174130. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 7-acilamido-3-(5-oxo-6-hidroxi-4,5-tihidro-1,2,4-triazin-3-il-tiometil)-3-cefem-származékok előállítására
17 174130 18 rési idő 18 órát ki nem tesz. Az elegy pH-ja ekkor 5,9. A reakcióelegyet jégben hűtjük és keverjük, körülbelül 10 ml-re hígítjuk és a pH-ját 1 n sósavval 1,5-re állítjuk. A keletkező szilárd anyagot szűréssel elkülönítjük, híg sósavval (pH = 1,5) mossuk és levegőn szárítjuk. Ily módon 2,01 g piszkosfehér port kapunk, amelyet 20 ml 1:1 arányú és 6,8 pH-jú víz-metanol-elegyben oldunk. Az oldatot rotációs bepárlóban kis térfogatra (körülbelül 3 ml) bepároljuk és a maradék oldatot 40 g, 1,6 cm magas Sephadex G— 10-es oszlopra visszük. Az oszlopot vízzel eluáljuk, első frakcióként 18ml-t, a következő frakciókként pedig 5-5 ml-t szedünk le. A 4-11. frakciókat egyesítjük, a pH-t híg sósavval 1,5-re csökkentjük és így 1,171 g szilárd anyagot kapunk, amelyet körülbelül 30 ml 3:1 arányú aceton-metanol-elegyben oldunk. Ezután levegőt fúvatunk el az oldat felszíne felett avégett, hogy azt bepároljuk. A keletkező 7-(2-tienil)acetamido-3-(4-etil-5-oxo-6- hidroxi-4,5-dihidro-1,2,4-triazin-3-iltio)metil-3-cefem-4-karbonsavat szűréssel elkülönítjük és acetonnal mossuk. NMR, DMSO d6—D20: 7,46 és 6,96 (m, 3H, tienil), 5,67 (d, 1H, 7a-H), 5,08 (d, 1H, 6a—H), 4,5-3,5 (bm, 8H, 7—CH2 2-CH2, 3-CH2 és triazin N-CH2), és 1,21 ppm (m, 3H, CH2-CH3). 8. példa 12 ml vízhez keverés közben hozzáadunk 531 mg (3 mmól) 3-merkapto-4-metil-5-oxo-6-hidroxi- 4,5-dihidro-l ,2,4-triazint. A keletkező elegy pH-ja 2,3, amelyet 2,9 ml In nátriumhidroxid-oldattal 6,5-re állítunk. Ezután 1,54 g (3 mmól) 7 - ( 2,5 - d iklórfeniltio)acetamido-3-acetoximetil-3-cefem4-karbonsavat adunk keverés közben az elegyhez. Ekkor kocsonyás tömeg keletkezik, amelyet 60 C-ra melegítünk. Az oldatképződés megindul és miközben a hőmérsékletet ezen az értéken tartjuk, a pH-t 7,0-re állítjuk és az elegyet 19 óra hosszat keverjük. Az első 16 óra után az elegy sűrű és kocsonyás, így a keverést megállítjuk és spatulával alaposan átkeveijük, a hátralevő három óra alatt a melegítést keverés nélkül végezzük. A melegítés befejezése után az elegyet jeges fürdőben hűtjük és 1.5 pH-ra savanyítjuk. Az elegyet körülbelül 100 ml-re hígítjuk víz hozzáadásával annak érdekében, hogy folyóssá tegyük. Ezután a reakcióelegyet 1.5 pH-n szobahőmérsékleten 1,5 óra hosszat keverjük, utána szűrjük, híg sósavval (pH = 1,5) mossuk és levegőn szárítjuk. Ily módon krémszínű port kapunk. A port tetrahidrofuránban (THF) oldjuk, szűrjük és etanollal hígítjuk. A keletkező oldatot levegőáramba helyezzük, ekkor szilárd anyag válik ki, amelyre sárga gumiszerű anyag rakódik. Ezt a gumit spatulával eltávolítjuk. A keletkező koncentrátumot szűrjük, a terméket etanollal mossuk és levegőn szárítjuk. Ily módon 861 mg piszkosfehér szilárd anyagot kapunk, amelyet többször átkristályosítunk és így 707 mg 7-(2,5-diklórfeniltio)aceta mi d o - 3 -( 4 - me til-5-oxo-6-hidroxi4,5-dihidro-l ,2,4- -triazin-3-iltio)-metil- 3-cefem4-karbonsavat kapunk piszkosfehér por alakjában. NMR, DMSO d6-D20: 7,4 (bm, 4H, 2,5-diklórfenil), 5,70 (d, 1H, 7a—H), 5,11 (d, 1H, 6a—H), 4,15 (b, 2H, 3—CH2), 3,92 (b, 2H, 7—CH2) 3,69 (b, 2H, 2—CH2), és 3,33 (s, 3H, triazin (N-CH3). 9. példa 12 ml vízhez keverés közben hozzáadunk 571 mg 3-merkapto-4-etil-5-oxo-6-hidroxi-4,5-dihidro-1,2,4-triazint. A keletkező elegy pH-ja 2,3, amelyet 2,9 ml In nátriumhidroxid-oldattal 6,6-ra állítunk be. Az elegyhez ezután hozzáadunk 1,54 g (3 mmól) 7 - ( 2,5 - d i k 1 ó r f e n i 11 i o )acetamido-3-acetoximetil- 3-cefem-4-karbonsav-nátriumsót és a keletkező elegyet a 8. példában leírt módon kezeljük. Ily módon 7-(2,5-diklórfeniltio)ace ta mido-3-(4-etil-5-oxo-6-hidroxí-4,5-dihidro-l,2,4- -triazin-3-iltio) metil-3-cefem4-karbonsavat kapunk. NMR, DMSO d6-D20: 7,4 (bm, 4H, 2,5-diklórfenil), 5,68 (d, 1H, 7a—H), 5,10 (d, 1H, 6a—H), és 4,5—3,5 ppm (bm, 8H, 7—CH2, 2—OBJ, 3—CH2, és CH3-CH2). 10. példa 12 ml száraz THF-hez hozzáadunk 350 mg (0,695 mmól) 7-(a-amino)fenilacetamido-3-(4-metil-5-oxo-6-hidroxi-4,5-dihidro-l,2,4-triazin-3-iltio)metil-3-cefem-4-karbonsavat és ezt követően 917 mg (7 mmól) N-trimetilszililacetamidot. Az oldódás megtörténte után 1 ml propilénoxidot, majd ezt követően 75 mg (0,75 mmól) 2 ml száraz THF-ben oldott N-(p-ldórbenzoil)-N-(klórforrnil)-metilamint adunk az oldathoz. A hozzáadás alatt az elegy hőmérsékletét —10 °C-on tartjuk. A keletkező elegyet 10 percig -10°C-on, utána pedig 15 percig szobahőmérsékleten keverjük, majd 1 ml vizet és 30 ml nátriumhidrogénkarbonát-oldatot adunk hozzá. Az elegyet ezután 50 ml 6:1 arányú etilacetát-THF-eleggyel mossuk, a vizes réteg pH-ját 1 n sósavval 2,0-re állítjuk 50 ml 6:1 arányú friss etilacetát-THF-elegy jelenlétében. A szerves réteget elkülönítjük és magnéziumszulfát felett szárítjuk. Az elegyet ezután szűrjük és szárazra pároljuk. A por alakú maradékot etilacetátban oldjuk melegen és az etilacetátos oldatot addig töményítjük be, ameddig az zavarossá kezd válni. Ezután izopropilalkoholt adunk az oldathoz a teljes oldódás elősegítésére, majd az oldatot a zavarosodás kezdetéig újból betöményítjük. A tömény oldatot éjszakán át hűtjük és ekkor 234 mg 7-a- [ 3 -(4 - ki órbenzoil)-3-metil-1 -ureidoj-fenilacetamido-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
