174137. lajstromszámú szabadalom • Eljárás A—22082 jelű polipeptid antibiotikum előállítására
3 174137 4 f) mind a semleges, mind a savas metanolos :özegben felvett ultraibolya abszorpciós spektrumban 225 nm (e= 18,000), 275 nm (e = 3,000) és !84 nm (váll,e = 2500) hullámhossz-értéknél, bázi:us metanolos közegben pedig 245 nm (e = 16,000) s 290 nm (e = 3,000) hullámhossz-értéknél találatok abszorpciós maximumok, g) perdeutero-metanolban mint oldószerben felett 13C-magmágneses abszorpciós spektrumában a ;övetkező jellemző sávok vannak: 5 = 176,1, 174,3, 73,4, 172,7, 172,4, 169,8, 158,4, 132,8, 130,9, 29,6, 129,0, 116,2, 77,0, 75,7, 74,4, 71,3, 70,9, .9,6, 68,3, 62,4, 58,7, 56,9, 56,1, 52,9, 39,0, .8,5, 36,8, 35,2, 33,9, 32,9, 32,6, 30,7, 30,4, i0,2, 28,2, 27,0, 26,5, 23,6, 20,1, 19,6, 14,4 és 1,3 ppm h) tartalmaz egy 66%-os vizes dimetil-formmidban titrálható, 12,7-es pKa-értékű csoportot, i) hidrolizátumának aminosav-analízise treonin, lidroxi-prolin és három további, eddig még nem zonosított aminosav jelenlétét mutatja, j) vékonyrétegkromatográfiás Rrértéke szilikagél ímezen, benzol és metanol 7 :3 arányú elegy ében uttatva és Candida albicans-szal végzett bioautogáfiával kiértékelve: 0,35, k) papírkromatográfiás Rf-értékei az alább megdott futtató elegyekben futtatva és Candida albians-szal kiértékelve a következők: Lf-érték Futtatóelegy '.76 vízzel telített butanol i,69 vízzel telített butanol plusz 2% p-toluol-szulfonsav 1,75 metanol és 0,1 normál sósav-oldat 3 :1 arányú elegye ',17 butanol, etanol és víz 13,5 :15 :150 arányú elegye (78 metanol cs 5,7-es pH-értékű, 0,05 mólos nátrium-citrát-oldat 7 : 3 arányú elegye, a papírt 5,7-es pH-értékű, 0,05 mólos nátrium-citrát-oldattal pufferoltuk. Az A 22-082 jelű antibiotikum elem analízise .ülönösen jól megfelel a C52 Hs i N7Oi g *H20 taasztalati képletnek (számított értékek a fenti képűre: C 56,24, H 7,54, N 8,84, O 27,3%) Az A—22082 jelű antibiotikum kálium-bromid asztillában felvett infravörös spektrumát a melléelt rajzon mutatjuk be. Az A-22082 jelű antibiotikum hasonlít, de haásspektrumában eltér az F. Benz és munkatársai Ital leírt [Helv. Chim. Ácta 57, 2459—2477 1974)], Echinocandin B jelű polipeptid antibioti:umtól. Az A-22082 jelű antibiotikum termelésére alalmas mikroorganizmus törzs az Aspergillus nilulans (Eidam) Wint., amely az Aspergillus nidums-szerű csoporthoz tartozik. Ezt a besorolást a C.B. Raper és D.I. Fennel által a „The Genus Aspergillus” (The Williams and Wilkins Company, Baltimore, Md., 1965) c. műben leírtak alapján végeztük. A színeket az ISCC-NBS-módszerrel (K.L. Kelly and D.B. Judd, „The ISCC-NBS Method of Designating Color and a Dictionary of Color Names”, U.S. Dept, of Commerce, Circ. 553, Washington, D.C., 1955) neveztük el. A Maerz-Paul-féle színmintákat A. Maerz és M.R. Paul a „Dictionary of Color”, McGraw-Hill Book Company New York, N.Y. 1950, című művében írta le. A tenyésztést 25° C-os hőmérsékleten végeztük, kivéve, ahol az ettől eltérő értéket külön megadtuk. Az A. nidulans NRRL 8112 tenyésztési tulajdonságai Czapek-agar Kéthetes, 25° C-on végzett tenyésztés során a tenyészet átmérője eléri a 4,0 cm-t. A telep enyhén ráncos felszínű, és a mélyen a felszín alá benyúló, barnássárga hifákból álló szegélye erősen csipkézett. Esetenként idővel rózsaszínessé váló színtelen váladék jelenik meg. A telep felületén és szegélye közelében laza szövésű, megközelítőleg gömb alakú micéliumnyalábok figyelhetők meg szabálytalan elrendeződésben. öregedésük során ezek a nyalábok sűrűbb szövésűek lesznek, és összefonódnak a Hülle-sejtekkel, és esetenként ez utóbbiak körülfogják őket. A fiatal tenyészet színe fehértől sárgásbarnáig terjed, ez azután halvány sárgászölddé válik (ISCC-NBS 12 és Maerz és Paul 10-A-l). Két hét alatt a tenyészet színe halvány narancssárgává válik (ISCC-NBS 73 és Maerz és Paul 10-B-3). Három hetes tenyésztés után a néha kötegekben megjelenő, szélesen elszórt konídiumnyelek színe először fehér és világossárga között van, majd sötét szürkéssárga lesz (ISCC-NBS 91 és Maerz és Paul 13-11-1). Oldódó színanyag nem keletkezik. A telep kissé meggörbült hátoldalának színe a fehér és a világosbarna között változik (ISCC-NBS 57 és Maerz és Paul 5-A-10), és a telep öregedése során sötét bíborszínű árnyékok jelennek meg rajta. A konídiumnyelek eleinte sugárirányúak, majd a telep öregedése során rövidebbekké és osriopszerűvé válnak. A fiatal, gömb alakú nyelek átmérője 70p-ig terjedhet, átlagosan azonban 60/i-osak. Az oszlopszerű nyelek hossza 75/r és 125/i közé esik, szélességük 30p és 65ß között van, és kiterjedésük átlagosan 5/r x 47/a. A spóratartók, hólyagocskák és phialidok fala sima, színük halványbarna. A spóratartók általában 38—56/r hosszúak, de elérhetik a 85/j-os hosszúságot is. Szélességük legfeljebb 5/a. A hólyagocskák gömb- vagy félgömb alakúak, és végük lehet lapos. Átmérőjük általában 8—11/a, átlagosan 9,6/r. A termőtestek (sterigmatum) két sorban fejlődnek, és a másodlagos termőtestek gyakran páronként jelennek meg. Az elsődleges termőtestek meg5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
