176452. lajstromszámú szabadalom • Eljárás ß-daunozaminil-nukleozidok és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
3 176452 4 1. példa 9-(ß-Daunozaminil)-adenin előállítása 1,22 g 2,4-bisz-trifluoracetil-daunozaminil-klorid 5 50ml vízmentes metilénkloriddal készített oldatához 1,33 g benzoil-adenint, majd 4,3 g (4Á-ös) molekulaszűrőt adunk. A kapott szuszpenziót 5 napon át szobahőmérsékleten keverjük. Utána az át nem alakult benzoil-adenint és a molekulaszűrőt 10 kiszűrjük és a metilénkloridot lepároljuk. Világos színű, szirupszerű anyag marad vissza. Az anyagot 50 ml metanolban visszafoíyató hűtő alkalmazásával egy órán át melegítjük. Az oldószert lepároljuk, és a kapott olajos maradékot szilikagél oszlopon, elu- 15 álószerként aceton-benzol-elegyet alkalmazva (5 :1 térfogatarányú elegy) tisztítjuk. 0,49 g 9-[(3’-trifluoracetil)- j3-daunozaminil]-benzoil-adenint, azaz védett származékot kapunk, amely 143-145 °C-on olvad. Kitermelés: 31%. 20 NMR-színk.ep (deutero-kloroformban): 1,38 S (d, J—6 5 Hz, CH3-C/57), 5,94 5 (dd, Jaa = 10 Hz, Jae = 4 Hz, C/T/H), 7,30-8,10 5 (m, C6HS-), 8,30 és 8,76 5 (két s, C/2/H és C/8/H). Tömegspektrum m/e = 464 (M+). 25 A fentiek szerint kapott védett származék 0,38 g-ját 25 ml metanolban feloldjuk és az oldatot 0 °C-on gömbölyű fenekű lombikban ammóniával telítjük. A lombikot lezárjuk és egy hétig szobahőmérsékleten tartjuk. Az oldatot vákuumban addig 30 bepároljuk, míg a kristályosodás meg nem indul. Az elegyet ezután egy éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. A szilárd nyersterméket izopropanolból átkristályosítva 0,2 g tiszta 9-(|3-daunozaminil)-adenint kapunk, amely 243 246 °C-on olvad. [a]o = —8 35 (c = 1,24, metanolban). Kitermelés: 92,5%. NMR-színkép : ( deutero-dimetilszulfoxidban): 1,10 5 (d, J 2 6,5 Hz, CH3-C/57H), 3,72 5 (dq, J = 6,5 Hz, J’~ 1 Hz, C/S’/H), 5,66 5 (dd, C/l’/H, 40 Jaa = 10,5 Hz, Jae~3Hz), 8,15 és 8,28 5 (két s, C/2/H és C/8/H). Elemanalízis a Ci 1H, ,,N,,02 képlet alapján: számított: C =49,99*,, H =6,10%, talált: C =49,65%, H =6,18%. 45 2. példa l-(p-Daunozaminií)-ciü'z;-! előállítása 50 0,5 g 3,4-bisz(triiT:oracetil>daunozaminil-klorid és 0,75 g 4-benzoil-2-bisz(trimetilszilil>citozin keverékét kerekfenekü uveglombikban egy óra hoszszat 150°C-on hevítjük, miközben a lombikban vízsugárszivattyúval vákuumot létesítünk. A megolvadt keveréket lehűtjük, 30 ml 80%-os vizes metanolt adunk hozzá, és a kapott szuszpenziót 30 percen át visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk. Az át nem alakult benzoil-citozint kiszűrjük, és a metanolos oldatot vákuumban bepároljuk. Fehér maradékot kapunk, amelyet metanolból átkristályosítunk. így 0,13 g l-[/3-(3’-trifluoracetil-daunozarninil)]-4-benzoil-citozint kapunk, amely 259— -262 °C-on olvad. Kitermelés: 21%. [a]D = -64° (c = 1, metanolban). NMR-színkép (deutero - dimetilszulfoxidban) 15 °C-on: 1.22 5 (d, J = 6,5 Hz, CH3-C/5’0, 5,85 5 (dd, Jaa = 8,5 Hz, Jae = 3,5 Hz, C/l’/H), 7,3-7,7 5 és 7,9—8,3 5 ',(m, C/5/H, C/6/H és aromás protonok). A fentiek szerint kapott védett származék 0,2 g-ját 60 ml, előzőleg 0 °C-on ammóniával telített metanolban feloldjuk. Az oldatot 1 hétig nyomásálló lombikban szobahőmérsékleten tartjuk. Ezután az oldószert lepároljuk és a maradékot szilikagéloszlopon, eluálószerként 80%-os vizes metanolt alkalmazva tisztítjuk. 0,105 g l-(|3-daunozaminil)-citozint kapunk, amely izopropanolból átkristályosítva 152-155 °C-on olvad. Kitermelés: 96%. [a]D = —88° (c = 1, metanolban). NMR-színkép (deute ro-dimetilszulfoxidb an) : 1,08 5 (d, J = 6,5 Hz, CH3-C/57), 1,3-1,8 5 (m, C/2/H), 5,56 5 (széles t, C/l’/H), 5,72 és 7,60 5 (két d, J = 7,5 Hz, C/5/H és C/6/H). Elemanalízis a C10Hi6N4O3 képlet alapján: számított: C =49,99%, H =6,71%, N =23,2%, talált: C =49,79%, H =6,78%, N = 23,1%. Szinergizmus az Adriamicin és a 9-(ß-daunozaminil)-adenin, illetve az l-(j3-daunozaminil)-citozin között Nőstény CD—1 egerekkel, amelyek a kísérlet 0. napján intraperitoneálisan 5 • 106 sejt „egér aszcitesz-szarkoma 180” fertőzést kaptak, kísérleteket végeztünk. Az egereket az első napon intraperitoneálisan Adriamicinnel /(8S-cisz)-10f(3-amino - - 2,3,6-tridezoxi-a-L-lixo-hexopiranozil)-oxi]-7,8,9,10- -tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-8- -(hidroxiacetil)-l-metoxi-5,12-naftacéndion/ egymagában, illetve Adriamicin és 9-(0-daunozaminil)-adenin (IMI 21 jelű vegyület) keverékével, illetve Adriamicin és 9-(/3-daunozaminil)-citozin (IMI-24 jelű vegyület) keverékével kezeltük. Mindegyik vegyületet közvetlenül a felhasználás előtt desztillált vízben oldottuk. A dózisokat és az eredményeket az I. táblázatban adjuk meg. I. Táblázat Vegyület Dózis*5* mg/kg MST(1) nap tc(2)% lts(3) (4)-0 13 0/18 Adriamicin 1 20 153 2/9 2 20 153 2/9 4 56 430 3/9 1/9 8 49 377 3/9 1/9 2
