173298. lajstromszámú szabadalom • Eljárás úl 2,6-antrakinolinén-amidinek előállítására
3 173298 4 formamidban, ecetsav jelenlétében, a visszafolyatás hőmérsékletén, 1—12 órán keresztül. Az oldószert az amin 1 móljára számítva körülbelül 1 liter mennyiségben, míg az ecetsavat 2 mólnyi mennyiségben alkalmazzuk, ugyancsak az amin 1 mólnyi mennyiségét használva vonatkoztatási alapként. A reakcióelegyhez étert adva a termék kiválik, melyet ezután összegyűjtünk és az A) eljárásban ismertetett módon átkristályosítunk. C) 72 rész 2,6-diaminoantrakinont elkeverünk 300 rész trietilortosavban és 250 rész ecetsavanhidridet adunk az elegyhez. Az így kapott elegyet 1—8 órán át visszafolyató hűtővel felszerelt edényben forraljuk, hűtjük és a szilárd anyagot összegyűjtjük, mossuk és szárítjuk. A tisztítást úgy végezzük, hogy a nyers terméket feloldjuk 1000 rész kloroformban, szűrjük és a szűrletet koncentráljuk. A termék tovább is tisztítható oly módon, hogy valamely oldószerből, például dimetilformamidból átkristályosítjuk. 8 rész bisz-amino-étert elkeverünk 45 rész alkalmas aminban. Az amino-éter 1 résznyi mennyiségére számítva egy ekvivalensnyi mennyiségű jégecetet adagolunk, és az elegyet olajfürdőn, 100—160 °C-on, 8—124 órán át melegítjük. Alacsony olvadáspontú aminok esetén ajánlatos a melegítést bombában végezni. Ezután lehűtjük a reakcióelegyet. Összegyűjtjük a kivált terméket, majd valamely oldószerből, így metanolból, etanolból, metil-celloszolvból (celloszolv=etilénglikol-monoetiléter) vagy dimetilformamidból átkristályosítjuk. Ha a termék nem kristályosodik, az illó anyagokat vákuumban eltávolítjuk és a maradékot feloldjuk metanolban. Lehűtés hatására a termék kikristályosodik és alkalmas oldószerből a fenti módon átkristályosítható. D) N,N'-(2,5-antrakinolinén)di-formimidátot legalább 2 mólekvivalensnyi primer vagy szekunder aminnal egyesítünk és 1—18 óráig 130—200 °C-on tartunk. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson megszabadítjuk az illó anyagoktól és alkalmas oldószerből végzett átkristályosítással állítjuk elő a tiszta terméket. E) 2,6-Diaminoantrakinont 2 vagy több mólekvivalensnyi dialkilamid-dialkilacetáttal egyesítünk oldószer jelenléte nélkül, vagy a megfelelő amidot használva oldószerként. Az elegyet 130—150 °C-ra melegítjük és 2—66 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson szabadítjuk meg az illékony szennyezésektől. A maradékot hexánnal mossuk és a kívánt terméket alkalmas oldószerből végzett átkristályosítással kapjuk. F) 2,6-Diamínoantrakinont 2 vagy több mólekvivalensnyi amiddal egyesítünk. Az elegyhez legalább 2 ekvivalens arilszulfonilhalogenidet adunk. Az elegyet 2—3 órán át 100 °C alatti hőmérsékleten tartjuk. Ezután alkoholt adunk a reakcióelegyhez, az oldhatatlan sót összegyűjtjük és vizes lúgoldattal kezeljük, hogy a szabad bázist kapjuk. Alkalmas oldószerből végzett átkristályosítás után a tisztított terméket kapjuk. 5 A találmány szerinti vegyületek hatásosak melegvérű állatok amőbás eredetű vakbél- és máj-fertőzéses megbetegedéseinek kezelésében. A vegyületek aktivitásának vizsgálatát a következő két módszerrel végeztük : 10 Mikroorganizmus Mindkét vizsgálat során a National Institute of 15 Health 200 u-os Entamoeba histolytica törzsével dolgoztunk. A törzset és egy nem azonosított fekális flórát Cleveland-Collier közegben 37 °C-on tenyésztettünk. Ez a táptalaj egy májinfúziós agar-bázisból áll, melyre 1 : 6 arányú lószérum-só elegyet rétegzünk, melyhez né- 20 hány milligramm steril rizsport adunk. Az amőbákat hetenként kétszer vittük át friss táptalajba. Vakbél fertőzések nőstény Wistar albínó patkányok- 25 nál 0,25 ml térfogatú, számos amőbát tartalmazó felülrétegző folyadékot injektálunk elaltatott, elválasztott fiatal patkányok vakbelébe egy hasműtét során. A ke- 30 zelést a befecskendezést követő napon kezdjük meg. A vegyületeket feloldjuk vagy elszuszpendáljuk 0,2% vizes agarban és napi egy alkalommal, gyomorszonda segítségével bejuttatjuk a patkányok szervezetébe 5 egymást követő napon keresztül. Az amőbák befecskende- 35 zését követő hatodik napon elpusztítjuk a patkányokat és az egyes patkány vakbelének faláról vett kaparékot összekeverjük 0,85% fiziológiás sóoldattal és mikroszkóp alatt megvizsgáljuk, hogy találhatók-e benne amőbák. A patkányt akkor tekintjük meggyógyultnak, ha 40 amőbákat nem találunk. A gyógyult egyedek számát elosztva a kezelt egyedek számával, megkapjuk az úgynevezett gyógyulási vagy tisztulási hányadot, majd a kapott értéket korrigáljuk a kezeletlen, de amőbákkal megfertőzött példányoknál fellépő, nem specifikus gyó- 45 gyulások számával. Az aktív dózis fogalmát úgy határozzuk meg, hogy az a legkisebb dózis, amely a kezelt patkányok több mint 50%,-át meggyógyítja, illetve megtisztítja. A találmány szerinti tipikus vegyületekkel kapott eredményeket az egyéb, ismert vegyületek haszná- 50 lata esetén kapott eredményekkel együtt a következő táblázatban adjuk meg. Táblázat Vegyületek Vakbél fertőzés Legkisebb aktiv dózis [mg/kg/nap] Máj fertőzés Legkisebb aktív dóz [mg/kg/nap] N',N"-(2,6-antrakinonilén)-bisz-N,N-dimetil-formamidin 20 10 N',N"'-(2,6-antrakinoniíén)-bisz-N,N-dietil-acetamidin 10 2,5 N',N"'-(2,6-antrakinonilén)-bisz-N-oktil-N-metil-formamidin 50 — N',N"'-(2,6-antrakinonilén)-bisz-N,N-diizopropil-formamidin 20 100 2,6-bisz(piperidinometilénamino)-antrakinon 20 100 2,6-bisz[(l-piperidinopropilidén)-amino]-antrakinon 50 — 2,6-bisz[(l-piperidinoetilidén)-amino]-antrakinon 50 — 2,6-bisz[/l-(4-metilpiperidino)-etilidén/-amino]-antrakinon 10 — 2
