175152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új amino-oxi-savakat tartalmazó, gasztrin-hatású peptidek előállítására
25 175152 26-oldattal és vízzel mossuk, szárítjuk, és vákuumban bepároljuk. A maradék olajat 3,70 g (20 mmól) pentafluor-fenollal együtt 25 ml eiil-acetátban oldjuk. Az oldatot 0 °C-on 3,92 g (19 mmól) DCC-vel reagáltatunk 1 órán keresztül. Ezután a szuszpenziót leszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradék olajat 50 ml n-hexánban oldva 20—20 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal ötször, majd 20-20 ml vízzel kétszer mossuk. Az oldatot vákuumban bepároljuk, a maradék olajszerű anyag hidegen kikristályosodik. így 6,21 g (81%) BOC-Nva-OPFP-t kapunk, olvadáspont: 60-62 °C, = 0,70, [a]D = —32,3° (c = 1,0, dioxánban). Elemzési eredmények a C16H1804NFS összegképlet (molekulasúly: 383,32) alapján: számított: C =50,14%, H =4,73%, F =24,78%, talált: C =50,06%, H =4,64%, F =24,63%. 2. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-norvalil-L-aszparagil-j3-(terc-butil-észter)-L-fenil-alanin-amid 1,68 g (5,0 mmól) H-Asp(OtBu)-Phe-NH2-ot (1. példa, 4. lépés) és 2,12 g (5,5 mmól) BOC—Nva—OPFP-t 0,70 ml (5 mmól) trietil-amin jelenlétében 10 ml DMF-ban oldva reagáltatunk egymással. A reakcióelegyet 4 óra múlva vákuumban bepároljuk, a maradék olajszerű anyagot éterrel megszilárdítjuk, így 2,30 g (86,2%) BOC—Nva—Asp(0*Bu)—Phe-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 169-170 °C, r£ = 0,65, [a]D = -41,6° (c = 1,0, metanolban). Elemzési eredmények a C27H4207N4 összegképlet (molekulasúly: 534,64) alapján: számított: C = 60,65%, H = 7,92%, N = 10,48%, talált: C =60,60%, H = 7,77%, N = 10,33%. 3. lépés L-N or valil -L-aszparagil -L-fenil -al anin -a mi d -hidroklorid 1,90 g (3,55 mmól) BOC-Nva-Asp(OtBu)-Phe-NH2-ot 10 ml 4n sósavas ecetsavval kezelünk 1 órán keresztül. Az oldat bepárlása után a szilárd maradékot éterrel szűrjük. így 1,45 g (98,3%) H—Nva—Asp—Phe—NH2 • HCl-ot kapunk, bomláspont: 2044C, [a]D = -15,0° (c=l,0, dimetilformamidban), Rf =0,15. 4. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-triptofrl-L--norvalil-L-aszparagil-L-fenil-alanin-amid 1,24 g (3,0 mmól) H—Nva—Asp—Phe—NH2 • HCl-ot és 1,20 g (3,0 mmól) BOC-Trp-OSu-t 0,84 ml (6,0 mmól) trietilamin jelenlétében 15 ml DMF-ban reagáltatunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot vízzel megszilárdítjuk. A szuszpenziót leszűrjük, vízzel bőven mossuk. Az így kapott 2,0 g nyersterméket 30 ml 80%-os etanolból átkristályosítjuk. Így 1,47 g (73,9%) BOC—Trp—Nva—Asp—Phe—NH2-ot kapunk, olvadáspont: 207-208 °C, Rfs =0,35, [a]D =-43,4° (c = 1,0, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C34H4408Né összegképlet (molekulasúly: 664,77) alapján: számítóit: C =61,43%, H =6,67%, N = 12,64%, talált: C =61,37%, H =6,80%, N = 12,57%. 5. lépés L-Triptofil-L-norvalil-L-aszparagjl-L-fenil--alanin-amid-hidroklorid 1,80 g (2,72 mmól) BOC—Trp-Nva—Asp—Phe—NH2-ot 0,98 ml (14 mmól) merkapto-etanol jelenlétében 20 ml 4 n sósavas dioxánnal kezelünk. 15 perc múlva az oldatot vákuumban bepároljuk, a szilárd maradékot éterrel szűrjük. így 1,67 g (98,0%) H—Trp—Nva—Asp—Phe—NH2 • HCl-ot kapunk, olvadáspont: 200-202 °C, R/=0,25, [a]D = —30,0° (c = 1,0, dimetil-formamidban). 6. lépés 2-D-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)--propionil-L-triptofil-L-norvalil-L-aszparagil-L-fenil-alanin-amid 1,55 g (2,52 mmól) H—Trp—Nva—Asp—Phe-NH2 • HCl-ot és 1,14 g (2,52 mmól) BOC-D—OAla—OPCP-t (5. példa, 4. lépés) 20 ml DMF-ban reagáltatunk egymással 1,06 ml (7,56 mmól) trietil-amin jelenlétében. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot vízzel szűrjük. A csapadékot vízzel és éterrel mossuk. A 2,36 g súlyú nyersterméket a 10. futtatóeleggyel szilikagél oszlopon kromatografáljuk. Így 0,82 g (43,4%) BOC—D—OAla-T rp—Nva—Asp—Phe—NH2 -ot ka-punk, olvadáspont: 220-221 °C (bomlik), R^° = 0,20, Rf = 0,30, [of]D = +3,7° (c = 1,0, dimetil-formamidban). Elemzési eredmények a C37H49Oi0N7 összegképlet (molekulasúly: 751,85) alapján: számított: C =59,11%, H =6,57%, N = 13,04%, talált: C = 59,57%, H =6,70%, N = 13,21%. 12. példa 1. lépés 2-L-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino)-dekánsav-pentafluor-fenil-észter 4,25 g (14,7 mmól) BOC-Ade—OH-ot és 2,94 g (16,0 mmól) pentafluor-fenolt 40 ml etil-acetátban 5 ’0 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 55 13
