176045. lajstromszámú szabadalom • Próbacsík húgysav meghatározására
7 176045 8 mely lehetővé teszi, hogy a végpontot mégis le tudjuk olvasni. Az össz.ehasonlítót rendszerint a méréshez felhasznált hordozó mellé helyezzük. Amennyiben a vizsgálandó folyadék vér, a végpont leolvasását akadályozhatják a vérben jelenlevő vörös vérsejtek. Ezeket el lehet távolítani, és a vérszérumot vagy -plazmát lehet a méréshez felhasználni. Egy másik módszer a vörös vérsejtek távoltartására egy olyan félig-áteresztő réteg beépítése, mely nemcsak védi a készítményt, hanem szűrőként is működik. Ezen kívül használat előtt egy koaguláció gátló anyag, például heparin adható a vérhez, hogy megakadályozza a vörös vérsejtek kiszáradását és kiválását a próbacsíkon. Egy másik megoldás, hogy magát a külső féligáteresztő réteget vagy annak felületét impregnáljuk, illetve vonjuk be egy ilyen, koaguláció gátló anyaggal. A vizsgálandó folyadékot, például a vért a próbacsik valamennyi sávjával érintkezésben tartjuk egy rövid ideig, például 5 percig, majd a csíkot folyó vízzel lemossuk, és megvizsgáljuk. Normál esetben a végpont összehasonlító sávon semmiféle elszíneződésnek nem szabad mutatkoznia, az viszont előfordulhat, hogy a mérésre felhasznált sáv még megtartja elszíneződésének egy részét jelezve, hogy a vizsgált anyag, például a húgysav a végpont eléréséhez szükségesnél kisebb koncentrációban van jelen. Ha a szín teljesen eltűnik, azt jelenti, hogy a mért anyag a végpont eléréséhez elegendő vagy annál nagyobb koncentrációban van jelen, ami az orvos számára valamilyen betegség jelenlétére utalhat, és ebben az esetben újabb mintákon további mérésekre és vizsgálatokra van szükség. A további vizsgálatokat megkönnyíti egy olyan sorozat elkészítése, melynek egyes tagjai különböző mennyiségű indikátort tartalmaznak. Az eredmény egy olyan próbacsík-sorozat, melynek minden tagja más és más végpontnak felel meg, azaz a különböző tagokban az indikátor más és más koncentrációknál színtelenedik el. Az eddigiekben ismertetett diagnosztikai készítmények előnye, hogy egyszerű és olcsó iendszerek, ezen kívül könnyen előállíthatok. Használhatunk nem kívánt semmiféle költséges berendezést, tehát báimely gyakorló orvos számára lehetőség nyílhat felhasználásukra. Az eredmények leolvasását megkönnyíti az inverz kolorimetria elvének alkalmazása, ami szükségtelenné teszi a kalibrációs színskálával történő, fél-kvantitatív becslésen alapuló, vizuális összehasonlítást, melynél igen nagy lehet a pontatlanság. Egy másik előny, hogy a vizsgálat nagyon gyors, szemben az eddig ismertetett és alkalmazott módszerekkel, melyeknél a vizsgálati idő általában egy óránál is hosszabb. Találmányunk részleteit a következő példákban ismertetjük, anélkül, hogy eljárásunkat a példákra korlátoznánk. 1. példa 1. Húgysav kimutatására alkalmas próbacsík A j mérő reagensek elkészítése a) Jód-forrás A Ciba Agrochemical cég által Wescodyne védjegy alatt forgalmazott jodoform-készítmény jód tartalmát meghatározzuk 1 x 10-2 N Nátrium-tioszulfát-oldattal végzett titrálással. Ezután a készítményt vízzel úgy felhígítjuk, hogy 2,5 x 10-3 mólos jód oldatot kapjunk. Ilyen koncentrációjú jód, keményítővel és kálium-jodiddal képezett komplexe formájában 7 mg húgysav/100 ml oldat koncentrációjú húgysav oldattal egyenértékű, ha a reakció az oldatok azonos térfogatai között játszódik le. b) A jód oldhatóságát növelő anyag Desztillált vízzel elkészítjük a kálium-jodid 9%-os oldatát. c) Jód-indikátor 1 g oldható keményítőt elszuszpendálunk 90 ml desztillált vízben, a szuszpenziót 3 percig forraljuk, majd felhígítjuk 10 ml desztillált vízzel, amikor 1%-os keményítő készítményt kapunk. d) Diagnosztikai készítmény 100 ml 9%-os kálium-jodid oldathoz hozzáadunk ezzel egyenértékű, tehát szintén 100 ml hígított, Wecodyne védjegyű jodofor oldatot, és az elegyet a habzás megakadályozása céljából enyhén keverjük. Az oldathoz hozzáadunk 100 ml 1%-os keményítőoldatot, és az így kapott készítményt óvatosan keverjük, úgy, hogy habzás ne lépjen fel. e) membrán készítmény 25 ml Colloidan-t (necol colloidan oldat 301—261, melyet a British Drug Houses forgalmaz) felhígítunk 75 ml éterrel (gyógyszerkönyvi minőség) és az oldatot alaposan összekeverjük. A Colloidant ezután 667-szeresére'hígítjuk dietil-éter és etil-alkohol 9: 1 térfogat arányú elegyével. f) 2. membrán készítmény, mely pH beállítót is tartalmaz 800 mg mikronos méretűre aprított, vízmentes analitikai minőségi nátrium karbonáthoz hozzáadjuk dietil-éter (etil-alkohol 9: 1 térfogat arányú elegyének 5—10 ml-ét, a kapott szuszpenziót eldörzsöljük úgy, hogy minden nagyobb aggregátumot eloszlassunk, és 200 ml, az e) pontban leírt módon készített Colloidan oldat felhasználásával átjuttatjuk egy üvegdugós üvegbe. Ezután az üveget ultrahangos fürdőbe helyezzük és addig keverjük, míg minden aggregátum eldiszpergálódik. B) A próbacsíkok készítése Egy nem képlékeny PVC lemezből [128/5065, forgalomba hozza a Bacelite Xylonite Ltd] kivágunk egy 100x54 mm-es darabot, és egyik hosszanti oldala mentén egy 10 mm széles sávot durva csiszolóvászonnal éidessé tesszük. Egy üvegszál-szűrőből [GFC/C Whatman, forgalomba hozza a Scientific Supplies Co. Ltd.] kivágunk egy 140—150 mm hosszú, 5 mm széles csíkot. A rácsos-típusú szemcsézetű oldallal ellenkező oldalra felkenünk egy ragasztóanyag csíkot (Britfix cellulóz-nitrát, forgalomba hozza a Humbrol Ltd.) a teljes 5 mm szélességben, és ugyanígy bekenjük ragasztóanyaggal az érdessé tett 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4