174299. lajstromszámú szabadalom • Eljárás kérődzők tápanyaghasznosításának fokozására alkalmas A-28 086 jelű antibiotikum A vagy D jelű összetevőit tartalmazó szarvasmarha-takarmány előállítására
23 174299 24 nátriumhidroxid oldattal 10,5 és 11 közötti értékre állítjuk be. Egy órán át keverjük az elegyet, majd etil-acetáttal extraháljuk. Csökkentett nyomáson desztilláljuk az • etil-acetátos extraktumot, a száraz desztillációs maradékot aceton és víz elegyből kikristályosítjuk. így 378 mg, 120 °C és 123 °C közötti hőmérsékleten olvadó A 28 086 A-nátriumsót kapunk. 11—15. példa A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és telített báriumhidroxiddal megismételjük, amikor 369 mg, 188—190 °C olvadáspontú A 28 086 A-báriumsót kapunk. A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és 5 n káliumhidroxiddal megismételjük, amikor 363 mg, 165-167 °C olvadáspontú A 28 086 A-káliumsót kapunk. A 10. példában megadott eljárást 500 mg A 28 086 A antibiotikummal és In céziumhidroxid oldattal megismételjük, amikor 540 mg, 190 °C és 210 °C közötti hőmérsékleten olvadó A 28 086 A-céziumsót kapunk. A 10. példában megadott eljárást A 28 086 D antibiotikummal és 5 n nátriumhidroxid oldattal megismételjük, amikor A 28 086 D-nátriumsót kapunk. 16. példa Az A 28 086 komplex előállítása Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel rázott tenyészetben. Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzs tenyészetét készítjük el, a törzset az alábbiakban megadott összetételű ferdeagaron tartjuk fent. Dikáliu mhidrog énfoszfát 2 g Magnéziumszulfát-heptahidrát 0,25 g Ammóniumnitrát 2 g Kalciumkarbonát 2,5 g Vas(II)-szulfát-heptahidrát 0,001 g Mangánklorid-heptahidrát 0,001 g Cinkszulfát-heptahidrát 0,001 g Glükóz 10 g Agar 20 g Desztillált víz 1 literre A táptalaj pH-ja beállítás nélkül: 7,7. A ferdeagart a Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel oltjuk, majd 7 napon át 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk a tenyészeteket. Steril marhaszérumot adunk az érett ferdeagar tenyészethez, majd spóra- és micéliumszuszpenzió készítésére steril kacs segítségével kapargatjuk a felszínét. A szuszpenzióból legfeljebb hat liofilezett készítményt állítunk elő. Egy fagyasztva szárított készítménnyel 50 ml, a következőkben megadott összetételű vegetatív táptalajt oltunk. Glükóz 2,0% Szójaliszt 1,5% Kukoricalekvár 1,0% Kalciumkarbonát 0,2% Csapvíz 1 literre A táptalaj pH-ját híg nátriumhidroxid oldattal 6,5-re állítjuk be. A beoltott vegetatív tenyészetet 250 ml-es Erlenmeyer-lombikban, percenként 5,1 cm kitéréssel 250-et forduló körkörös rázóasztalon 48 órán át, 30 °C hőmérsékleten inkubáljuk. A kinőtt, a fentiekben megadott módon előállított vegetatív tenyészet 0,5 ml-ével (1% 50 ml, az alábbiakban megadott összetételű fermentációs táptalajt oltunk: Tápióka dextrin+ 6,00% Enzimesen hidrolizált kazein** 0,60% Enzimesen hidrolizált kazein*** 0,20% Kalciumkarbonát 0,20% Magnéziumszulfát -heptahidrát 0,05% Melasz 1,50% Finomított szójaolaj 0,50% Csapvíz 1 literre A táptalaj pH-ja (beállítás nélkül) 6.6. + Staley Dextrin 11, A. E. Staley Co., Decatur, m. ++ Amber EHC, Amber Laboratories, Juneau, Wise. *** NZ Amine A, Sheffield Chemical Co., Norwich, N. Y. 17. példa Az A 28 086 komplexek előállítása Streptomyces aureofaciens NRRL 8092 törzzsel tankfermentorban. A 16. példában megadott rázott tenyésztést ismételjük meg az A 28 086 fermentorban való előállításra. Nagyobb mennyiségű inokulum előállí-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
