175202. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diszulfidkötéses gyűrűt tartalmazó peptidek előállítására
175202 adunkj és a szuszpenziót 6 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük, es egymás után 2-2 percig 2-szer 20 ml metilénkloriddal, 2—szer 20 ml metanollal és 2-szer 20 ml metilénkloriddal mossuk. Acetilezes: A fenti lépésben kapott gyantát, 1,5 ml tri-etilamin, 1 ml ecetsavanhidrid és 20 ml kloroform elegyedsz adjukj ás a szuszpenziót 2 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük, es egymás után 2-2 percig 2-szer 20 ml kloroformmal, 2- szer 20 ml metil-alkohollal és 3-szor 20 ml metilénkloriddal mossuk. A mosófolyadék ninhidrinnel nem ad reakciót fAtuxl, Bicchem. j54, 595 /1970/J. A BOG-védöcsoport ienasitása: A fenti lépésben kapott gyantát 12,5 ml trifluorecetsav és 12,5 ml mo^ilénklorid elegyéhez adjuk, és a szuszpenziót 5 percig keverjük, fzután a gyantát kiszűrjük, majd ismét 12,5 ml trifluorecetsav és 12,5 ml motilénklorid elegyéhez adjuk, és a szuszpenziót 30 percig keverjük. A gyantát kiszűrjük, ás egymás után a kővetkező oldószerekkel mossuk: 2-szer 20 ml motilénklorid /kezelési idő: 2-2 perc/, 2-szer 20 ml metanol /kezelési idő: 2-2 perc/, 2-szer 20 ml kloroform /kezelési idő: 2-2 perc/? 2-szer 20 ml 1:9 arányu trietilamin:kloroform elegy /kezelés 1 idő: 2-szer 10 perc/, 2-szer 20 ml kloroform /kezelési idő: 2-2 perc/ és 2-szer 20 ml metilénkloriá /kezelési idő: 2-2 perc/. A kapott, L-prolil-csoportokát hordozó gyanta prolin—tartalmát, illetve amin-tartalmát titrálással határozzuk meg. A gyanta 0,494 miiliekvivalens/g prolint, illetve amint tartalmaz. 31. ciklus: Kapcsolás: A 32. ciklusban kapott gyantát 20 mi metilénklor id és 0,83 g /0,0044 mól/ BCC-alanin elegyéhez adjuk, és a szuszpenziót 10 percig keverjük, hzután a szuszpenzióhoz 4,4 ml metilénklor idős diciklohexil—karbodiimid-oIdátot /diciklohexil-karbodiimid-koncentráció: 1 milliekvivalens/ml/ adunk, ás a szuszpenziót 2 órán át keverjük. A gyantát kiszűrjük, majd 2-2 percig egymás után a kővetkező oldószerekkel mossuk: 2-szer 20 ml metilénklorid, 2-szer 20 ml metanol ás 3-szor 20 ml metilénklorid. Linden egyes mosási művelet után szűréssel eltávolítjuk a mosófolyadékot. A mosófolyadék ninhidrinnel nem ad reakciót. A védőcsoport lehasitása: A BCC-védőcsoportot a 32. ciklusnál ismertetett módon hasítjuk le. 30-26. ciklus: A 31* ciklusnál leirt eljárást követ jük? azzal a különbséggel, hogy az egyes ciklusok kapcsolási lépeseiben a következő reagenseket használjuk fel: 30. ciklus: 0,77 g /0,C044 mól/ BOC-glicin, 29* ciklus: 0,95 g /0,C044 mól/ BOC-L-valin 28. ciklus: 0,77 g /0,0044 mól/ BOC-glicin, 27* ciklus: 1,02 g /0,0044 mól/ BOC-L-izoleucin, 26. ciklus: 0,83 g /0,0044 mól/ BOC-alanin. 25. ciklus : Kapcsolás: A 26. ciklusban kapott gyantát 2-szer 20 ml dimetilformamiddal mossuk, majd a gyantán 2,04 g /C,0066 mól/ BOC-O-benzil-L—treonin és 20 ml dimetilformamid elegyéhez adjuk, 17
