175151. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenilglicint tartalmazó, gasztrin hatású peptidek előállítására
23 175151 24 4. lépés N-terc-Butil-oxi-karbonil-L-triptofd-L--norvalil-L-aszparagil-D-fenil-glicin-amid 1,50 g (3,74 mmól) H-Nva-Asp-D-Phg-NH2 • HCl-ot és 1,50 g (3,74 mmól) BOC-Trp—OSu-t 1,05 ml (7,5 mmól) trietilamin jelenlétében 30 ml DMF-ban reagáltatunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot vízzel szűrjük. A 2,36 g súlyú nyersterméket 300 ml 80%-os etanolból átkristályosítjuk. így 1,54 g (66,2%) BOC—Trp—Nva—Asp—D-Phg—NH2-ot kapunk, olvadáspont: 240 °C (bomlik), R|=0,35, fa]D = -60,5° (c = 1,0, dimetilformamidban). Elemzési eredmények a C33H4208N6 összegképlet (molekulasúly: 650,71) alapján: számított: C =60,91%, H =6,51%, N =12,92%, talált: C = 60,66%, H = 6,59%, N = 12,57%. 5. lépés L-Triptofil-L-norvalil-L-aszparagil-D-fenil-glicín-amid-hidroklorid 1,50 g (2,30 mmól) BOC—Trp—Nva—Asp—D—Phg-NH2-ot 20 ml 4 n sósavas dioxánnal kezelünk 0,77 ml (11 mmól) merkapto-etanol jelenlétében. 30 perc elteltével a szuszpenziót vákuumban bepároljuk, a szilárd maradékot éterrel szüljük. így 1,34 g (99,0%) H—Trp—Nva—Asp—D—Phg—NH2 • • HCl-t kapunk, olvadáspont: 216 °C (bomlik), Rf = = 0,30, [a]D = -53,3° (c = 1,0, dimetilformamidban). 6. lépés D-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino-oxi)--propionil-L-triptofil-L-norvalil-L-aszparagjl-D-fenil-glicin-amid 1,24 g (2,11 mmól) H—Trp—Nva—Asp—D—Phg-NH2 • HCl-ot és 0,95 g (2,10 mmól) BOC-D— OAla—OPCP-t 40 ml DMF-ban reagáltatunk 0,88 ml (6,3 mmól) trietilamin jelenlétében. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot vízzel szüljük, majd a csapadékot vízzel és éterrel mossuk. Az 1,40 g nyersterméket 7 ml pirídin : ecetsav : víz = 20 : 6 :11 elegyben átkristályosítjuk. így 0,72 g BOC-D-OAla-Trp-Nva-Asp-DPhg — NH2-ot kapunk, olvadáspont: 210 °C, Rf = 0,28, [a]D = —26,5° (c= 1,0, dimetilformamidban). Elemzési eredmények a C36H47Oi0N7 összegképlet (molekulasúly: 737,79) alapján: számított: C =58,61%, H =6,42%, N = 13,29%, talált: C =58,57%, H=6,20%, N =13,17%. 11. példa 1. lépés L-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino)-dekánsav-pentafluor-fenil-észter 4,25 g (14,7 mmól) BOC—Ade—OH-ot és 2,94 g (16,0 mmól) pentafluor-fenolt 40 ml etil-acetátban oldva 0 °C-on, 2,99 g (14,5 mmól) DCC-vel reagáltatunk. A reakcióelegyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten, majd 1 órán keresztül 0 °C-on keverjük. A kivált diciklohexil-karbamid kiszűrése után a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradék olajszerű anyagot 40 ml n-hexánban oldjuk. Az oldatot ötször 20 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd kétszer 20 ml vízzel kirázzuk, ás szárítás után vákuumban bepároljuk. A maradék olajszerű anyag hidegen kikristályosodik. így 5,82 g (87,5%) BOC—L—Ade—OPFP-t kapunk, olvadáspont: 45-46 °C, Rf = 0,85, [a]D=-18,l° (c=l,0, dioxánban). Elemzési eredmények a C21H2804NF5 összegképlet (molekulasúly: 434,45) alapján: számított: C = 55,63%, H = 6,22%, F =20,95%, talált: C =55,56%, H =5,96%, F =20,89%. 2. lépés L-2-(terc-Butil-oxi-karbonil-amino)-dekanoil-L-aszparagil-j3-(terc-butil-észter)-D-fenil-glicin-amid 0,96 g (3,0 mmól) H—AspíO'Bu)—D—Phg—NH2- -ot (9. példa, 2. lépés) és 1,36 g (3,0 mmól) BOC-L-Ade-OPFP-t 0,42 ml (3,0 mmól) trietilamin jelenlétében 10 ml DMF-ban reagáltatunk. Másnap a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a maradékot éterrel megszilárdítjuk, és a szuszpenziót szűrjük, majd a csapadékot éterrel mossuk. így 1,53 g (86,4%) BOC-L-Ade-Asp—D—Phg-NH2 -ot kapunk, olvadáspont: 182—183 °C, Rj? =0,70, [a]D = —27,6° (c = 1,0, dimetilformamidban). Elemzési eredmények a C31H5o07N4 összegképlet (molekulasúly: 590,89) alapján: számított: C =63,02%, H =8,53%, N = 9,49%, talált: C = 62,89%, H = 8,66%, N = 9,44%. 3. lépés L-2-Amino-dekanoil-L-aszparagil-D-fenil--glicin-amid-hidroklorid 1,40 g (2,37 mmól) BOC-L-Ade-Asp-D-Phg-NH2-ot 15 ml 4 n sósavas ecetsavval kezelünk. 1 óra múlva a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk, a szilárd maradékot éterrel szüljük. így 1,0 g (89,3%) H-L—Ade—Asp—D-Phg-NHj* HCl-ot kapunk, olvadáspont: 177-178 °C, Rf = 0,35, [a]D = = -58,9° ( c = 1,0, dimetilformamidban). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 $5 40 65 12
