173702. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-N-(alfa-hidroxi-omega-aminoalkanoil)-6'n-metil-3'-4'-didezoxi kanamicin B előállítására
5 173702 6 N-(L-izoszeril)-6’ N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B Színtelen kristályos por, amely 162-166°C-on bomlik. 5 [aß4 = +80° (c, 1,02, viz). Elemi analízis C22H44N6O10 képletre: C =47,81%, H =8,03%, N= 15,21%. 10 Ez az anyag egyetlen foltot ad (pozitív a ninhidrin reakcióra) 0,51 Rf-nél a fenti szilikagélen vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat esetén. lN-(L4-amino-2-hidroxibutiril)-6’ N-metil- 15-3’,4’-didezoxikanamicin B Színtelen kristályos por, amely 158-161 °C-on bomlik. MdS = +71° (c, 0,8, víz). 20 Elemi analízis C23H46N6O10 képletre C =48,75%, H = 8,18%, N = 14,83%. Ez az anyag egyetlen foltot ad (pozitív a nin- 25 hidrin reakcióra) 0,38 Rf-nél a fent említett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat során szilikagélen. 1 N-(L-5 -amino-2 -hidroxivaleril)-6 ’ N -met il-3’,4’-didezoxikanamicin B 30 Színtelen kristályos por, amely 152—155°C-on bomlik. [aß4 = +79° (c, 0,71, víz). Elemi analízis C24H48N6Oi0 képletre 35 C =49,64%, H = 8,33%, N= 14,47%. Ez az anyag egyetlen foltot ad (pozitív a ninhidrin reakcióra) 0,39 Rf-nél a fent említett vé- 40 konyrétegkromatográfiás vizsgálat során szilikagélen. A találmány szerinti új vegyületekre az jellemző, hogy nem érzékenyek azokra az előzőekben említett enzimes, inaktiváló reakciókra, amelyek hatástalanítják a kanamicin A-t és a kanamicin B-t. így a találmány szerinti új vegyületek nem érzékenyek sem a 6’-acetiltranszferáz inaktiváló hatására, mivel a találmány szerinti vegyületek 6’-amino-csőportja metilezve van, sem pedig a 2”-nukleotidiltranszferáz és a 3’-foszfotranszferáz inaktiváló hatására, mert a találmány szerinti új vegyületek 1-amino-csoportja a-hidroxi-cc-aminoacil-csoporttal acilezve van, nem érzékenyek továbbá más típusú 3’-foszfotranszferáz inaktiváló hatására sem, mert a 3’- és a 4’-hidroxil-csoportokat, amelyek a kanamicin B vegyületben jelen vannak, a találmány szerinti új vegyületekből eltávolítottuk. A találmány szerinti új vegyületek eszerint nagyon előnyösek, mivel nemcsak olyan, különböző fajta Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok ellen mutatnak kiváló baktériumellenes hatást, amelyek érzékenyek a kanamicinekre, hanem e baktériumok kanamicin-rezisztens törzsei ellen is, különösen az Escherichia coli és a Pseudomonas aeruginosa törzsek ellen. Meghatároztuk az lN-(DL-izoszeril)-6’ N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B (rövidítve: DL-IS—MDKB), az lN-(L-izoszeril)-6’-N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B (rövidítve: L-1S-MDKB), az 1 N-(L4-amino-3-hidroxibutiril)-6’ N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B (rövidítve AHB-MDKB), az 1 N-(L-5-amino-2-hidroxivaleril)-6’ N-metil-3’,4’-didezoxikanamicin B (rövidítve: AHV-MDBK) vegyületek legkisebb gátlókoncentrációját (mcg/ml) különböző organizmusok ellen sorozathígítással 37°Con agar tápközeg használatával, az értékelést 18 órás inkubáció után végeztük, összehasonlítás céljára a 3 781 268 számú Amerikai Egyesült Â1- lamok-beli szabadalmi leírásból ismert lN-(L4-amino-2-hidroxibutiril)-kanamicin A (rövidítve: AHB—KMA) és lN-(L4-amino-2-hidroxibutiril)-kanamicin B (rövidítve: AHB-KMB) vegyületek legkisebb gátlókoncentrációját is meghatároztuk ugyanezzel a módszerrel. A felsorolt vegyületek baktériumellenes spektrumait az 1. táblázat mutatja. 1. táblázat Legkisebb gátlókoncentráció (mcg/ml) Kísérlet organizmus DL—IS—MDKB L—IS-MDKB AHB-MDKB AHV-MDKB AHB-KMA Staphylococcus aureus <0,20 <020 <020 <020 < 0,20 Staphylococcus aureus FDA 209P 0,78 <020 0,78 0,39 0,39 Staphylococcus aureus Terajima <0,20 <020 <020 <020 <0,20 Sarcina lutea PCI 1001 6,25 3,13 3,13 12,5 3,13 Bacillus anthracis <020 <020 <020 <020 <0,20 3
