175202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidkötéses gyűrűt tartalmazó peptidek előállítására
175202 és a szuszpenziót 10 percig keverjük. Ezután a sznazpenzlóhoz 6,6 ml metilénkloridős diciklohexil-karbodiimid-oldatot ./= 0,0066 mól diciklohexil-karbodiimid/ adunk, és a szuszpenziót 6 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük, és 2-2 percig 2-szei 20 ml dimetilförmamiddal, 2-szer 20 ml metilénkloriddal, 2-szer 20 iái metanollal és 2-szer 20 ml metilénkloriddal mossuk. A mosófolyadék ninhidrinnel nem ad reakciót. A vódőcsoport lehasitása: A BOG-védőcsoportot a 32. ciklusnál leirt módon hasítjuk le. 24. ciklus: Kapcsolás: A 25* ciklusban kapott gyantát 2-szer 20 ml dimetilförmamiddal mossuk, majd a gyantához 2,42 g /0,C066 mól/ BOC-L-glutamin p-nitrofenilészter 25 ml dimetilförmamiddal készített oldatát aüjukj és a szuszpenziót 24 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük, es 2-2 percig 2-szer 20 ml dimetiliorma-middal, 2-szer 20 ml metilénkloriddal, 2-szor 2C ml metanollal és 2-szer 20 ml metilén-kloriddal mossuk, Minden egyes mosási művelet után szűréssel eltávol' t jiú: a mosófolyadékot. A mosófolyadék ninhidrinnel nem ad reakciót. A védőccoport lehasitása: A BGC-vadócsoportot a 32. ciklusnál leirt módon hasitjuk le. 23. ciklus: Kapcsolás: A 24. ciklusban kapott gyantához 20 ml meiilénkloridot és 1,42 g /0,0066 mól/ BOC-L-prolint adunk, és a szuszpenziót IC percig keverjük. A szuszpenzióhoz 6,6 ml uetilénkloridos diciklohexil-ksrbodiimid-oldatot /= C,OC66 mól di-ciklohexil-karbodiimid/ adunk, és a szuszpenziót további 16 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük és 2-2 percig 2-szer 20 ml metilén-kloriddal, 2-szer 20 ml metanollal? majd 2-szer 20 ml metilénkloriddal mossuk. Minden egyes mosási művelet után szűréssel eltávolítjuk a mosófolyadékot. A mosófolyadék uinhidrinnel nem ad reakciót. A védőcsoport lehasitása: A BOC-véaőcsoportot a 32. ciklusnál leirt módon hasitjuk le. 22. ciklus: A 23« ciklusnál leirt műveleteket ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a kapcsolási lépésben reagensként 1,75 g /P,G066 mól/ BOC-B-fenilalanint használunk fel. 21-18. ciklus: A 31» ciklusnál leirt műveleteket ismételjük meg, azzal a különbség,,elf hogy a kapcsolási lépésekben a következő reagenseket használjuk fel: 21. ciklus: 1,36 g /0,0044 mól/ BOC-O-benzil-L-treonin, 20. ciklus: 1,71 6 /0,0044 mól/ BOC-N/im/-karbobenziloxi-L- hisztidin, 19. ciklus: 1,17 g /0,0044 mól/ BOC-L-j-onílalanin, l->. ciklus: 1,67 g /0,0044 mól/ B0C-&- karbobenziloxi-L-lizin 17. ciklus: A 24. ciklusnál leirt műveleteket ismételjük meg, azzal a különbséggel, hogy a kapcsolási lépésben reagensként 2,33 g /0,0066 mól/ BOC-L-^aszpaxagin p-nitrofenilésztert használunk fel. 18
