173366. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szteroidok mikrobiológiai oxidálására
19 173366 20 Kísérlet Adalék Koncent 1,10-feîQtërmëlés-* ráció, s% nan trolin ADD DHT mg mg mg 6. a-monopalmitin + szezámliszt 7. a-monopalmifin + földimogyoróliszt 8. a-monopalmitin * gyapotmagliszt 9. a-monopalmitin + szójababliszt 10. pálmaolaj + repcemagliszt 11. pálmaolaj + repcemagliszt 12. pálmaolaj + repcemagliszt 13. pálmaolaj + repcemagliszt 14. pálmaolaj + repcemagliszt 15. pálmaolaj + repcemagliszt 16. pálmaolaj + repcemagliszt 17. pálmaolaj + repcemagliszt 18. pálmaolaj+ repcemagliszt 19. pálmaolaj + repcemagliszt 20. pálmaolaj + repcemagliszt 21. szalonna + szezámliszt 22. szalonna + gyapotmagliszt 12. példa A következő összetételű táptalajt állítjuk elő: 2,0% kukoricalekvár, 2,0% szőlőcukor, 0,4% nátriumglutamát, 0,2% aszparagin, 0,2% káliumdihidrogénfoszfát, zsír és olajos magliszt a X. táblázatban megadott mennyiségben és a többi víz. A táptalaj pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal X. táblázat 1,0+ 2,0 1,3 23 21 1,0+ 2,0 1,3 21 17 1,0+ 2,0 1,3 19 21 1,0+ 2,0 1,3 19 23 0,25 + 2,0 1,3 7 7 0,3 + 2,0 1,3 13 10 0,5 + 2,0 1,3 16 13 1,0+0,3 1,3 18 10 .1,0+ 0,6 1,3 18 14 1,0+1,0 1,3 20 20 1,0+ 2,0 1,3 22 24 1,0+ 5,0 1,3 22 26 1,0+ 10,0 1,6 21 20 1,0+15,0 1,6 18 17 1,0+20,0 1,6 15 12 1,0+ 2,0 1,3 20 28 10,0+2,0 1,3 22 23 7,0-re állítjuk be. 50 ml táptalajt 500 ml-es rázólombikba töltünk, és 20 percig 120°-on sterilizáljuk. Ezután a táptalajt beoltjuk, 2 ml, az 5. példában kapott oltótenyészettel. A beoltott táptalajt 35e-on az 1. 30 példa szerint rázógépen inkubáljuk. Az inkubáció 40. órájában 150 mg koleszterint és a 48. órában 4,2 mg 8-hidroxikinolint adunk a tenyészethez. A 8-hidroxikinolin hozzáadása után 60 órával a fermentációt megszakítjuk és a keletkezett ADD-t az 1. példa sze-35 rint izoláljuk. Az ADD kitermelését a X. táblázatban adjuk meg. Kísérlet Zsír és olajos magliszt Koncentráció s% ADD kitermelés mg 1. adalék nélkül 0 12 2. lenolaj + lenmagliszt 0,5 + 2,0 26 3. repceolaj + repcemagliszt 0,5 + 2,0 33 4. gyapotmagolaj + gyapotmagliszt 0,5 + 2,0 27 5. gyapotmagolaj + szezámliszt 0,5 + 2,0 32 6. gyapotmagolaj + földimogyoróliszt 0,5 + 2,0 24 7. gyapotmagolaj + szójababliszt 0,5 + 2,0 37 8. szójababolaj + szójababliszt 0,5 + 1,0 22 9. szójababolaj + szójababliszt 0,5 + 2,0 35 10. szójababolaj + szójababliszt 0,5 + 5,0 38 11. szójababolaj + szójababliszt 0,5 + 8,0 26 12. szójababolaj + szójababliszt 0,5 +10,0 19 13. pélcL 55 A következő összetételű táptalajt állítjuk elő: 2,0% kukoricalekvár, 2,0% szőlőcukor, 0,4% nátriumglutamát, 60 0,2% aszparagin, 0,2% káliumdihidrogénfoszfát, zsír és olajos magolaj a XI. táblázatban megadott mennyiségben és a maradék víz. A táptalaj pH-értékét nátriumhidroxid-oldattal 65 7,0-re állítjuk be. 50 ml táptalajt 500 ml-es lombikba teszünk és 20 percig 120°-on sterilizáljuk. Lehűlés után a táptalajt 2 ml, az 5. példa szerint előállított oltótenyészettel beoltjuk. A mikroorganizmus Protaminobacter alboflavus (ATCC 8458j. Az inkubálást 50 óra hosszat 30°-on rázógépen az 1. példa szerint végezzük. Az inkubálás 25. órájában 200 mg koleszterint és a 33. órában 6,2 mg 2,2’-dipiridilt adunk a tenyészethez. A 95. órában a fermentlevet az 1. példa szerint feldolgozzuk és a kapott ADD-t elkülönítjük. Az eredményeket a XI. táblázatban közöljük. 10
