172459. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-3-cefém-3-ol-4-karbonsav-származékok előállítására
35 172459 36 30ml metilén-kloridban oldott 0,514 g 3-meto x i- 7/3-fenil-acetil-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert lehűtünk -10°-ra, és hozzáadunk 0,8 ml abszolút piridint, és 8%-os metilén-kloridos foszfor-pentaklorid-oldatot. A reakcióelegyet 1 óráig -10 és 5° között keverjük, majd lehűtjük -30°-ra, és hozzáadunk 5 ml metanolt. 1 óráig keverjük -10 és -5° között, 1 óráig 0°-on és 1 óráig szobahőmérsékleten. Hozzáadunk 20 ml 0,5 M vizes kálium-dihidrogén-foszfát-oldatot, pH 2,4-en az elegyet 30 percig keverjük, felhígítjuk metilén-kloriddal, a vizes fázist leválasztjuk, és metilén-kloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot dietil-éterrel digeráljuk, és 16 óráig 0°-on állni hagyjuk, a csapadékot leszűrjük, dietil-éterrel mossuk és szárítjuk. Világos homokszínű por formájában 70-amino-3- -metoxi-3-cefem-4-karbo nsav-difenil-me til-észtert kapunk, Rétegkromatogram (szilikagél, előhívás jódgőzzel): Rf~0,17 (rendszer: ecetsav-etil-észter), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 258 mu (e = 5250) és 264 mju (e = 5300), és Xván = 290 mp (e = 5200), infravörös abszorpciós spektrum (dioxánban): jellemző sávok 2,87 (széles), 5,62, 5,85, és 6,26p-nál. Kitermelés: 0,294 g. 2. példa 3. példa a) 13 ml metilén-kloridban oldott 0,263 g 7/3-(5- - b e n z o i 1 - amino-5-difenil-metoxi-karbonil-valeril-amino)-3-metoxi -3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert lehűtünk — 10°-ra, és hozzáadunk 0,132 ml piridint és 3,52 ml 8%-os metilén-kloridos foszfor-pentaklorid-oldatot. 1 óráig keverjük —10°-on, majd lehűtjük -30°-ra, gyorsan hozzáadunk 2,2 ml, —30°-ra lehűtött metanolt, és —10, valamint -5°-on 30 percig keverjük. Ezután a reakcióelegyhez hozzáadunk 6,5 ml 0,5 M vizes kálium-dihidrogén-foszfát-oldatot, 5 percig szobahőmérsékleten keverjük, és a fázisokat szétválasztjuk. A vizes fázist metilén-kloriddal mossuk, az egyesített metilén-klorid-fázisokat tömény vizes nátrium-klorid-oldatta] mossuk, nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot metanolban oldjuk, és az oldathoz enyhe zavarosság fellépéséig dietil-étert adunk. Amorf csapadék alakjában 7j3-amino-3-metoxi-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észtert kapunk rétegkromatogram (szilikagél): Rf - 0,17 (rendszer: ecetsav-etil-észter, előhívás jódgőzzel), ultraibolya abszorpciós spektrum (95%-os vizes etanolban): Xmax = 258 mp (e = 5700), infravörös abszorpciós spektrum (dioxánban): jellemző sávok 2,87, 5,62, 5,85 és 6,26 p-nál. Kitermelés: 0,0541 g. A kiindulási anyag a következőképpen állítható elő: b) 1500 ml 10-%-os vizes díkáliunvhidrogén-foszfátban oldott 50 g cefalosporin C nátriumsót 1200 ml acetonnal felhígítunk, és 0°-on 21 g benzoil-kloridot adunk hozzá. 30 percig 0°-on és 45 percig 20°-on keverjük, miközben a pH-t 50%-os vizes trikáliumfoszfát-oldat hozzáadása által állandóan 8,5 értéken tartjuk. Csökkentett nyomáson körülbelül fele térfogatra bepároljuk, ecetsav-etil-észterrel mossuk, pH-ját 20%-os vizes foszforsavval 2,0-re állítjuk be, és ecetsav-etil-észterrel extraháljuk. A szerves fázist megszárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk, az acetonból átkristályosított maradék N-benzoil-cefalosporin C, olvadáspont 117-119°, rétegkromatogram, (szilikagél): Rf = 0,37 (rendszer: n-butanol/ecetsav/víz 75 : 7,5 : 21) és Rf = 0,08 (rendszer: ecetsav-etil-észter/piridin/ecetsav/víz 62 : 21/6 : 11). c) 85 ml 0,5 ,mólos vizes dikálíum-hidrogén-foszfát-oldatban oldott 4,7 g N-benzoil-cefalosporin- C-t és 9 ml dimetil-formamidot 4,7 g alumínium-amalgámmal együtt 45 percig pH 6,0-nál és 45°-on keverjük, miközben a pH-t 20%-os vizes foszforsavoldat hozzáadása által állandó értéken tartjuk. Hozzáadunk 100 ml jeget, rárétegezűnk hideg ecetsav-etil-észtert, és tömény foszforsavval a pH-t 2,0-ra állítjuk be. Az elegyet nátrium-kloriddal telítjük, a szerves fázist leválasztjuk, és a vizes fázist kétszer átmossuk ecetsav-etil-észterrel. A telített vizes nátrium-klorid-oldattal mosott és nátrium-szulfát felett szárított, egyesített szerves kivonatok csökkentett nyomáson bepárolva csapadékot adnak, mely ecetsav-etil-észterrel kikristályosítható. Lassan felhígítjuk 15 ml ecetsav-etilészter-hexán 2 : 3 arányú eleggyel, 2 óráig —5°-on állni hagyjuk, szűrjük és ecetsav-etil-észter-dietil-éter 1 :4 arányú elegyből kikristályosítva 7(3-(5-benzoil- a m i n o - 5 -karboxi-valeril-amino)-3-me tilén-cefam-4a-karbonsavat kapunk. Olvadáspont 82—89° (bomlással), rétegkromatogram (szilikagél): Rf = 0,53 (rendszer: n-butanol-ecetsav-víz 75:7,5:21), és Rf = 0,08 (rendszer: ecetsav-etil-észter-piridin-ecetsav-víz 62 : 21 : 6 : 11). A fent használt alumínium-amalgámot a következőképpen állíthatjuk elő: 3,3 g alumíniumdara és 100 ml 50%-os vizes nátrium-hidroxid-oldat elegyét 30 másodpercig rázzuk, és a felülúszó folyadékot dekantálva 3 x 300 ml vízzel mossuk. A maradékot 3 percig 130 ml 0,3%-os higany(lI)-klorid-oldattal kezeljük, és 3 x 300 ml vízzel mossuk. Az egész kezelést megismételjük, és az alumínium-amalgámot végül háromszor mossuk tetrahidrofuránnal. A terméket mintegy 15 ml ecetsav-etil-észterrel visszük át a reakcióedénybe. d) 25 ml dioxánban oldott 2,3 g 7/3-(5-benzoil- a mi n o - 5 - karboxi-valeril-amino)-3-metilén-cefam-4a-karbonsavhoz 10 perc alatt cseppenként hozzáadunk 10 ml n-pentánban oldott 2,5 g difenil-diazo-metánt. 30 percig szobahőmérsékleten keverjük, a feles difenil-diazo-metánt néhány csepp ecetsavval (jégecet) elbontjuk, és az oldatot csökkentett nyomás alatt bepároljuk. A maradékot 80 g szilikagélen kromatografáljuk, a 70-(5-benzoil-amino-5-dife n i 1 -me toxi-karbonil-valeril-amino)-3-metüén-cefam-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 18
