175046. lajstromszámú szabadalom • Eljárás klavulánsav-származékok előállítására
175046 12 DL-3-[2-N-benzil-N-(2-hidroxi-propil)-amino-etilidén]-7-oxo-l-azabiciklo[3,2.0]heptán-2-karbonsav /9-[Dl-N-benzil-N-(2-hidroxi-propil)-amino]-9-dezoxi-klavulánsav/ (el5 vegyidet) A reakciót az M) reakcióvázlat szemlélteti. 90 mg a 7. példában előállított e8 vegyületet 10 ml etanolban oldottunk, hozzáadtunk 33 mg 10%-os palládium/szén katalizátort, és környezeti hőmérsékleten és atmoszférikus nyomáson hidrogéneztük. A reakció 30 perc alatt befejeződött. A katalizátort szilikagélen keresztül történő szűréssel eltávolítottuk a szűrletet bepároltuk, a gumiszerü maradékot 20 ml etilacetátban felvettük és 4 x 10 ml vízzel extraháltuk. A vizes extraktumokat egyesítettük, és vákuumban bepároltuk. Ilyen módon 52%-os termeléssel kaptuk a cím szerinti vegyületet halványsárga gumiszerű anyag formájában. Infravörös spektrum: (fdm) 3400, 1790, 1695. 1620 cm'* 1. A tömegspektrum a következő maximumokat mutatta: m/e 347 (M + 1 ) és m/e 165 + (PhCHí NHCH2 CHOHCHa ). 14. példa A találmány szerinti vegyületek aktivitása a) A találmány szerinti vegyületek kevéssé toxikusak. így például a 8. és 12. példában előállított vegyületek LDSo értéke 500 mg/kg felett van egéren szubkután vagy perorális adagolás esetén. b) Az, hogy a találmány szerinti vegyületek és az ismert antibiotikumok között szinergizmus alakul ki, a következőképpen mutatható be. Vizsgáltuk ampicillin, ampicillin és a találmány szerinti vegyületek, továbbá a találmány szerinti vegyületek minimális gátló koncentrációját Staphylococcus aureus Russell törzzsel szemben. Az ampicillin egyedül 250 mikrogramm/ml dózisban sem okozott gátlást, míg a találmány szerinti vegyületek 5 mikrogramm/ml dózisban is hatástalanok voltak. A vizsgált kombinációkkal az alábbi eredményeket kaptuk: 11 13. példa Ampicillin minimális gátló Vegyület koncentrációja (jug/ml) (példa száma) 1 /ag/ml találmány szerinti vegyület jelenlétében 2 3,12 1 7,8 8 >0,09 6 3-(2-N-benzil-N-norbornil-amino-etilidén)-7-oxo-1 -azabiciklo[ 3,2,0]heptán-2- -karbonsav-metilészter [2-(N-benzil)-norbornil-amino-dezoxi-klavulánsav-metilészter] (el7 vegyület) A reakciót az N) reakcióvázlat szemlélteti. 2,9 g klavulánsav-nátriumsó-tetrahidrátot (el6 vegyület) 25 ml dimetilformamidban 25 ml metiljodiddal kezeltünk szobahőmérsékleten 1 órán át. 10 ml acetonitrilt adtunk hozzá, és csökkentett nyomáson lepároltuk a metiljodid feleslegének eltávolítására. A visszamaradó dimetilformamidos oldatot jégre öntöttük, majd 1,5 g ftálsavanhidridet és 5 ml trietil-amint adtunk hozzá. A reakcióelegyet 1 órán át tartottuk 5 °C alatt, majd 2 x 25 ml acetonitrilt adtunk hozzá, és mindkét esetben csökkentett nyomáson lepároltuk. Ezután 4 g 2-N-benzil-norbomil-amint adtunk hozzá, és a reakcióelegyet egy éjszakán át kevertük 5 °C-on. A dimetilformamid legnagyobb részét vákuumban lepároltuk, a maradékot etilacetát és ciklohexán 1 : 1 arányú elegyében (100 ml) oldottuk, 15 g kromatográfiás minőségű szilikagélt adtunk hozzá, szűrtük, a szűrletet kis térfogatúra pároltuk be, majd a maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáltuk. Eluálószerként etilacetátot és ciklohexánt használtunk. A kevésbé poláros, béta-laktámot tartalmazó frakciókat bepároltuk, és ilyen módon 50 mg cím szerinti vegyületet kaptunk sárga olaj formájában. Infravörös spektrum: 1800 cm-1 (béta-laktám), 1750 cm-1 (észter C=0), 1695 cm'1 (C=C). 15. példa 16. példa 3-(2-N-benzil-N-etil-amino-etilidén)-7-oxo-l-azabiciklo[3,2,0]heptán-2-karbonsav-benzilészter (N-benzil-N-etil-amino-dezoxi-klavulánsav-benzilészter) (el8 vegyület) A reakciót az O) reakcióvázlat szemlélteti. 0,44 g klavuladién-benzilésztert 8 ml acetonitrilben oldottunk, és a -10°C-ra hűtött oldathoz 0,27 g N-benzil-etilamint adtunk. A reakcióelegyet —5 C és 0 °C közötti hőmérsékleten tartottuk 1,5 órán át, majd 70 ml etilacetátot adtunk hozzá és az elegyet kis térfogatúra pároltuk be. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon kromatografáltuk, az elúciót ciklohexán és etilacetát 7 : 1 arányú elegyével kezdtük, majd az elegyarányt gyorsan 2 : 1-re változtattuk. A kiindulási anyag leoldása utáni frakciókat gyűjtöttük össze, és az oldószer lepárlásával 45 mg cím szerinti vegyületet kaptunk halványsárga olaj formájában. Infravörös spektrum: 1803 cm'1 (béta-laktám), 1750 cm-1 (észter) 1700 cm'1 (C=C). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10 0,156
