173535. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7-(alfa-amino-adipoil)-amino-3-metil-3-cefém-4-karbonsav fermentációs úton történő előállítására
21 173535 22 hosszat inkubáljuk, mimellett 540 pg/'ml DACPC telmozódik fel a táptalajban. Melléktermékként CPC és DCPC is termelődik. A 3. példában ismertetett kezelés után 2 liter táptalaj 0,20 g kristályos DACPC-nátriumsót eredményez. (Tisztaság: >99%) 7. példa (a) 30 ml olyan táptalajt, amely 5% glükózt, i% gyapot mag-lisztet, 0,5% nyers szójabab-lisztet, 0,5% élesztőkivonatot, 0,5% peptont és 1% kálcium-karbonátot tartalmaz, 200 ml-es rázólombikba töltünk. Sterilizálás után beoltjuk a Paecilomyces carneus C-2237 (IFO-9729) törzs spóráival és 28 C°-on 72 óra hosszat inkubáljuk. Ezután a tenyészetet 1.5 ml-ként egyenlő mennyiségekben 30 ml-es táptalajokba visszük át. Minden egyes táptalaj 200 ml-es rázólombikban 4% gyapotmag-lisztet, 1% kálcium-karbonátot és különböző szénforrások valamelyikét tartalmazza. E szénforrásokat az 5. táblázatban soroljuk fel. (b) 30 ml olyan táptalajt, amely 5% glükózt, 1% gyapotmag-lisztet, 0,5% nyers szójabab-lisztet, 0,5 % áesztőki vonatot, 0,5% peptont és 1% 5. t kálcium-karbonátot tartalmaz, egy 200 ml-es rázólombikba töltünk. Sterilizálás után beoltjuk a Paecilomyces persicinus C-3009 (IFO-9731) törzs spóráival és 28 °Con 72 óra hosszat inkubáljuk. 5 Ezután a tenyészetet 1,5 ml-ként egyenlő mennyiségekben 30 ml-es rázólombikba visszük át. E táptalajok mindegyike 200 ml-es rázólombikban 4% gyapotmag-lisztet, 1% kálcium-karbonátot és a 6. táblázatban felsorolt szénforrások közül egyet 10 tartalmaz a táblázatban megadott mennyiségben. Az (a) és (b) esetben, ha a szénforrás ecetsav, egy 40%-os ecetsavas oldatot (amelyet előzőleg részben semlegesítettünk vizes ammóniával és 15 sterilizáltunk) a 72., a 96. és 120. órában a tenyésztés kezdete után 0,75 térfogatrész mennyiségben hozzáauunk a tenyészethez. Amennyiben a szénforrás alkohol, etanolt (99,9%) adunk a tenyészethez a tenyésztés 72., 96. és 120. 20 órájában, 0,4 térfogatrész mennyiségben. A tenyésztést 24 °C-on 168 óra hosszat végezzük. Fermentáció után minden egyes fermentációs táptalajt kiveszünk és centrifugálunk, a felülúszó DACPC, DCPC és CPC tartalmát megállapítjuk. A 25 kapott eredményeket az 5. és a 6. táblázatokban adjuk meg. Paecilomyces carneus C-2237 A felhalmozódott cefalosporin antibiotikumok mennyisége Szénforrás Kezdeti konc. DACPC DCPC CPC glükóz 8% 160 pg/ml 35 pg/ml 120 pg/ml szacharóz 8% 140 jug/ml 20 pg/ml 120 pg/ml oldható keményítő 8% 100 pg/ml 10pg/ml 80 pg/ml glicerin 5% 85 pg/ml 5pg/ml 60pg/ml szójabab-olaj 5% 15 pg/ml nem kimutatható 10 pg/ml n-paraffinok 8% 120pg/ml 25 pg/ml 110 pg/ml ecetsav 2% 25 pg/ml nem kimutatható 5 pg/ml 6. Táblázat Paecilomyces persicinus C-3009 Szénfonás A felhalmozódott cefalosporin antibiotikumok mennyisége KCZQcll KOnC. DACPC DCPC CPC szacharóz 8% 90 pg/ml 10 pg/ml 110 pg/ml glükóz 8% 50 fjglnd 15 pg/ml 30/ug/ml ecetsáv 2% 10pg/ml nem kimutatható 15 pg/ml etancl 2% 15 (Jg/ml nem kimutatható 5 fjg/ml II
