176215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás közel 2:1 arányú ciklodextrin-indometacin zárványkomplex előállítására
9 176215 10 Kezelés menete: A vizsgálati állatoknak peros adagoltuk a gyulladáscsökkentő anyagokat, majd subplantárisan a gyulladáskeltő Karragenint és orálisan 1 ml langyos csapvizet állatonként. A kezelés után 3 órával az állatokat extermináltuk és a leválasztott kezeletlen ill. Karrageninnel kezelt lábak súlyát mértük. Az elválasztás a metacarpus felett történt. Értékelés: Ugyanazon állatnál a kezeletlen és a kezelt láb súlyának különbségét számítottuk. 100%-os gyulladásnak vettük a kontrollcsoportnál kapott súlynövekedést és ehhez viszonyítottuk a kezelt csoport eredményeit. A /3-ciklodextrin-indometacin komplex és az indometacin különböző dózisaival kezelt állatok esetében százalékos gyulladáscsökkentő hatást számoltunk A kapott eredményeket a 3. ábrán tüntetjük fel. Vizsgálati eredményeink alapján akut gyulladásban összehasonlítva a /3-ciklodextrin-indometacin és az indometacin hatását, nem mutatható ki lényeges eltérés a két molekula gyulladáscsökkentő hatásában. A gyulladáscsökkentő hatás mindkét anyag esetében dózisarányos, a hatás a komplex javára tolódott el. E szerint a komplexből az indometacin felszívódás jobb hatásfokkal történik meg, mint akkor, ha az indometacint nem komplexben adagoljuk. A gyulladásgátló hatás beállási sebességének ill. hatástartalmának vizsgálata A vizsgálati anyag, referens anyag, állatok, kezelés, dózisok, vizsgálat menete és a kezelés menete mindenben azonos az előzőekben, a gyulladásgátló hatás vizsgálatánál leírtakkal. Az eltérések az alábbiak. Ezen vizsgálatsorozatban a következő vizsgálatokat végeztük el: 1. Gyulladásgátló beadása egyidejűleg Karrageninnel, a kiértékelés különböző időpontban történt (3, 6, 24 és 28 órával a kezelés után). 2. A gyulladásgátló beadása után 1, 2, és 3 órával történt a Karragenin beadása, majd ezután 3 órával történt a kiértékelés. A leolvasáskor az állatokat éterrel extermináltuk és a leválasztott kezeletlen ill. Karrageninnel kezelt lábak súlyát mértük. Elválasztás a metacorpus felett történt. Értékelés: Ugyanazon állatnál a kezeletlen láb és a kezelt láb súlyának különbségét kiszámítottuk. 100%-os gyulladásnak vettük a kontroll csoportnál kapott súlynövekedést, és ehhez viszonyítottuk a kezelt csoportok eredményeit. Százalékos gyulladáscsökkentő hatást számítottunk és az eredményeket ábrázoljuk (4. és 5. ábra). 1. A gyulladásgátló beadása egyidejűleg a Karrageninnel végzett vizsgálatkor az eredmények azt mutatták, hogy a Karragenin beadása után a gyulladáskeltő hatás 3, 6 órára még értékelhető, de 24 és 48 órára a Karragenin hatás annyira lecsökken, hogy az eredmények nem értékelhetők reálisan. Vizsgálati eredményeink alapján megállapíthatjuk, hogy a /3-ciklodextrin-indometacin komplex jobban csökkentette a gyulladást mint az indometacin és hatása még 6 órával a kezelés után is alig csökkent, míg az indometacin esetében a kezelés után 6 órával már gyulladásnövekedés lép fel a gyulladáscsökkenés helyett. (5. ábra). 2. A gyulladásgátló beadása után 1, 2 és 3 órára beadott Karragenin után 3 órával való leolvasásnál a /3-ciklodextrin-indometacin komplex gyulladáscsökkentő hatása jobb, mint az indometaciné és az egyenesek meredekségéből (4. ábra) látható, hogy a komplexbe zárt indometacin gyorsabban fejti ki gyulladáscsökkentő hatását, mint az indometacin. Összefogalva megállapítható, hogy 2 :1 mólarányú /3-ciklodextrin-indometacin komplex gyorsabban és huzamosabb ideig fejti ki gyulladáscsökkentő hatását, mint az indometacin. A /3-ciklodextrin-indometacin komplex szubakut toxicitási vizsgálata patkányon (Ulcus-teszt) A vizsgált anyag az 1. példa szerint előállított /3-ciklodextrin-indometacin komplex, a referens anyag az indometacin. Állatok: a szubakut toxicitási vizsgálatot CFV törzsből származó hím és nőstény állatokon végeztük, vizsgálati anyagonként és nemenként 10-10 állatot kezeltünk. A vizsgálat kezdetekor az állatok 7 hetesek voltak, átlagos testsúlyuk 150—170 g. Az állatok tartása állandó hőmérsékleten (22—24 °C) és állandó relatív páratartalom (45-50%) mellett történt. A kezelés időtartama alatt az állatok standard diétát és vizet fogyasztottak ad libitum. Kezelés: A szubakut toxicitási vizsgálat négy hetes kezelési időnek felel meg. Az állatok kezelése naponta azonos időpontban, reggel történt. A vizsgálati anyagot és a referens anyagot egyaránt 1%-os metilcellulózzal készített szuszpenzió formájában adagoltuk nyelőcső-szondán keresztül. A kontroll csoport állatai 1%-os metilcellulózt kaptak peros. A kezelés időtartama alatt regisztráltuk az állatok hetenkénti súlygyarapodását és klinikai állapotát. Dózisok: 1. Kontroll: 1%-os metilcellulóz szuszpenzió 0,2 ml/100 g per os. 2. 40,3 mg/kg /3-ciklodextrin-indometacin p. o szuszpenzió 3. 5,0 mg/kg indometacin p. o szuszpenzió Vizsgálat menete: Az állatok kezelését 28 napig végeztük, 1. Az 1%-os metilcellulózzal kezelt csoport hím állataiból 10%-nál erosiót észleltünk. 2. A 40,3 mg/kg komplexszel kezelt hím állatok 30%-a a hetedik napra, a nőstény állatok 30%-a a 25. napra elhullott. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
