171718. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikum előállítáásra
15 171718 16 Baromfitáp-recept: búza 200 g kukorica 340 g szójadara 361 g marhafaggyú 60 g dikalciumfoszfát 15 g kalciumkarbonát 10 g jódozott konyhasó 4g vitamin-ásvány-keverék 7,5 g hatóanyagpremix 2,5 g 1000,0 g Vitamin-ásvány-keverék: A vitamin 6000 NE D3 vitamin 1000 NE E vitamin 10 mg K3 vitamin 1 mg riboflavin 3 mg piridoxin 2 mg B12 vitamin 20 mg kalciumpantotenát 5 mg nikotinsav 30 mg kolinklorid 200 mg MnS04 H 2 0 200 mg ZnS04 7H 2 0 140 mg FeS04 7H 2 0 100 mg CuS04 -5H 2 0 20 mg A hatóanyagpremix a hatóanyagot a kívánt mennyiségben tartalmazza. Összetétele például: 20 mg hatóanyag, 1 g DL-metionin, 1,48 g szójaliszt. Receptpélda sertéstakarmányra: 630 g takarmánygabonadara (= 200 g kukorica, 150 g árpa-, 150 g zab- és 130 g búzadara), 80 g halliszt, 60 g szójadara, 60 g tapioka-liszt, 38 g sörélesztő, 50 g vitamin-ásvány-keverék (összetétele például olyan lehet, mint a baromfitáp esetén), 30 g lentörköly liszt, 30 g kukoricasikér, 10 g szójaolaj, 10 g cukornád-melasz, 2 g hatóanyagpremix (összetétel például a fent megadott) alapos keverés után 1 kg takarmányt ad. A megadott összetételű takarmány-keverékek főleg csibék, illetve sertések felnevelésére, illetve hizlalására alkalmasak, azonos vagy hasonló összetételű keverékek azonban egyéb állatok felnevelésére, hizlalására is alkalmazhatók. A találmány szerinti antibiotikum jó baktérium-elleni hatását az alábbi kísérletek igazolják. a) in vitro kísérlet: 1% glükózt tartalmazó Müller—Hinton-féle tápfolyadékkal a találmány szerinti antibiotikumot 200 [xg/ml koncentrációra hígítjuk. A tápfolyadék 1 X 105—2 X 105 baktériumot tartalmaz milliliterenként. A kémcsöveket 18 órán át inkubáljuk, utána a folyadék zavarosságát határozzuk meg. Az antibiotikum hatékony, ha a folyadék zavarosságmentes. 200 [Ag/ml koncentráció mellett az alábbi baktériumkultúrák zavarosságmentesek: Escherichia coli 14; Escherichia coli C 165; Proteus vulgaris 1017; Klebsiella L 10; Klebsiella 63; Salmonella sp.; Shigella sp.; Enterobacter sp.; Serratia sp.; Proteus indolnegativ sp.; Proteus indolpozitív sp.; Pasteurella pseudotuberculosis; Staphylococcus aureus 133; Neisseria catarrhalis sp.; Diplococcus pneumoniae sp.; Streptococcus pyogenes W; Enterococcus sp.; Lactobacillus sp.; Corynebacterium diphtheriae gravis; Cory-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 nebacterium pyogenes M; Clostridum botulium; Clostridium tetani; Pseudomonas aeruginosa sp.; Aeromonas hydrophila sp.; Mycoplasma sp. (sp. = „species" = közelebbről nem azonosított, de jellemző törzsek). b) in vivo kísérletek: A találmány szerinti antibiotikumot CFj törzsű fehér egereken próbáltuk ki. Az állatokat intraperitoneálisan az 1. táblázatban megadott baktériumokkal megfertőztük, majd a fertőzés után 30, illetve 30 és 90 perccel szubkután az antibiotikummal kezeltük. Az ED50 dózist (azt a dózist, amelynek beadása után a kísérleti állatok fele túlélt) 24 óra elteltével határoztuk meg. 1. táblázat Baktérium ED5 o mg/kg testsúly Escherichia 165 Staphylococcus aureus 2X600 1X400 A találmány szerinti antibiotikum növekedés-serkentő hatását az alábbi kísérlet igazolja. Az etetési kísérlet során az antibiotikumot 10, illetve 20 ppm koncentrációban a baromfitápba kevertük (az eledel tetszés szerinti mennyiségben állt az állatok rendelkezésére). Csoport Kontroll 10 ppm antibiot. 20 ppm antibiot. Súlynövekedés 100 102,8 103,5 Eledelfogyasztás % 100 102,8 102,3 Takarmánykihasználás 7. 100 100 101,1 Az új antibiotikum előállítását az alábbi példákkal mutatjuk be. A közelebbről nem definiált százalékos adatok súlyszázalékokra vonatkoznak. 1. példa Ferde agar táptalaj összetétele: Pepton 0,25% Kazein-hidrolizátum, savas 0,25°/„ K2 HP0 4 -3H 2 0, p.a. 0,10% KCl, p.a. 0,05% MgS04 , p.a. 0,05% FeS04 , p.a. 0,01% nádcukor 3,00% agar 2,00% víz ad 100,00% „A" tápoldat összetétele: szójaliszt, zsírmentesített 3,0% glicerin, tiszta 3,0% CaC03 , p.a. 0,2% víz ad 100,0% Habmentesítés céljából hidroxicsoportokat tartalmazó semleges poliolt (Niax Polyol LHT 67; gyártja: Union Carbide Belg.) adunk a tápoldathoz 1 csepp/140 ml mennyiségben. Erlenmeyer-lombikokban 140—140 ml steril „A" táp-8
