174067. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szubsztituált 2H-pirán 2,6-dion-származékok előállítására
3 174067 4 A B vázlatban feltüntetett tautoméreket nem sikerült az MMR vizsgálattal oldatban kimutatni, azonban a szilárd anyaggal végzett röntgendiffrakciós vizsgálat azt mutatta, hogy az R helyében p-hidroxi-fenil-csoportot tartalmazó vegyület szilárd alakban hibridizált szén-szén kötést tartalmaz. A kötés távolsága a kettős kötés és egy C-C vegyérték kötés közötti értéket mutatja. A helyettesíthető hidrogénatom a nitrogénatomon található. A célszerűség kedvéért az I általános képletű vegyületek szerkezetét egy képlettel jelöltük, noha az a B vázlat szerinti tautoméreknek felel meg. A találmány szerinti vegyületek az antigén és antitest reakciót befolyásolják, ily módon allergiás megbetegedések, mint asztma, nátha, csalánkiütés esetében eredményesen alkalmazhatók. A találmány szerinti vegyületek inhibitor hatását patkányokon, passzív bőranafilaxiás reakcióban (PCA) vizsgáltuk. A vizsgálati eljárás során megfelelően hígított, ismert koncentrációjú szérumot használunk (amelyet előzőleg ovalbumin-alumíniumhidroxid vagy ovalbumin- im. — Bordatella pertussis és N-Brasiliensis- i.p. segítségével immunizált patkányokról veszünk le. A szérum ovalbuminnal szemben érzékeny antitesteket tartalmaz. A szérumot a felnőtt hím patkány leborotvált hátbőrébe, négy helyre injektáljuk. 48 óra eltelte után az állatoknak intravénásán 0,5 ml izotoniás só-oldatot adunk be, amely oldat 5 mg ovalbumin antigént és 5 mg Evans-kék színezéket tartalmaz. A vizsgálat helyén hisztamin és szerotonin szabadul fel a helyi anafilaxis következtében, ami a kapilláris áteresztőképességet megnöveli ami bőrhólyag-képződéshez vezet. A képződött bőrhólyagot a plazmaproteinhez kötődő Evans-kék színezék teszi láthatóvá. A vizsgálati körülmények között az átlagos bőrhólyag mérete 12x12 mm. Az antigén reakciót követően 30 perc után az állatot elpusztítjuk, a hátbőrőn keletkezett bőrhólyag átmérőjét megmérjük. A vizsgálati állatok egy részének 0,5 perccel az antigénreakciót megelőzően a találmány szerinti vegyületeket tartalmazó intravénás injekciót adunk be (adott esetben hosszabb ideig tartó előkezelést is alkalmazhatunk, és a hatóanyagot más módon, például orálisan vagy intraperitoneálisan is beadhatjuk). A találmány szerinti vegyületek hatását a bőrhólyag kifejlődésének inhibitálása alapján értékeljük. A találmány szerinti vegyületeket 0,5—10mg/kg dózisban adjuk be. Kedvező hatást mutat, az 5 -a ce t il -4 -hi d r o xi-3-[ 1 -(p-hidroxi-fenil-amino)-etilidén]-2H-pirán-2,6-(3H)-dion, amely 5,0 mg/kg intravénás dózis esetében 73%-os inhibitációt mutat a patkányok PCA bőrhólyagvizsgálatánál. Eredményesnek mutatkozott az 5-acetil-4-hidroxi-3-[l-(p-merkaptofenil-amino)-etilidén]-2-H-pirán-2,6(3H)-dion is, amely 0,5 mg/kg intravénás dózisban 100%-os inhibitációt mutat. Eredményesnek találtuk az 5-acetil-3-[l-(p-amino-fenil-amino)-etilidén]-4-hidroxi-2H-pirán-2,6(3H)-diont is, amely 0,5 mg/kg-os intravénás dózisban 58%-os inhibitációt biztosít. Orális alkalmazás esetén, ha az 5-acetiM-hidroxi-3-[ 1 -(p-hidroxi-fenil-amino)-etilidén]-2H-pirán-2,6(3H)-diont 25 mg/kg dózisban 15 perccel az antitest reakciót megelőzően adjuk be patkányoknak, a PCA vizsgálatnál 58%-os inhibitáció mutatkozik. Ez a vegyület in vitro is eredményesnek mutatkozik a majom tüdején és bőrén, továbbá a patkány tüdején előidézett antigén-reakció inhibitálásában. Az ehhez szükséges koncentráció értéke: 3,3 • 10-4 és 3,3 • 10-6 mól között van. Hasonlóképpen kedvező hatást mutat az 5-acetil-3-[l(p-amino-fenil - amino)-etilidén]-4-hidroxi-2H-pirán-2,6-(3H)-dion, amelyet 25 mg/kg-os dózisban 5 perccel az antigénreakció megindítása előtt adunk be az állatoknak, a körülmények között 32%-os inhibitációt lehet elérni. A találmány szerinti vegyületeket gyógyászati készítményekké alakíthatjuk. A gyógyászati készítmények előállításához ismert hordozó és védőanyagokat használhatunk. A gyógyászati készítmények célszerűen 0,5 mg - 500 mg hatóanyagot tartalmaznak. Kedvező, ha napi 1—4 alkalommal azonos dózist adunk be, a napi dózis összértéke célszerűen 0,5-2000 mg között van. A gyógyászati készítményeket az ismert technológiai megoldásokkal állíthatjuk elő. A találmány szerinti eljárást az alábbi példák illusztrálják: 1. példa 4,2 g (0,02 mól) 3,5-diacetil-4,6-dihidroxi-2H-pirán-2-on-t 150 ml benzol és metanol elegyében oldunk. Az oldatot forraljuk, majd 1,2 g (0,02 mól) n-propil-amint adunk a képződött elegyhez, és egy éjszakán át visszafolyató hűtő alkalmazásával forraljuk. A reakcióelegyet betöményítjük, szűrjük, a szilárd anyagot vízzel hőkezeljük, ily módon 5-acetiM-hidroxi-3-[ 1 -(n-propil-amino)-etilidén]-2H-pirán-2,6(3H)-diont kapunk. Op.: 145— -148 °C. Fentiekhez hasonlóan 1,8 g (0,025 mól) n-butil-amint és 5,3 g (0,025 mól) 3,5-diacetil-4,6- -dihidroxi-2H-pirán-2-on-t 50 ml benzolban oldunk és egy éjszakán át hőkezeljük. A kapott anyagot leszűrve 5-acetil-3-[ 1 -(n-butil-amino)-etilidén]-4-hidroxi-2H-pirán-2,6(3H)-diont kapunk. Op.: 112— —114 °C. 2. példa 4,2 g (0,02 mól) 3,5-diacetil-4,6-dihidroxi-2H-pirán-2-on-t 150 ml benzolhoz adunk. Az oldatot forraljuk, majd 2,0 g (0,02 mól) n-hexilamin hozzáadása után az elegyet betöményítjük az olajos maradékot petroléterrel felvesszük, ily módon 5-acetil-3-[l -(n-hexilamino-etilidén]-4-hidroxi-2H-pirán-2,6(3H)-diont kapunk. Op.: 80—82 °C. 3. példa 4,24 g (0,02 mól) 3,5-diacetil-4,6-dihidroxi-2H-pirán-2-on-t oldunk fel 200 ml metanolban, majd a forrásban levő oldathoz 2,18 g (0,02 mól) p-hidroxi-anilint adunk. A kapott elegyet visszafolyató hűtő segítségével egy éjszakán át forraljuk, majd 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
