173702. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-N-(alfa-hidroxi-omega-aminoalkanoil)-6'n-metil-3'-4'-didezoxi kanamicin B előállítására
13 173702 14 cikloalkil-csoport, így ciklopentil- és ciklohexil-csoport, továbbá egy aralkil-csoport, így fenilalkilcsoport, ahol az alkilrész 1-4 szénatomos, például benzil- és p-nitrobenzil-csoport, egy aril-csoport, így fenil-csoport vagy valamely heterociklusos csoport, így furfuril-csoport. Olyan típusú (IV) általános képletű amino-védett 6 ’N-metil-3 ’,4 ’-didezoxikanamicin B származékok előállítására, ahol a 6’-metilamino-csoport és a 2’-amino-csoport valamely —CO—OR6 általános képletnek megfelelő egyértékű aminovédőcsoporttal blokkolva van, (II) képletű ó’N-metü-S’/l’-didezoxikanamicin B vegyületet 2—3 mólarányú (VII) általános képletű klórformiáttal, vagy egy (VII’) általános képletű p-nitrofenilkarbonáttal, vagy valamely (VII”) általános képletű N-hidroxiszukcinimidészterrel, vagy egy (VII’”) általános képletű azidoformiáttal, vagy valamely (VII””) általános képletű S-4,6-dimetilpirimid-2-U-tiokarbonáttal reagáltatunk, ahol R6 jelentése az előzőekben megadottakkal egyezik, valamely alkalmas oldószerben, így vízben, etanolban, acetonban, dimetoxietánban vagy ezek elegyében semleges vagy bázikus reakciókörülmények között a peptid-szintézisnél ismert módon. Az így kapott reakciótermékek általában a (II) képletű vegyület különböző amino védett származékainak az elegyéből állnak, ennek legnagyobb része olyan aminovédett származék, amelyben a 6’-metilamino-csoport és a 2’-amino-csoport blokkolva van a -CO-OR^ védőcsoporttal, egy kisebb részt olyan aminovédett származék tesz ki, amelyben csak a 6’-metilamino - -csoport van védve, ezenkívül egy kis mennyiségű nem-kívánt aminovédett származék is van jelen, amelyben az 1 -amino-csoport van blokkolva a blokkolt amino-csoportokkal együtt. Abban az esetben, ha a (II) képletű vegyületet a (VII), (VII’), (VII”) vagy (VII’”) acüező szerekkel lényegében mólegyenértéknyi mennyiségben reagáltatjuk, az olyan aminovédett származék aránya, amelyben csupán 6’-metilamino-csoport van védve, növekszik. A legelőnyösebb amino védőcsoportok a terc-butoxikarbonil- és a benziloxikarbonil-csoportok, mivel ezek képesek elsősorban reagálni a 6’-metilamino-csoporttal és adott esetben a (II) képletű ó’N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B 2’-amino-csoportjával és azután könnyen eltávolíthatók a (VI) képletű acilezett származékokból, amelyeket a találmány szerinti eljárás acilezési lépésében kaptunk. így például 2 TV,6 ’N-di-terc-butoxikarbonil-6 N- metil-3’,4’-didezoxikanamicin B, amely egy előnyös kiindulási anyag a találmány szerinti eljárásnál, nagy hozammal állítható elő, ha a 6’N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B piridin-víz-trietanolamin-eleggyel készített oldatát 2—3 mólnyi terc-butoxikarbonÜaziddal reagáltatjuk, miközben az utóbbi vegyületet keverés közben cseppenként adjuk az oldathoz. A reakcióelegyet ezután szobahőmérsékleten éjszakán át keverjük, utána vákuumban szárazra pároljuk, majd a szilárd maradékot oszlopkromatográfiás úton tisztítjuk. Más módszer szerint a 6’N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B-t vizes oldat alakjában 2—3 mólnyi terc-butil-S-4,6-dimetilpirimid-2-ü-tiokarbonáttal, amelyet keverés közben adunk hozzá, reagáltatjuk, a keletkezett elegyet éjszakán át keverjük, utána vákuumban szárazra pároljuk és a szilárd maradékot oszlopkromatográfíásan tisztítjuk. A szilárd maradék oszlopkromatográfiás tisztítását karboxil-csoportokat tartalmazó kationcserélő gyantával, példáid egy metaciklusos savnak divinilbenzollal alkotott kopolimerjével, végezzük, amely „Amberlite” CG 50 néven jól ismert kereskedelmi termék (ammónium-forma, Rohm et Haas cég gyártmánya). Az ily módon előállított szilárd maradék lényegében a kívánt 2’N,6’N-di-terc-butoxikarbonil -6’N-metü-3’,4’-didezoxikanamicin és a óN-mono-terc-butoxikarbonü-ó’N-metü-3’,4’-didezoxikanamicin B vegyületek elegye és közvetlenül felhasználható knndulási anyagként a találmány szerinti acilezési lépésben. Az (V) általános képletű a-hidroxi-co-aminosav, amelyet a találmány szerinti eljárásban acilező szerként használunk, R3 amino védőcsoportja a hagyományos peptid-szintézisnél szokásosan alkalmazott csoport. Előnyös az, ha az (V) képletű acilező vegyületben levő aminovédőcsoport azonos a (IV) képletű kiindulási aminovédett 6’N-metil-3’4’-didezoxikanamicin B származékban levő csoporttal. Az olyan (V) képletű a-hidroxi-cj-aminosav előállítására, amely egyértékű aminovédőcsoporttal van blokkolva, ugyanúgy végezhető, ahogy az aminovédett (IV) képletű 6’N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B származék előállítása. Akkor, ha az R3 és az R4 csoportok együtt egy kétértékű aminovédőcsoportot alkotnak, ez a kétértékű aminovédőcsoport előnyösen egy ftaloil- vagy egy szalicilidin-csoport és általában egy =CHRS általános képletű alkilidin- vagy arilidin-csoport, ahol Rs valamely 1—6 szénatomos alkil-csőport, így metil-, etü-, propü-, izopropil-, butü- vagy pentil-csoport, vagy egy aril-csoport, így fenil-, told-, p-metoxifenil- vagy o-hidroxifenil-csoport. Olyan (V) általános képletű a-hidroxi-w-aminosavat, amelyben az co-amino-csoport egy =CHR5 képletű kétértékű aminovédőcsoporttal van blokkolva, úgy állítunk elő, hogy az co-amino-csőportot alkilidénezzük vagy arilidénezzük, mégpedig oly módon, hogy az (V) képletű a-hidroxi-co-aminosavat lényegében mólegyenértéknyi (VIII) általános képletű aldehiddel reagáltatjuk, ahol Rs jelentése az előzőekben megadott, a Schiff-bázisok előállításánál szokásos módon. Erre a célra az acetaldehid, az ánizsaldehid, a toluolaldehid, a p-nitro-benzaldehid és a szalicilaldehid alkalmas elsősorban. A találmány szerinti eljárásban használt (V) képletű a-hidroxi-oj-aminosav racém-elegyként vagy optikailag aktív alakban, L-izomer és D-izomer formában, alkalmazható. Előnyös mindenesetre, ha az a-hidroxi^y-aminovajsavat, amely olyan (III) képletű vegyület, ahol n értéke 2, és az a-hidroxi-ő -aminovaleriánsavat, amely olyan (III) képletű vegyület, ahol n értéke 3, optikailag aktív L-izomer alakban használjuk, mivel az ezekből leszármaztatott végtermékek jobb baktériumellenes hatással rendelkeznek, mint a D-izomerből származó végtermékek. A találmány szerinti eljárás acilezési lépésében a (IV) képletű aminovédett 6’N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B származékot az (V) általános képletű 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
