ±9,8 N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-39,7 ±13,3**-antranilsav (P 0,01) ** Student-féle T-próba átlagértéke 3. kísérlet ízületi gyulladás (ízületi csúz modellbetegség) kezelésében tapasztalt hatékonyság Kísérleti állatként 8 hetes Sprague—Dawley törzsbeli hím patkányokat használtunk. Az ízületi gyulladást úgy váltottuk ki, hogy mindegyik patkány farkába elölt tuberkulózis bacilusok Freund-féle segédanyaggal készült szuszpenzióját szubkután fecskendeztük. Az injekció utáni tizenhetedik napon a hátsó mancs térfogatának mérésével meghatároztuk mindegyik patkány hátsó mancsának duzzadását, és a patkányokat úgy osztottuk tízes csoportokba, hogy a csoportokon belül a duzzadás átlagos mértéke nagyjából azonos legyen. Mindegyik patkánycsoportnak a vizsgálandó vegyületet, az N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-dinátriumsót, az 5. táblázatban feltüntetett mennyiségben a szenzitizálás utáni tizenhetedik naptól kezdve, naponta ötször egy héten át perorálisan beadtuk. A vizsgálandó vegyület adagolásának befejezése után egészen a szenzitizálás utáni harmincegyedik napig minden második vagy második napon megmértük mindegyik patkány hátsó mancsának duzzadását. A hátsó mancs térfogatának csökkenését használtuk a farmakológiai hatékonyság értékelésében mutatószámként. Az eredményeket az 1. ábra grafikonja szemlélteti. Bebizonyosodott, hogy a találmány szerinti vizsgált vegyület testsúly-kilogrammonként 5 vagy 10 mg mennyiségben való adagolásával a patkány ízületi gyulladásának kezelésében jelentékeny javulás érhető el. Az 5. táblázatban azokat a statisztikai kísérleti eredményeket tüntetjük fel, amelyeket a szenzitizálás utáni 24. és 31, napon kaptunk. 5. táblázat Adag (mg/kg) Szenzitizálás óta eltelt 24 napok száma 31 Kontroll 3,693 ±0,130 (ml) 3,646 ±0,170 (ml) 0,1 3,524 ±0,170 3,762 ±0,216 1 3,214 ±0,161 3,289 ±0,223 5 3,175 ±0,100** 3,102 ±0,141* 10 3,027 ±0,126** 3,121 ±0,176* 100 3,350 ±0,168 3,482 ±0,170 * Átlagértéken alapuló Student-féle T-próba (P 0,05) ** Átlagértéken alapuló Student-féle T-próba (P 0,01) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
