176226. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 4-dezacetil- vagy 4-dezacetoxi-vinblasztin-3-karboxamid-származékok előállítására
9 176226 10 vizes oldatot metilénkloriddal háromszor kirázzuk. A reakció során 4-dezacetil-3’-hidroxi-vinblasztin-3- -karboxazid keletkezik, mely a metilénkloridos fázisban van, melyet szárítunk és 30 ml térfogatúra párolunk be. Az azid oldatát ezután szárító feltéttel ellátott lombikba helyezzük és keverjük. A reakcióelegyhez 75 ml metilamint adunk és szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Az illékony komponenseket ledesztilláljuk. A 4-dezacetil-vinkadiolin-3-N-metil-karboxamid fizikai jellemzői a következők: IR-spektrum csúcsok: 2,95 mp 5,75 5,97 NMR-spektrum: 53,82 dublett (amid-metil-hidrogének), megfelelően a feltételezett szerkezetnek, Molekulaspektrum, molekulaion M+ = 783, összhangban a C44HS7NS08 tapasztalati képlettel, 4. példa Sók előállítása Más sókat, beleértve szervetlen anionokat, mint kloridot, bromidot, foszfátot, nitrátot és hasonlókat, valamint szerves anionokat, mint acetátot, klór-acetátot, triklór-acetátot, benzoátot, alkil- vagy aril-szulfonátokat és hasonlókat tartalmazó sókat a találmány szerinti amid-bázisokból a 2. példában leírt, a szulfátsók előállítására használt eljárással állítjuk elő, az 1%-os vizes kénsavoldatot alkalmas hígítószerben felvett megfelelő savval helyettesítve. Az indol-dihidroindol komponensekben jelenlevő más észter és/vagy amidcsoportok miatt különös gonddal kell eljárni a sók előállításakor, hogy elkerüljük a hidrolízist, átésztereződést és egyéb reakci-1. 1 ókat, amelyek magas hőmérsékleten, erősen savas pH-nál stb. végbemennek. A vegyületek in vitro körülmények között Siminoff [Applied Microbiology 9,66-72 (1961)] által 5 leírt szövettenyésztő rendszerben vírusellenes hatásúak herpes vírussal szemben Ezen felül a vegyületek hatásosak átoltott egértumorokkal szemben in vivo. Különösen fontos a vegyületek hatásossága Ridgeway oszteogén szarko- 10 ma (ROS) és Gardner limfoszarkoma (GLS) ellen. A vegyületek daganatellenes hatásának kimutatása céljából a daganat átoltása után 7—10 napig, általában intraperitoneális úton a vegyületek adott dózisaival kezeljük az állatokat. 15 A következő 1. táblázat több olyan kísérlet eredményét mutatja, melyekben átoltott daganatot viselő egereket eredményesen kezeltünk egy találmány szerint előállított vegyülettel. A táblázat 1. oszlopában a vegyület nevét, a 2. oszlopban a 20 transzplantált tumort, a 3. oszlopban a dózisszintet vagy -tartományt és a kezelési napok számát, a 4. oszlopban a tumornövekedés %-os gátlását tüntettük fel. (ROS a Ridgeway oszteogén szarkoma, GLS a Gardner limfoszarkoma és CA755 egy ade- 25 nokarcinoma rövidítése.) A vegyületek — hasonlóan a leurokrisztinhez és a vinblasztinhoz - egerekre nézve a 100%-os tumorgátlást okozó dózisok felett válnak toxikussá. Ezen felül - eddig fel nem derített okokból - 30 valamennyi hatóanyag egy adott próbában - beleértve kontroll hatóanyagokat, mint vinblasztint - toxikusak lehetnek olyan dózisszinten, ahol szokás szerint tumorgátlást eredményeznek toxicitás nélkül. így az 1. táblázatban közölt eredmények 35 olyan jellemző kísérletek eredményei, ahol a kontroll hatóanyagok várt eredményeket adnak, és nem jelentik a kísérletek átlagát. Vegyület Daganat Dózis Gátlás % mg/kg/napok száma 4-Dezacetoxi-vinblasztin- ROS 0,5/10 44-3-N-(2-hidroxi-etil)GLS 0,75-1,5/6 51-100-karboxamid-szulfát A vegyületek más átoltott daganatok ellen is hatásosak. így például Mecca limfoszarkománál 0,25 mg/kg vinblasztin-C-3-N-metil-karboxamid-szulfát 9 napon át adott parenterális injekciója 54%-os növekedés-gátlást és a vinblasztin-C-3-amíd 28%-os gátlást okoz. Ugyanezen dózisszinten a vinblasztin maga teljesen hatástalan. Ezen felül CA755 adenokarcinománál a 4-dezacetil-vinblasztin-3-karboxamid-szulfát 67%-os tumomövés-gátlást, a 4-dezacetil-vinblasztin-3-N-metil-karboxamid-szulfát 61%-os gátlást és a vinblasztin-C-3-karboxamid-szulfát 49%-os gátlást okoz 7 napon át adott, 0,25 mg/kg dózis és 72%-os gátlást 0,3 mg/kg dózis esetén. Hasonló kísérletben a vinblasztin 31%-os gátlást okoz, míg a leurokrisztin valamivel alacsonyabb, 0,2 mg/kg dózisszinten 79%-os gátlást eredményez. Az új amidok és hidrazidok parenterális vagy 50 orális úton használhatók daganatgátló szerként. Orális adagoláshoz az I általános képletű bázisok — kivéve azokat, melyekben R jelentése hidrazino vagy azido csoport - gyógyászatiig elfogadható savaddíciós sóinak megfelelő mennyiségét keményí- 55 tővel vagy más kötőanyaggal elegyítjük és a keveréket összeilleszthető zselatinkapszulákba töltjük úgy, hogy mindegyik kapszula 7,5-50 mg hatóanyagot tartalmazzon. A daganatellenes hatású sók keményítővel, kötő- 60 anyaggal és síkosítóanyaggal is elkeverhetők és a keverék 7,5-50 mg hatóanyagot tartalmazó tablettákká sajtolható. A tabletták bemetszéssel láthatók el, ha kisebb vagy osztott dózisok szükségesek. Parenterális alkalmazás esetén előnyben részesítjük 65 az intravénás adagolást. Erre a célra izotóniás olda-5
