175306. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új polipeptidek előállítására
31 175306 32 frakciókat összeöntjük, majd liofilizáljuk. így 670 mg mennyiségben a fehér pelyhes terméket kapjuk. Aminosav-élemzés : Lys: 1,02, Arg: 0,98, Thr: 0,96, Pro: 2,04, Alá: 1,00, Tyr: 0,87, Phe: 2,02, (3—Alá:" 1,05 (peptidtartalom 74%). 16. példa H—0—Ala—Arg—Gly—Phe—Phe—Tyr-Leu—OH előállítása a) Z-Phe-Phe-Tyr-OEt előállítása 30 ml etanolban feloldunk 3,43 g Z—Phe—Tyr-OEt-t, majd a kapott oldaton katalizátorként palládiumkormot használva 2 órán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. A katalizátort ezután kiszűrjük, majd a szürletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot feloldjuk 15 ml dimetil-formamidban, majd az oldathoz 2,77 g Z-Phe-OSu-t adunk. A keveréket ezután 10 órán át keverjük, majd 80 ml vizet adunk hozzá és a kicsapódott kristályokat kiszűrjük, majd pedig etanol, etil-acetát és dietiléter elegyéből átkristályosítjuk. így 3,72 g mennyiségben (83,4%) 185—186,°C olvadáspontú tűkristályok alakjában a cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [a]p4 =-18,1° (c = 1,09, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a alapján: C37H39O7N3 képlet számított: C = 69,68%, H =6,16%, N = 6,59%, talált: C =69,64%, H =6,14%, N = 6,54%. b) Z-ß-Ala-Arg(N02 )-Gly-Phe-Phe-Tyr-OEt előállítása 50 ml etanolban az a) lépésben kapott vegyületből 2,0 g-ot szuszpendálunk, majd a szuszpenzión katalizátorként palládiumkormot használva 1,5 órán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. Ezután a katalizátort kiszűrjük, majd a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 20 ml dimetil-forrnamidban feloldjuk, majd az oldathoz jeges hűtés közben 1,56 g Z-ß-Ala-Arg(N02)-Gly-OH-t, 0,7 g HONB-t és 0,8 g DCC-t adunk. A reakcióclegyet ezután 12 órán át keverjük. Ezt kc' ctően a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, majd a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A maradékhoz 60 ml vizet adunk, majd a képződött port kiszűrjük, szárítjuk, végül pedig dimetil-formamid és etil-acetát elegyéből átcsapjuk. így 2,58 g (82%) mennyiségben a 83—85 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [o]pS = —10,0° (c = 1,1, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a CggHsgOuNio *2H20 képlet alapján: számított: C =57,43%, H =6,23%, N = 13,97%, talált: C =57,41%, H=6,05%, N = 14,49%. c) Z—ß — Ala—Arg(N02 )-Gly-Phe-Phe-Tyr-OH előállítása 30 ml acetonban a b) lépésben kapott vegyületből 2,0 g-ot szuszpendálunk, majd a szuszpenzióhoz jeges hűtés közben 6,3 ml 1 normál vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk. Ezután szobahőmérsékleten a keveréket 1 órán át keverjük, majd 3 ml 1 normál sósavoldatot adunk hozzá. Ezután az acetont csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a maradékból a kis mennyiségű oldhatatlan részt kiszűrjük és a szűrlethez 3,8 ml 1 normál sósavoldatot adunk. A képződött csapadékot kiszűrjük, hideg vízzel alaposan átmossuk és szárítjuk. így 1,96 g (98%) mennyiségben a 70—73 °C olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [aj^6 = —8,7° (c = 0,97, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C46H5 4O12 Ni 0 ’H2 O képlet alapján: számított: C =31,11%, H =5,90%, N = 14,64%, talált: C =58,13%, H =5,89%, N = 14,51%. d) Z-ß-Ala-Arg(N02 )-Gly-Phe-Phe-Tyr-Leu—OBzl előállítása 5 ml dimetil-formamidban feloldunk 275 mg H—Leu—OBzl-p-toluol-szulfonátot, majd a kapott oldatot 0,9 ml 10%-os dimetil-formamidos N-etil-morfolin-oldattal semlegesítjük. Az oldathoz ezután —10°C-on a c) lépésben kapott vegyületből 670 mg-ot, valamint 251 mg HONB-t és 289 mg DCC-t adunk. A reakcióelegyet ezután 12 órán át keverjük, majd a kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük. Ezt követően a dimetil-formamidot csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, majd a maradékhoz 30 ml vizet adunk. A képződött csapadékot kiszűrjük, forró metanollal mossuk és szárítjuk. így 703 mg (87,9%) mennyiségben a 178—181° olvadáspontú cím szerinti vegyületet kapjuk, amelynek fajlagos forgatóképessége [cr]^3 = -15,0° (c=l,02, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a CS9H720i3Nn képlet alapján: számított: C =61,98%, H =6,35%, N = 13,49%, talált: C =61,88%, H =6,78%, N = 13,15%. e) H-ß-Ala-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Leu-OH előállítása 30 ml ecetsavban feloldunk a d) lépésben kapott vegyületből 500 mg-ot, majd a kapott oldaton katalizátorként palládiumkormot használva 8 órán át hidrogéngázt vezetünk keresztül. Ezután a katalizá5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 16
