175151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenilglicint tartalmazó, gasztrin hatású peptidek előállítására
19 175151 D-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)-propionil-L-triptofil-L-leucil-L--aszparagil-L-fenil-glicin-amid 0,57 g (1,0 mmól) H-Trp-Leu-Asp-L-Phg-NH2-ot (6. példa, 5. lépés) és 0,50 g (1,1 mmól) BOC—D—OAla—OPCP-t (3. példa, 1. lépés) 0,14 ml (1,0 mmól) trietilamin jelenlétében reagáltatunk 15 ml DMF-ban. A reakcióelegyet másnap vákuumban bepároljuk, és az éterrel izolált 0,77 g nyersterméket 3 ml 10. futtatóelegyben oldva 30 g szilikagélből készített oszlopra visszük. A 10. futtatóeleggyel 5 ml/ó sebességgel végezzük az elúciót. A tiszta frakciókból 0,46 g terméket izolálunk, amelyet 10 ml metanolban oldunk, majd az oldatot 70 ml éterrel felhígítjuk. így 0,26 g (34,2%) BOC-D-OAla-Trp-Leu-Asp-L-Phg-NH2 -ot kapunk, olvadáspont: 184—185 °C (bomlik), R|=0,4, [a]D = +18,8° (c = 1,0, dimetilformamidban). Elemzési eredmények a C37H49OioN7 összegképlet (molekulasúly: 751,85) alapján: számított: C =59,11%, H =6,57%, N =13,04%, talált: C =58,92%, H =6,40%, N = 12,88%. 8. példa 9. példa 1. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-norleucin-pentafluor-fenil-észter 10,0 g (24,3 mmól) BOC-Nle-OH • DCHA sót 75 ml éter és 25 ml 2 n kénsav elegyében oldódásig rázunk, a fázisok elválasztását követően az éteres oldatot 25 ml 2 n kénsavval, majd vízzel újból kirázzuk. Az éteres oldatot vákuumban bepároljuk. Az 5,44 g olajszerű anyagot 4,42 g (24 mmól) pentafluor-fenollal együtt feloldjuk 30 ml etilacetátban, az oldatot 0 °C-ra hűtjük, és hozzáadunk 4,63 g (22,5 mmól) diciklohexil-karbodiimidet. A szuszpenziót 1 órán keresztül hidegen állni hagyjuk, majd leszűrjük. A szűrletet vákuumban bepároljuk, 50 ml n-hexánban feloldjuk és ötször 20 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és kétszer 20 ml vízzel kirázzuk. A szerves oldószert szárítás után vákuumban lepároljuk, a maradék olajszerű anyag hidegen megszilárdul. így 8,12 g (91%) BOC-Nle— OPFP-t kapunk, olvadáspont: 55—57 °C, [á]D = -26,8° (c = 1,0, dioxánban), =0,80, R* = 0,85. Elemzési eredmények a Ci7H20O4NF5 összegképlet (molekulasúly: 397,35) alapján: szánútott: C =51,39%, H =5,07%, F =23,91%, talált: C =51,51%, H =4,68%, F =24,66%. L-Aszparagil-(terc-butil-észter )-D-fenil-glicin-amid 10,6 g (23,2 mmól) Z—Asp(0*Bu)—D—Phg—NHj-ot (1. példa, 3. lépés) 350 ml metanolban szuszpendálva 1,1 g 10%-os csontszenes Pd-katalizátor jelenlétében keverés közben hidrogén-gáz átbuborékoltatásával redukálunk atmoszférikus nyomáson. 3 óra elteltével a szuszpenziót szűrjük, a katalizátorról DMF-dal leoldjuk a rávált terméket, majd a szűrletet vákuumban bepároljuk. A szilárd maradékot 100 ml metanolból kristályosítjuk. így 5,5 g (74,0%) H—Asp(0*Bu)—D—Phg—NH2 -ot kapunk, olvadáspontja: 170—171 °C, Rj =0,15. Elemzési eredmények a C16E(23 04N3 összegképlet (molekulasúly: 321,28) alapján: számított: C = 59,79%, H =7,21%, N = 13,08%, talált: C =59,80%, H =7,10%, N = 13,18%. 2. lépés 3. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-norvalil-L-aszparagil-j3-(terc-butil-észter)-D-fenil-glicin-amid 1,60 g (5,0 mmól) H-Asp(OlBu)-D-Phg-NH2- -ot és 1,99 g (5,0 mmól) BOC-Nle-OPFP-t 0,70 ml (5,0 mmól)trietilamin jelenlétében 10 ml DMF-ban reagáltatunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a szilárd maradékot éterrel szűrjük. így 2,45 g (91,9%) BOC-Nle-Asp(0*Bu)-D—Phg—NH2 -ot kapunk, olvadáspont: 207— -208 °C, R? = 0,75, [o]D = -62,8° (c = 1,0, dimetilformamidban). Elemzési eredmények a C27H4207N4 összegképlet (molekulasúly: 534,64) alapján: számított: C =60,65%, H =7,92%, N = 10,48%, talált: C =60,63%, H =8,04%, N = 10,18%. 4. lépés L-Norleucil-L-aszpaiagil-D-fenil-glicin-amid-hidroklorid 2,20 g (4,11 mmól) BOC—Nie—AspíO'Bu)—D-Phg-NH2 -ot 15 ml 4 n sósavas ecetsawal kezelünk. 1 óra múlva a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a szilárd maradékot éterrel szűrjük, így 1,70 g (99%) H-Nle-Asp-D—Phg-NH2 * HCl-ot kapunk, olvadáspont: 225 (bomlik), Rj = 0,20, [a]D = -63,7° (c = 1,0, dimetilformamidban). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
