175152. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új amino-oxi-savakat tartalmazó, gasztrin-hatású peptidek előállítására
21 175152 22 Elemzési eredmények a C14Hi4OsNF5 összegképlet (molekulasúly: 371,27) alapján: számított: C =45,29%, H =3,80%, N = 3,77%, talált: C =45,43%, H =3,65%, N = 3,90%. 13. lépés 2-[3-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-metionil-L--aszparagil-L-fenil-alanil-amino-oxi]-ecetsav 0,32 g (0,48 mmól) H-Trp-Met-Asp-Phe-OGly-OH-t (9. lépés) és 0,23 g (0,60 mmól) BOC-0-OAla—OPFP-t (12. lépés) 10 ml DMF-ban oldunk, és az oldathoz hozzáadunk 0,14 ml (1,0 mmól) trietil-amint. 3,5 óra elteltével a reak.cióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterrel megszilárdítjuk. A 0,31 g nyersterméket kevés 6. futtatóelegyben oldva 20 g szilikagélből készített oszlopra visszük, és 6. futtatóeleggyel 5 ml/óra sebességgel eluáljuk. A tiszta frakciókat vákuumban bepároljuk, és a maradékot vízmentes éterrel izoláljuk. így 0,14 g (34%) amorf, kromatográfiásan egységes BOC-ß-OAla-Tro Met-Asp-Phe—OGly—OH-t kapunk, Rf =0,1, Rf =0,3. Elemzési eredmények a C39H5i013N7S összegképlet (molekulasúly: 857,94) alapján: számított: C =54,60%, H =5,99%, N =11,43%, talált: C =54,40%, H =6,10%, N = 11,27%. 7. példa 2-[2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-acetil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenil-alanil-amino-oxi]-ecetsav 0,34 g H—Trp—Met—Asp—Phe—OGly—OH-t (6. példa, 9. lépés) 10 ml DMF-ban oldunk, hozzáadunk az oldathoz 0,14 ml (1 mmól) trietil-amint és 0,28 g (0,6 mmól) BOC-OGly-OPCP-t (1. példa, 9. lépés). A reakcióelegyet 3 óra múlva vákuumban bepároljuk, a maradékot éterrel megszilárdítjuk. A 0,43 g nyersterméket 20 g szilikagélen kevés 6. futtatóelegyben oldva a 6. futtatóeleggyel 10 ml/óra sebességgel eluáljuk. A tiszta frakciókat összegyűjtjük, és vákuumban bepároljuk. így 0,15 g (31%) amorf BOC-OGly-Trp-Met-Asp-Phe-OGly-OH-t kapunk, Rf = 0,4. Elemzési eredmények a C3gH490i3N7S összegképlet (molekulasúly: 843,92) alapján: számított: C = 54,08%, H = 5,85%, N =11,61%, talált: C =53,95%, H =5,97%, N =11,70%. 2-[2-D-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-metionil-L--aszparagil-L-fenil-alanil-amino-oxi]-ecetsav 0,23 g (0,60 mmól) BOC-D-OAla-OPCP-t (5. példa, 4. lépés) és 0,34 g (0,50 mmól) H-Trp—Met—Asp—Phe—OGly—OH-t 10 ml DMF-ban feloldunk, és 0,14 ml (1,0 mmól) trietil-amint adunk az oldathoz. 3 óra múlva a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterrel megszilárdítjuk, és szűréssel izoláljuk. A 0,41 g nyersterméket 40 g szilikagélen kevés 7. futtatóelegyben oldva tisztítjuk. A 7. futtatóeleggyel 10 ml/óra sebességgel eluálunk. A tiszta frakciókat vákuumban bepároljuk, és a maradékot vízmentes éterrel izoláljuk, így 0,11 g (25,6%) amorf BOC-D-OAla Trp—Met-Asp—Phe-OGly—OH-t kapunk, Rf =0,25. Elemzési eredmények a C39H5iO! 3N7S összegképlet (molekulasúly: 857,94) alapján. számított: C =54,60%, H =5,9ü <, N =11,43%, talált: C =54,41%, H =5,87'.% N =11,32%. 8. példa 9. példa 2-[2-L-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-metionil-L-aszparagil-L-fenil-alanii-amino-oxi j -ecetsav A 8. példában leírt módon, BOC- L—OAla—OPCP (3. példa, 1. lépés) felhasználásával, 0,38 g nyerstermék szilikagéles tisztításával 0,13 g kromatográfiásan egységes BOC-L-OAla-Trp—Met-Asp-Phe-OGly-OH-t kapunk, Rf =0,25. Elemzési eredmények a C39H5iOi3N7S összegképlet (molekulasúly: 857,94) alapján: számított: C =54,60%, H =5,99%, N = 11,43%, talált: C =54,47%, H =6,04%, N =11,41%. 10. példa 1. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-norleucin-pentafluor-fenil-észter 10,0 g (24,3 mmól) BOC—Nie—OH • DCHA-sót 75 ml éter és 25 ml 2 n kénsav elegyében oldódásig rázunk, a fázisok elválasztását követően az éteres oldatot 25 ml 2 n kénsavval, majd vízzel újból kirázzuk. Az éteres oldatot vákuumban bepároljuk. Az 5,44 g olajszerű anyagot 4,42 g (24 mmól) pentafluor-fenollal együtt feloldjuk 30 ml etil-acetátban, az oldatot 0°C-ra hűtjük, és hozzáadunk 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
