173535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(alfa-amino-adipoil)-amino-3-metil-3-cefém-4-karbonsav fermentációs úton történő előállítására
13 173535 14 Tenyészetek malátakivonat-agaron vagy Leonian-élesztőkivonat-agaron, gyenge szóródás vagy nincs szóródás, fehértől a halvány-barnáig terjedő szín, amely később barnává, majd sötétbarnává válik közben spórafészket alkot. Hátoldal először sárgástól sárgás-barnáig, később azonban sötét barnától csaknem feketéig terjed. Oldható pigment, sárga, később olívbarna. Gombasejtek átlátszóak, vékony falú, vékony válaszfalas elágazó, 1 -2,5 p átmérővel. Spórafészek elzártan termékenyülő, sötétbarna, száradás közben lassan feketedik, bizonyos területeken termel alul levő légmicéliumot, más esetekben sűrű, felületi réteget hoz létre az agar felületén kis légmicéliummal, gömb alakú, csupasz, kivéve ha lég-gombasejtekhez kapcsolódik, 140—350 p-os átmérő. Gombatömlők széles, szorosan összetömörült fürtökben meghatározott irány nélkül, kis gömbök, 6.5— 8jO x 5,5—6,5 p, nyolcspórás, vékonyfalú, elenyésző. Meddő, gyér, rostos, fürtös, válaszfalas, 2-4 p átmérő, gombatömlővel kevert. Tömlőspórák korong alakúak, 2.5— 3,0 x 2,5—3,0 x 2,0—2,5 p gömb alakú tömeg, apró tüskék, nagyon halvány sárga. Fonalspórák gömb alaktól a kis gömböcske formáig változnak, átlátszóak, simák, 8-10 p-os fallal, gyengén hajló formában, többnyire a végeken, elszórva a gombasejteken, a sejtképződményben elmerülve, nem bőséges. (I) Arachnomyces minimus CBS-324.70 és K-154 A CBS-324.70 törzs ismert és szerepel a CBS-List of Cultures 28. kiadás, 1972. irodalmi helyen. A K-154 törzs hasonló mikrobiológiai jellemzőkkel rendelkezik, eltérés van azonban a DACPC, DC PC és CPC termelésben. Ezek a törzsek az Eurotiales—Eurotiaceae-Arachnomyces egységhez tartoznak és a következő tulajdonságokkal rendelkeznek. Tenyészetek Weitzman és Silva-Hutner-táptalajon elérnek 2,5 cm átmérőt 2 hónap alatt szobahőmérsékleten, nemez-szerű, zöldes-sárga, ibolyás-barna pigmentet termel, amely a táptalajba diffundál, hátoldal barna, pettyes. Micéüum átlátszó, vékonyfalú, kissé elágazó, számos ampulla alakkal rendelkező kiöblösödéssel, 7—11 p-os átmérőjű gömb alakú sejteket termel a gombatömlők szomszédságában és a gombatömlőkön, egyes esetekben pedig bárhol. A gombatömlők kis gömböcskétől a gömb alakig terjednek, visszavert fénynél vörösbarna színűek, majdnem átlátszatlanok, ha érettek, a bőséges micéliumösszefonódás következtében bolyhossak, ez a bolyhosság meg éréskor eltűnik, pórus nélküliek, számos hosszú hajszerű nyúlványt hordanak, amelyek 100—315 p átmérővel rendelkeznek, égéskor szabálytalanul felnyíljak. Gombatömlő nyúlványok 2,5—5,5 p szélesek, 3 mm hosszúak vagy ennél hosszabbak. Gombatömlők kis gömböcskétől a gömb alakig terjednek, nem nyelesek, elenyészők, nyolc-spórásak, 5,5—8,5 p átmérőjűek. Tömlőspórák laposak, világossárgás-barnák áteső fényben, világos piros-barnától krétaszínig terjedő színűek, tömegben simák, 2,8-3,5 x 1,5-2,0 p. Konídium-szakasz száma egy. (J) Spiroidium fuscum IFO-5479 és K-461 Az IFO-5479 törzs ismert és szerepel az IFO-List of Cultures, ötödik kiadás, 1972. irodalmi helyen. A K-461 törzs hasonló mikrobiológiai jellemzőkkel rendelkezik, eltérés van azonban a DACPC, DCPC és CPC termelésben. Ezek a törzsek Fungi Imperfecti-Moniliales -Moniliaceae-Sporoidium egységhez tartoznak és a következő tulajdonságokkal rendelkeznek. Növekedés szegényes vagy mérsékelt kukoricaliszt-agaron vagy Czapek-agaron, és jó maláta■agaron vagy glükóz-forrázatlan-agaron. A tenyészetek először fehérek, fokozatosan zöldes-sárga árnyalatúvá válnak, végül barnává lesznek, gombafonalak nagyon finomak, 1,5-2 p vastagok, kissé elkülönültek, esetenként összegomolyodnak. Spóraképző gombafonalak elágaznak, szabálytalan spirálokkal rendelkeznek, válaszfalak kialakítása közben osztódnak és fokozatosan fonalspórákat alkotnak. A fonalspórák négyszögletesek, hosszúkásak vagy henger alakúak, 2-3 p-osak, gyakran tartalmaznak olajcseppet, ha csíráznak, gyakran megduzzadnak és csíratömlőt képeznek. Szaporítószervek nem képződnek a táptalajokon. A találmány szerinti eljárás során használt mikroorganizmusok tenyésztésénél alkalmazott táptalaj olyan szénforrásokat és nitrogénforrásokat tartalmaz, amelyeket a mikroorganizmusok asszimilálni tudnak. Szénforrásként például glükóz, szacharóz, maltóz, keményítő, oldható keményítő, hulladék-melasz, glicerin, különböző szerves savak, így ecetsav, fumársav, benzoesav és hasonlók, különböző alkoholok, így etanol, butanol és hasonlók, n-parafflnok, különféle olajok és zsírok használhatók. Nitrogénfonásként különböző szerves és szervetlen nitrogénforrások, így peptonok, szójababliszt, húskivonat, gyapotmagliszt, szárított élesztő, élesztőkivonat, kukoricalekvár, karbamid, ammóniumsó [például ammónium-klorid, ammónium-szulfát, ammónium-nitrát, ammóniumfoszfát] nitrátok, (például nátrium-nitrát, kálium-nitrát és hasonlók alkalmazhatók. Ezenkívül különböző fémsók, így szulfátok, nitrátok, Idoridok, karbonátok, foszfátok és más fémsók, például kálium, magnézium, kálcium, nátrium és hasonló fémek sói lehetnek a táptalajokban. Amennyiben szükséges, lehetőség van arra is, hogy olyan anyagokat adjunk a táptalajokhoz, amelyek serkentik a használt mikroorganizmus növekedését és a DACPC-termelő képességét. Ilyen anyagok a mcvionin, cisztein, cisztin, tioszulfátok, metiloleát, sertészsír, külön5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7