175033. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és eszköz humán korion gonadotropin fokozott termelésével járó rákos megbetegedések kimutatására, valamint terhesség meghatározására
13 175033 14 az 52 belső fal-tag egymáshoz való megfelelő helyzetének biztosítása. Az 51 külső fal-tag tartja a piramidálisan kialakított 54 egységet; az 54 egység 55 alsó része folyadékok által átjárhatatlan anyagból, míg 56 felső része ultraszűrő membránból van. Az 54 egység mellett közvetlenül az 57 abszorbens van, éspedig az 56 membrán külső felületével hatásos kapcsolatban. Az 55 alsó rész alatt van az 52 belső fal-tag alsó részére szerelt tartók által tartott 58 reagenstartály, amelyben a 60 gumidugó által vákuum alatt tartott 59 reagens van. A folyadék által átjárhatatlan 55 alsó rész fenekén függ az üreges 61 cső, amelybe az 55 alsó részből folyadék tud befolyni és amelynek végét a 60 gumidugó lezárja. Az 54 egység fölött az 51 külső fal-tag által tartva van a 62 szűrő. A találmány szerinti eszköz ezen kiviteli alakja el van látva továbbá az eltávolítható 63 porvédő tetővel és az 58 reagenstartály alatt elhelyezkedő 20 tükörrel. Gyakorlati alkalmazás során vizelet előre meghatározott térfogatú mennyiségét a 62 szűrőn át szűrjük, majd a piramidálisan kialakított 54 egységbe gyűjtjük. Az 56 membránon át az abszorbeálható anyagok az 57 abszorbensbe jutnak, míg a visszatartott rész a folyadékok által átjárhatatlan 55 alsó részben gyűlik össze. Miután a visszatartott rész összegyűlt, az 53 csatlakozót eltávolítjuk és a külső fal-tagot lefelé, azaz a 49 alaprész felé toljuk, miáltal a 61 cső átszúrja a 60 gumidugót és a visszatartott rész vákuum segítsége mellett az 58 reagenstartályba jut. Az eszközt ezután az 51 külső fal-tag visszahúzása, illetve az 52 külső fal-tagtól való elválasztása útján két részre osztjuk, amikoris visszamarad a 49 alaprészből, 52 belső fal-tagból, 20 tükörből és 58 reagenstartályból álló alsó rész. Miután a visszatartott rész és a reagens között a reakció bekövetkezett, az 58 tartály alatt elhelyezett tükör segítségével az eredményt megfigyeljük. A 15. ábrán sematikusan azokat a lépéseket kívánjuk ábrázolni, amikoris az ultraszűrő membránnal gonadotropint tartalmazó vizeletet vagy vérszérumot koncentrálunk, amikoris a membrán szoros kapcsolatban van biológiai folyadékok abszorbeálására alkalmas abszorbenssel, majd az így kapott koncentrátumot vagy visszatartott részt egy, a gonadotropin jelenlétét kimutatni képes reagenssel érintkeztetjük. A találmány szerinti eszköz gyártásában hasznosítható anyagok közül az ultraszűrő membránhoz és az abszorbenshez használható anyagokkal kapcsolatban egyrészt utalunk az előzőekben az ultraszűrő membránokkal kapcsolatban ismertetettekre, valamint például a 3 817 379 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban foglaltakra. A találmány szerinti eszköznek az ultraszűrő membrántól eltérő részeit illetően megjegyezzük, hogy azok bármely olyan átjárhatatlan anyagból készülnek, amelyek olvasztás vagy préselés útján könnyen a kívánt formára alakíthatók. így például használhatunk üveget vagy műanyagokat. E célra leginkább gazdaságos és előnyös hőre lágyuló anyagok vagy katalitikusán térhálósított műanyagok, például polietilén, polipropilén vagy polisztirol alkalmazása. A találmány szerinti eljárásnak vizeletben HCG kimutatásával kapcsolatos érzékenységét olyan kísérlettel demonstráljuk, amelyben normális vizelethez (azaz HCG-től mentes vizelethez) előre meghatározott mennyiségekben HCG-t adunk, majd az így kapott mintákat vizsgáljuk a találmány szerinti módszerrel. Az alábbi I. táblázatban tehát olyan kísérletek eredményeit foglaljuk össze, amelyek esetében a reguláris ciklus 16. és 17. napján egy nőtől, illetve egy poszt - menopauzális nőtől vett vizeletmintákhoz előre meghatározott mennyiségben HCG-t (éspedig az Ayerst Laboratories New York-i, amerikai egyesült államokbeli cég APL márkanév alatt forgalomba hozott anyagát) adunk, amikoris 20, 40 és 80 milli nemzetközi egység/ml HCG-t tartalmazó mintákat kapunk. (Megjegyezzük, hogy a jelenleg gyakorlatban alkalmazott terhességi vizsgálatok ilyen nőktől vett vizeletmintákban téves pozitív eredményeket adnak.) Ezt követően a mintákat a találmány szerinti módszer egy korábban ismertetett foganatosítási módja szerinti koncentrálásnak, majd kimutatásnak vetjük alá, a koncentrálást megelőzően a koncentrátor esetében 1%-os BSA-előmosást alkalmazva. A vizeletminták ugyanakkor önmaguk kontrolljaként is szolgálnak, így minden kísérletet kétszeresen végzünk el. I. táblázat Vizelet- Az utolsó HCG mennyisége Eredméminta sor- menzesz (milli nemzet- nyék1 száma első napja közi egység/ml utáni nap vizelet) sorszáma vagy posztmenopauzális (PM) állapot jelzése 1 16 kontroll _ 1 16 plusz HCG (20) ± 1 16 plusz HCG (40) + 1 16 plusz HCG (80) ++ 2 17 kontroll — 2 17 plusz HCG (20) ± 2 17 plusz HCG (40) + 2 17 plusz HCG (80) ++ 3 PM kontroll-3 PM plusz HCG (40) + 3 PM plusz HCG (80) ++ 4 PM kontroll-4 PM plusz HCG (40) + 4 PM plusz HCG (80) +4-1 ++ = erősen pozitív + = pozitív ± = bizonytalan - = negatív Az I. táblázat eredményeiből látható, hogy a találmány szerinti módszerrel vizeletben HCG pontosan kimutatható 40 müli nemzetközi egység/ml vagy ennél magasabb koncentrációk esetében. Ezek az eredmények ugyanakkor jelzik, hogy a találmány szerinti módszernek nagyobb az érzékenysége HCG-nek vizeletben való kimutatására, mint a jelenleg alkalmazott egyéb in vitro módszereké, kivéve a korábban már említett radioimmunológiai és radioreceptor módszereket. Az eredmények még jelentősebbek, ha figyelem5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
