173563. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-nitroprazol-származékok előállítására
19 173563 20 A vizsgálatok egy másik sorozatában a találmány szerinti jellemző vegyületek bakteriosztatikus aktivitását a vizeletben vizsgáltuk és patkányoknak, szájon át való adagolás után az adagolt vizsgált vegyületnek a vizeletben való kiválasztódását 5 százalékosan határoztuk meg. A párhuzamos összehasonlító vizsgálatokban összehasonlító vegyületként ismét a „Furadantin ”-t (nitrofurantoin) használtuk. A kapott eredményeket a II. táblázat tartalmazza, amelyben a „maximális hígítás” 10 fejrésszel ellátott oszlop tartalmazza azt a maximális mennyiséget, amelyre a vizelet-minta hígítható és még bakteriosztatikus aktivitást mutat a vizsgált baktérium - jelen esetben Escherichia Coli (106) — ellen. A vizsgált vegyületekből 40 és 15 20 mg/kg mennyiséget adagoltunk a patkányok testsúlyának kg-jára számítva és 75 ml vizeletet vizsgáltunk 22 órával a vizsgált vegyület orális adagolása után. Valamennyi vizsgálati eredmény azoknak az értékeknek az átlagán alapul, amelye- 20 két 9 patkánnyal végzett vizsgálat alapján kaptunk, ahol két vagy több érték szerepel, két vagy több meghatározást végeztünk. A megfelelő értékek a „Furadantin” összehasonlító vegyület et illetően a II. táblázat alján vannak. Láttató, hogy a talál- 25 mány szerinti vegyületek lényegesen nagyobb mennyiségre voltak hígíthat ók, mint a Furadantin, és még mindig mutattak bakteriosztatikus aktivitást, tehát a találmány szerinti legtöbb vegyület lényegesen nagyobb mennyiségben választódott ki a 30 vizeletben, mint a Furadantin. II. táblázat Orális adagolás után patkányok vizeletében mért bakteriosztatikus aktivitás Vizsgált vegyület Maximális hígítás 40 mg/kg 20 mg/kg 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil-akrilsavamid 1 :1707 1 :1120 1 :2880 1 :1216 3-(l -etil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsavamid 1 : 427 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil)-N -hidroxi-akrilsavamid 1 :960 1 : 768 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-N-(/Miidroxietil)-amid 1 :235 1 : 111 1 : 168 3-(l ,5-dimetil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsavamid 1 :296 1 : 208 1 : 146 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsav-N - -(6-metil-2-piridil)-amid 1 : 43 1 : 39 65 II. táblázat folytatása Vizsgált vegyület Maximális hígítás 40 mg/kg 20 mg/kg 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-N-(pirrolidinometil)-amid 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsav-N-metilamid 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-N-allilamid 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil-akrilsav-N - -ciklopropilamid 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-piperidid 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-N-izopropilamid 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsav-N - -cianometilamid 3-(l -metil-3-nitro-4--pirazolil)-akrilsav-N-piperidinometilamid 3-(l -metil-3-nitro-4- -pirazolil)-akrilsav-N<N’,N’-dimetilkarbamoil)-amid Furadantin 1 : 875 1 : 616 1 : 152 1 : 84 1 :120 1 : 359 1 : 260 1 : 270 1 : 348 1 : 94 1 : 19 1 : 21 A vizsgálatok további sorozatában a találmány szerinti vegyületek in vivo hatásosságát egereken határoztuk meg, az alábbi módszer szerint. Nőstény egereket (beltenyésztés, NMRl törzs), melyeknek súlya 19-21 g, megfertőztünk 0,5 ml hígított 18 órás Escherichia Coli (108) húsleves kultúrával, intraperitoneális injekcióval. A fertőzés intenzitását úgy állítottuk be, hogy a következő első két nap alatt az állatok legalább 95%-a elpusztult kezelés nélkül. A fertőzés kontroll vizsgálatához 40 állatot használtunk. Kezelés: A kezelést közvetlenül a fertőzés után folytattuk le, egyetlen szubkután dózis formájában. Az egyetlen dózis térfogata 0,5 nú-t tett ki (a vegyület desztillált vízben vagy 5%-os metilcellulóz nyákban volt oldva). Valamennyi vizsgálatnál és valamennyi dózisnál 10 állatot használtunk. 10
