176215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás közel 2:1 arányú ciklodextrin-indometacin zárványkomplex előállítására
7 176215 8 koplexé azonban 5,54. Ez közVfetve azt bizonyítja, hogy az 1 :1 mólarányú komplexben a karboxil-csoporttól viszonylag távolabb, tehát a p-klór-fenil-csoporton található csak a ciklodextrin gyűrű, a 2 :1 mólarányú komplexben azonban az indometacin molekulának mindkét része komplexbe van zárva, ezért a pKa érték növekszik, azaz a savi jelleg csökken. A találmányunk szerinti eljárással előállítható 2 :1 mólarányú ciklodextrin-indometacin komplex hatékonyságát, illetve az 1 :1 mólarányú komplex ulcus-kivédő hatásának hiányát az alábbi biológiai tesztekben igazoljuk. Az 1:1 mólarányú komplex előállítása az 1. példában leírtak szerint történt azzal az eltéréssel, hogy 1 mól ciklodextrint 1 mól indometacinnal reagáltattunk. A keletkezett termék szubakut toxicitási vizsgálata ugyanúgy történt, mint a 2:1 mólarányú komplexnél. A vizsgálatok eredményeit a következőkbén ismertetjük. A felszívódás vizsgálata 72 kiéheztetett patkányt három csoportra osztottunk. Az első csoportnak beadtunk per os 5 mg indometacint, a második csoportnak 5 mg indometacint tartalmazó ciklodextrin komplexet, a harmadik (kontroll) csoport csak vizet kapott. Meghatározott idő után 3—3 állatot dekapitáltunk és elvéreztettünk. A vérből a szérumot elválasztottuk, és ebből az alábbi irodalmi helyeken leírt módszerrel gázkromatográfiásán határoztuk meg az indometacin tartalmat: [W. G. Perry: J. Chromatogr., 89 110 (1974), Helleberg E.: J. Chromatogr., 117 167 (1976) ]. Az eredményeket a 2. ábrán tüntetjük fel, ahol is az indometacin, illetve 2 :1 mólarányú ciklodextrin-indometacin komplex (az indometacin mennyisége mindkét esetben 5 mg) által előidézett vérszintet (patkányon) ábrázoljuk a beadás után eltelt idő függvényében. Az ábra szerint a komplex formájában adagolt indometacin mindvégig magasabb vérszintet biztosít a vérben, mint a szabad indometacin. CD + IND = 1. példa szerint előállított komplex IND = Indometacin Indometacin és indometacin-ß-ciklodextrin komplex terhességvédő hatásának vizsgálata petefészek-irtott patkányon Vizsgált anyag: /3-ciklodextrin : indometacin 2 :1 mólarányú komplexe Referens anyag: indometacin A kísérleti állat: 18 CFY állományba tartozó átlag 308 g súlyú nősténypatkány Kezelés: Az állatok petefészkét a terhesség 17. napján eltávolítottuk, majd az állatokat egyedi ketrecekbe helyeztük. 6 állat a terhesség 18. napján 1,25 mg/testsúly kg dózisú indometacint kapott vízben szuszpendálva peros, 6 állat pedig ilyen indometacin tartalomnak megfelelő mennyiségű komplexet szintén vízben szuszpendálva per os. 6 állat kontroll maradt, A terhesség 19. és 20. napján reggel és este a kezelést megismételtük, fly módon az állatok összesen 6,25 mg/testsúly kg indometacint, illetve ilyen indometacin tartalomnak megfelelő mennyiségű komplexet kaptak. Eredmények: Az állatokat a terhesség 21. napjának reggelén boncoltuk. Az uterusban levő implantánciók számából és az uterusban maradt magzatok számából következtettünk a terhesség 17. és 21. napja között történt vetélések számára. A kontroll állatok összes magzataiknak átlag 16,1%-át tartották meg. A 6 állat közül kettőnél 100% volt a vetélés. Az indometacinnal kezelt állatok az összes magzatok 58,8%rát, a komplexszel kezelt állatok pedig 66,7%-át tartották meg. Az indometacinnal és a komplexszel történt kezelés a kontrolihoz képest egyaránt jelentősen megnövelte a magzat megtartási százalékot, egymáshoz viszonyítva azonban hatásukban jelentős eltérést nem találtunk. Farmakológiai vizsgálatok A gyulladásgátló hatás farmakológiai vizsgálata Vizsgálati anyag: /3-ciklodextrin-indometacin 2 :1 mólarányú komplexe Referens anyag: indometacin. Felhasznált állatok: A gyulladásgátló hatás vizsgálatát CFY törzsből származó nőstény patkányokon végeztük, anyagonként és dózisonként 10—10 állaton. A vizsgálat kezdetekor az állatok 4-5 hetesek voltak, átlagos testsúlyuk 90-110 g. A kísérletsorozatban egy kontrollcsoport is szerepelt, 10 állattal. Kezelés: A gyulladásgátló hatást akut kísérletben vizsgáltuk. A vizsgálati anyagot és a referens indometacint orálisan kapták az állatok, 1%-os metilcellulózzal készített szuszpenzió formájában, nyelőcső szondán keresztül. A gyulladáskeltő 0,5%-os karragenin oldatból subplantarisan 0,1 ml/állat dózist adagoltunk a kezelt és a kontroll állatoknak egyaránt. Dózisok: A /3-ciklodextrin-indometacin komplexet 8,06-16,12-24,18—32,24 40,3 mg/kg-os dózisban, az indometacint 1-2-3—4 és 5 mg/kg-os dózisban adagoltuk. A 0-ciklodextrin-indometacin komplex indometacin tartalma 12,4%. 1 mg indometacin 8,06 mg komplexszel ekvivalens, ezért a jobb összehasonlítás miatt adagoltuk a fent leírt dózisokat. A kontrollcsoport 1%-os metilcellulózt kapott peros. Vizsgálat menete: A gyulladásgátló hatás vizsgálatát 16 órán keresztül éheztetett patkányokon végeztük. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
