174130. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 7-acilamido-3-(5-oxo-6-hidroxi-4,5-tihidro-1,2,4-triazin-3-il-tiometil)-3-cefem-származékok előállítására
15 174130 16 NMR, DMSO d6 : 8,69 (d, 1H, 70-NH), 7,42 (m, 5H, C6Hs), 5,75 (q, 1H, 7a—H), 5,15 (s 1H, CHOH), 4,13 (m, 2H, 3—CH2), és 3,31 (s, 3H, triazin N-CH3). 4. példa 20 ml vízhez hozzáadunk 3,46 g (12,0 mmól) 7-formamido-3-acetoximetil-3-cefem- 4-karbonsavat és 2,0 g (12,55 mmól) 3-merkapto-4-metil-5-oxo-6- -hidroxi-4,5-dihidro-l,2,4-triazint. A keletkező elegyet keveijük és fokozatosan 1 n nátriumhidroxidot adunk hozzá mindaddig, ameddig a pH állandóan 7,0-es értéken nem marad. Az elegyet ezután 55 °C-on 26 óra hosszat keveijük, utána 20 ml-re betöményítjük és 3 n sósavval hűtés közben 1,2 pH-ra savanyítjuk. A keletkező csapadékot szűréssel elkülönítjük és azonnal üvegburába tesszük és vákuumban szárítjuk, őrlőben megőröljük, így 2,75 g anyagot kapunk, amelyet 150-150 ml forro izopropilalkohollal háromszor kezelünk. Az izopropilalkoholos oldatot szárazra pároljuk és a maradékot 30—30 ml etilacetáttal kétszer trituráljuk. Az oldhatatlan anyagot szűréssel elkülönítjük, etilacetáttal mossuk és szárítjuk. Ily módon 1,56 g 7-for ma mido-3-(4-metil-5-oxo-6-hidroxi-4,5-dihidrO' -l ,2,4-triazin-3-iltio)metil-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. NMR, DMSO d6-D2 0:8,24 (s, 1H, OC-H), 5,79 (d, 1H, 7a—H), 5,14 (d, 1H, 6a—H), 3,73 (b, 2H, 2-CHj), és 3,40 ppm (s, 3H, triazin N-CH3). 5. példa 0,74 g 4, példa szerinti terméket 12 ml száraz metanolba keverünk és 1,5 ml tömény sósavat adunk hozzá, miközben az oldódás teljesen végbemegy. Rövid idő után fehér szilárd anyag kezd kiválni. A keverést 1,7 óra hosszat folytatjuk, közben az elegy egyre sűrűbb lesz a kivált fehér csapadéktól, amelyet szűréssel elkülönítünk és szárítunk. A kapott 0,346 g terméket vékonyrétegkromatográfiásan vizsgáljuk, amely azt mutatja, hogy a kapott 7-amino-3-(4-metil-5-oxo-6-hidroxi-4,5-dihidro-1,2,4-tríazin-3-iItio)metil-3-cefem-4-karbonsav hidrokloridja nagyon tiszta termék. NMR, DMSO d6 : 5,19 (q, 2H, 7a-H és 6a-H), 4,19 (m, 2H, 3—CH2), 3,77 (b, 2H, 2—CH2), és 3,31 ppm (s, 3H, triazin N-CH3). 6. példa 36 ml vízhez hozzáadunk 1,44 g (9 mmól) 3-merkapto-4-metil-5-oxo-6-hidroxi-4,5- dihidro-1,2,4-triazint. A keletkező elegy pH-ja 2,9, amelyet 8,7 ml In nátriumhidroxid-oldattal 7,20-ra álhtunk be. A kapott elegyhez hozzáadunk 3,77 g (9 mmól) 7-(2-tienil)-acetamido-3-acetoximetil-3-cefem-4-karbonsav-nátriumsót. A keletkező elegy pH-ja 6,8 lesz, amelyet ? csepp 1 n nátriumhidroxid-oldattal 7,12-re állítunk. Az elegyet 55 °C-on 4,25 óra hosszat keverjük és eközben a pH 6,03-ra csökken. A pH-t 0,3 ml In nátriumhidroxid-oldattal 7,10-re növeljük és az elegyet további 14,25 óra hosszat melegítjük 55 °C-on. Eközben a pH 6,02-re változik, amelyet azután 0,8 ml In nátriumhidroxid-oldattal 7,09-re növelünk és a melegítést 1,5 óra hosszat tovább folytatjuk (a teljes melegitési idő 55 °C-on 20 óra). A keletkező reakcióelegyet ezután jeges vízbe keveijük és a pH-t 1 n sósav adagolásával 1,5-re csökkentjük. Ekkor szilárd anyag válik ki, amelyet szűréssel elkülönítünk, híg savval (pH =1,5) mosunk és levegőn szárítunk, ily módon 3,51 g bamássárga színű port kapunk. A szilárd anyagot 25 ml vízbe keverjük és lassú ütemben 10 ml metanolt adunk hozzá. A keletkező elegy pH-ját 1 n nátriumhidroxid adagonkénti hozzáadásával 6,8-ra állítjuk. A kapott oldatot körülbelül 5 ml-re rotációs bepárlóban betöményítjük oly módon, hogy a metanolt eltávolítjuk az elegyből, majd a tömény elegyet 70 g, 2 cm magas Sephadex G—10-es oszlopra visszük vízben. Az oszlopot vízzel eluáljuk és 10—12ml-es frakciókat szedünk le. A 3-5., a 6—7. és a 8-10. frakciókat egyesítjük és a kapott adagokat külön-külön keverjük hűtés közben és mindegyik pH-ját 1,5-re állítjuk 1 n sósavval. A kapott három csapadékot szűréssel elkülönítjük, híg sósavval (pH = 1,5) mossuk és levegőn szárítjuk. Ily módon piszkosfehér por alakjában 2,13 g, 0,69 g és 0,17 g mennyiségű termékeket kapunk. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat azt mutatja, hogy e termékek azonosak. E termékeket ezért egyesítjük és nagy mennyiségű (körülbelül 1200 ml) acetonban oldjuk, majd a kapott oldatot párologni hagyjuk. Ily módon 1,943 g kristályos 7-(2-tienil)-acetamido-3-{4-metil-5- -oxo-6-hidroxi-4,5- dihidro-1,2,4-triazin- 3-iltio)metil-3-cefem-4-karbonsavat kapunk. NMR, DMSO d6 : 9,1 (d, 1H, 7jß-NH), 7,36 és 6,95 (m, 3H, tienil), 5,70 (d, 1H, 7a-H), 5,12 (d, 1H, 6a—H), 4,14 (m, 2H, 3—CH2), 3,79 (bs, 2H, 7—CH2), 3,68 (m, 2H, 2-CH2), és 3,33 ppm (s, 3H, triazin N-CH3). 7. példa 20 ml vízhez hozzáadunk 0,96 g 3-merkapto-4- -etil-5-oxo-6-hidroxi-4,5-dihidro-l,2,4-triazint. A keletkező elegy pH-ját, amely 2,3,- 5 ml 1 n nátriumhidroxid-oldattal 6,5-re állítjuk. Ezután az elegyhez hozzáadunk 2,09 g (5 mmól) 7-(2-tienil)acetamido-3-acetoximetil-3-cefem4-karbonsav-nátriumsót. A keletkező elegy pH-ja 5,7, amelyet 1 n nátriumhidroxid-oldattal 7,2-re állítunk. A kapott elegyet 60 °C-on keveijük addig, ameddig az összes keve5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
