175306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új polipeptidek előállítására
63 175306 64 kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [“Id = -11,9° (c = 1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C24H37O8N7 képlet alapján: számított: C = 52,26%, H =6,76%, N = 17,78%, talált: C =52,43%, H =6,64%, N = 17,76%. b) Z—e—Acap—Arg(NOj )—Gly-OH előállítása 5 10 képessége [a]£,6 = -12,9° (c = 1,1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a Cs7H670i 3N11 • •0,5H2O képlet alapján: számított: C = 59,50%, H =6,32%, N = 15,58%, talált: C =59,63%, H =6,43%, N = 15,03%. d) H—e—Acap-Arg—Gly—Phe-Phe—Tyr—NH2 előállítása 10 ml acetonban feloldunk az a) lépésben kapott vegyületből l,8g-ot, majd a kapott oldathoz 15 jeges hűtés közben 2,9 ml 2 normál vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk. A keveréket ezután szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük, majd 2,5 ml 1 normál sósavoldatot adunk hozzá, ezután pedig az acetont csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A 20 maradékhoz 10 ml vizet adunk, majd az oldhatatlan részt kiszűrjük. A szűrletet 1 normál sósavoldattal megsavanyítjuk, amikor is kristályok válnak ki, amelyeket kiszűrünk. így 1,59 g (93%) mennyiségben a 97,5-99 °C olvadáspontű cím sze- 25 rinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]?)4 =-10,7° (c = 1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C22H33O8N7-HíO kép- 30 let alapján: számított: C =48,79%, H =6,52%, N = 18,10%, talált: C =48,50%, H =6,28%, N = 18,23%. c) Z-e—Acap-Arg(N02 )—Gly—Phe-Phe— —Tyr—NH2 előállitása 1,22 g Z-Phe—Phe-Tyr—NH2-höz kis mennyiségű anizolt, majd 10 ml 25%-os ecetsavas hidrogén-bromid-oldatot adunk. A kapott keveréket szobahőmérsékleten 40 percen át rázzuk, majd dietilétert adunk hozzá. A képződött csapadékot kiszűr- 45 jük, majd szemcsés nátrium-hidroxíd felett szárítjuk. Ugyanekkor 10 ml dimetil-formamidban feloldunk 1,05 g Z-e—Acap-Arg(N02 )-Gly-OH-t és 0,36 g HONB-t, majd a kapott oldathoz vízzel 50 végzett hűtés közben 0,42 g DCC-t adunk. A keveréket ezután 6 órán át keverjük, majd a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. Az elűző bekezdésben kapott aminkomponenst 10 ml dimetil-formamidban feloldjuk, majd a kapott oldatot 55 trietil-aminnal semlegesítjük. Ehhez az oldathoz ezután hozzáadjuk a reakcióképes észter dinretil-formamidos oldatát, majd a reakcióelegyet egy éjszakán át keveijük. Ezt követően az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a maradék- 60 hoz vizet adunk. A kivált port kiszűrjük, etil-acetáttal mossuk, végül pedig dimetil-formamid és etil-acetát elegyéből átcsapjuk. Így 1,01 g (57%) mennyiségben a 149—151 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgató- 65 40 ml ecetsavban feloldunk a c) lépésben kapott vegyületből 700 mg-ot, majd a kapott oldaton katalizátorként palládiumkormot használva 14 órán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. A katalizátort ezután kiszűrjük, majd a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk és a maradékot felvisszük egy 1,8 cm-szer 12 cm méretű, Karboximetil-Sephadex gyantából készült oszlopra. Az oszlopot ezután 700 ml 0,1 normál és 700 ml 1 normál vizes ammónium-acetát-oldattal lineáris gradiens-eluálásnak vetjük alá. A 430 ml és 550 ml közötti frakciókat összeöntjük, majd liofilizáljuk. Így 430 mg (62%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [ß]p6 = -13,2° (c = 0,5, vízben). Elemzési eredmények a C4 1 Hs <,C>7 Ni 0'2C2 H4O2 '3H2 0 képlet alapján: számított: C = 55,43%, H =7,24%, N = 14,37%, talált: C = 55,48%, H = 7,39%, 35 N = 14,47%. Aminosav-elemzés : Arg: 1,00 (1), Gly: 1,00 (1), Tyr: 1,00 (1), Phe: 2,07 (2), 40 peptidtartalom 84%. 40. példa H-Lys-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-NH2 előállítása a) Di—Z—Lys—Arg(N02 )-Gly-OEt előállítása Pontosan a 39. példa a) lépésében ismertetett módon járunk el 2,07 g di-Z—Lys—OH-t használva, amikor is gél formájában a cím szerinti vegyületet kapjuk. Víz, etanol és etil-acetát elegyéből végzett átcsapás ^után 2,57 g (73%) mennyiségben a 161-162 °C olvadáspontú terméket kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]^4 =-l | ,9° (c = 1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C32H44O10N8 képlet alapján: számított: C =54,85%. H =6,33%, N = 15,99%, talált: C = 54,45%, H = 6,05%-, N = 15,99%. 32
