172459. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 7béta-amino-3-cefém-3-ol-4-karbonsav-származékok előállítására
33 172459 34 dium-jodidot, és szobahőmérsékleten nitrogénatmoszférában 17 óráig állni hagyjuk. A reakcióelegyből az oldószert forgó vákuumbepárlóban távolítjuk el. A maradékot felvesszük metilén-kloriddal, és 50 g szilikagélt tartalmazó oszlopon (10% desztillált vizet hozzáadva) átszűrjük, átmossuk, 4x100 ml metilén-kloriddal. Az eluátumot kis térfogatra bepároljuk, és szilikagéloszlopon (90 g 10% desztillált víz hozzáadásával dezaktiválva) kromatografáljuk. 900 ml össztérfogatú 3 :7 arányú toluol-metilén-klorid eleggyel eluáljuk az apoláros szennyezéseket. A 3-jód-metil-7í3-fenil-acetil-amino-3-cefem-4- -karbonsav-difenil-metil-észtert 2 x 200 ml metilén-kloriddal eluáljuk, a rétegkromatográfíásan egységes frakciókat benzolból liofrlezzük, infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok, 3,00, 5,62, 5,82, 5,95, 6,70, 7,32 és 8,16p-nál. A fent használt jódozóreagenst a következőképpen állíthatjuk elő: Mágneses keverő vei, visszacsepegő hűtővel és nitrogénpalackkal felszerelt 250 ml-es gömblombikba 42 g frissen desztillált N,N’-diciklohexil-karbodiimidet nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten feloldunk 90 ml metil-jodidban, és a színtelen reakcióelegyet 72 óráig 70°-os vízfürdőn keverjük. A reakcióidő letelte után a vörösbarna oldatból a feles metil-jodidot csökkentett nyomáson lédesztilláljuk, és a nyúlós vörösbarna maradékot 40°-on feloldjuk 150 ml abszolút toluolban. A néhány óra alatt kiváló kristálytömeget nitrogénpalackkal összekötött üvegszűrőnuccs segítségével, levegő kizárása mellett az anyalúgból leválasztjuk, a szűrőnuccson 3x25 ml abszolút, jéghideg toluollal mossuk az enyhén sárgás szennyezések eltávolítása céljából. Szobahőmérsékleten 0,1 Hgmm nyomás alatt 20 óráig szárítjuk, az N-metil-N,N’-diciklohexil-karbodiimidium-jodidot színtelen, 111—113°-on olvadó kristályok alakjában állítjuk elő. Infravörös abszorpciós spektrum (kloroformban): jellemző sávok 4,72, és 6,00ju-nál. d) 0,400 g 3-jód-metil-7(Í-fenü-acetil-amino-3-cefem-4-karbonsav-difenil-metil-észter 15 ml 90%-os vizes ecetsawal készült oldatát jeges fürdőben 0°-ra lehűtjük, és alapos keverés közben részletekben hozzáadunk 2,0 g cinkport. 30 percig 0°-on reagáltatjuk, majd a nem-reagált cinkport diatomaföld-betéttel ellátott szűrőnuccs segítségével leszűrjük, a szűrőn maradt anyagot többször szuszpendáljuk friss metilén-kloridban és újra leszűtjük. Az egyesített szűrleteket csökkentett nyomás alatt bepároljuk, hozzáadunk abszolút toluolt, és csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékot keverés közben felvesszük 50 ml metilén-kloriddal, és 30 ml 0,5 M vizes dikálium-hidrogén-foszfát-oldattal, a vizes fázist leválasztjuk, újra extraháljuk 2 x 30 ml metilén-kloriddal és elöntjük. A szerves kivonatokat többször mossuk telített vizes nátrium-klorid-oldattal, magnézium-szulfát felett megszárítjuk, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot 22 g szilikagélt tartalmazó oszlopon (10% vizet hozzáadva) kromatografáljuk. A 3-metilén-7(3-fenil-acetil-amino-cefam-4o!-karbonsav-difenil-metil-észtert 2% ecetsav-etil-észtert tartalmazó metilén-kloriddal eluáljuk, és metilén-klorid-hexán elegyből kikristályosítjuk. Olvadáspont 144-147°. [ o: ]^,° = —18° ± 1° (c = 0,715 kloroformban), ultraibolya abszorpciós spektrum (5%-os vizes etanolban): \max= 254 mp (e = 1540) és 260 mju (e= 1550), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 2,94, 5,65, 5,74, 5,94, 6,0 és 6,67 p-nál. e) 2,0 g 3-metilén-7/3-fenil-acetil-amino-cefam-4-a-karbonsav-difenil-metil-észter 80 ml abszolút metilén-kloriddal készült, -15°-ra lehűtött oldatához hozzáadunk 3,2 ml abszolút piridint, és 32 ml 8%-os metilén -kloridos foszfor-pentaklorid-oldatot, 1 óráig nitrogénatmoszférában —10 és —5° között keverjük. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük -25°-ra, hozzáadunk 25 ml abszolút metanolt és 1 óráig — 10°-on 1,5 óráig szobahőmérsékleten keverjük. Ekkor hozzáadunk 80 ml 0,5 M vizes kálium-dihidrogén-foszfát-oldatot, a pH-t 20%-os vizes foszforsavval 2-re állítjuk be, és az elegyet szobahőmérsékleten 30 percig keverjük. Ezután a szerves fázist leválasztjuk, a vizes fázist 2 x 150 ml metilén-kloriddal extraháljuk, a szerves oldatokat egyesítjük, nátrium-szulfát felett szárítjuk, és bepároljuk. Az olajos maradékot felvesszük 25 ml ecetsav-etil-észterrel, és 0°-on hozzáadjuk 1,14 g 4-metil-fenil-szulfonsav-monohidrát 25 ml ecetsavval készített oldatát. A kivált nagytérfogatú csapadékot leszűrjük, hideg ecetsav-etil-észterrel és dietil-éterrel mossuk, szárítjuk, és metilén-klorid-dietil-éter elegyből átkristályosítjuk. Színtelen tűkristályok alakjában 7j3-amino-3-metilén-cefam-4-a-karbonsav-difenil-metil-észter 4-metil-szulfonátját kapjuk. Olvadáspont 153-155°, [a]D =-14° + 1° (c = 0,97 metanolban) ultraibolya abszorpciós spektrum (etanolban): Xmax - 257 m^i (e= 1500), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 3,5, 5,60, 5,73, 8,50, 9,68 és 9,92 p-nál. f) 50 ml metanollal készített 0,553 g 7/3-amino- me t i 1 é n - c e f a m - 4«>karbonsa v-difenil-met il-észter-4- -metil-fenil-szulfonát —60°-ra lehűtött oldatán 4 percig oxigén és ózonáramot bocsátunk át (0,35 mmól ózon per perc). További 5 perc múlva a halványkék oldathoz 0,3 ml dimetil-szulfidot adunk. Az elegyet 15 percig -70°-on, 1 óráig -12°-on és 1 óráig jégfürdőn keverjük, majd bepároljuk. A maradékot felvesszük kevés metilén-kloriddal, majd zavarosság fellépéséig dietil-étert adunk hozzá, és állni hagyjuk. A mikrokristályos, vöröses por alakú csapadékot leszűrjük. 70-amino-cefam-3-on-4£-karbonsav-difenil-metil-észter 4-metil-szulfonátját kapjuk, mely főleg enolalakban mint 7(3-amino-3-cefem-3-ol-4-karbonsav-difenil-metil-észter 4-metil-fenil-szulfonát van jelen. Olvadáspont 143-145° (bomlással), rétegkromatogram (szilikagél) Rf~0,28 (rendszer: ecetsav-etil-észter(piridin)víz 85:10 :5), ultraibolya abszorpciós spektrum (etanolban): Xmax=262nvi (e = 3050) és 282 mp (e = 3020), infravörös abszorpciós spektrum (metilén-kloridban): jellemző sávok 5,58, 5,77, (váll), 6,02 és 6,22 p-nál. 5 10 . 15 ■ 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 17
