171681. lajstromszámú szabadalom • Eljárás D-homo-20-oxo- pregnán-származékok előállítására

5 171681 6 hozzá. A reakcióelegyet 30 percen át keverjük —15 C°on, majd kénsavas jegesvízre öntjük. Ezután metilénkloriddal extrahálunk, majd vízzel történő mosás után a reakcióelegyet vákuumban bepároljuk. Acetonból történő átkristályosítás után 830 mg 3ß-hidroxi-D-homo-5<x-pregnán-20-ont kapunk, op. 190—191 C°. 5. példa 770 mg D-homo-5ß-pregnan-3,20-diont 40 ml tetrahidrofuránban 1 g lítiumalumínium-tri-terc-butoxihidriddel —15 C°-on 30 percen át redukáljuk. A 4. példában leírt eljárás szerint végezve a feldolgozást 577 mg 3a-hidroxi-D-homo-5ß-pregnan-20-ont kapunk, op. 147—148 C°. 6. példa 5 g 21-acetoxi-3ß-hidroxi-D-homo-5-pregnen-20-ont [előállítható például R. M. Dodson és társai szerint, JACS 75, 5132 (1953)] 500 ml metanolban 500 mg 10%os palládium-szén-katalizátor hozzáadása után hidrogénezünk. A katalizátort kiszűrjük, és az oldatot kezdődő kristályosodásig pároljuk be. így 4,6 g 21-acetoxi-3ß-hidroxi-D-homo-5a-pregnán-20-ont kapunk, op. 159— 160 C°. 7. példa 2,3 g 3ß-hidroxi-D-homo-5a-pregnan-20-ont oldunk 20 ml piridinben, az oldatot 0 C°-ra hűtjük le, majd keverés közben 1,15 ml metánszulfokloridot csepegtetünk hozzá. Ezután 30 percen át keverjük 20 C°-on, jegesvízbe öntjük, a kicsapódó terméket leszívatjuk, metilénkloridban oldjuk, vízzel mossuk, majd vákuumban bepároljuk. A 3ß-meziloxi-D-homo-5<x-pregnan-20-on analitikai mintája acetonból történő átkristályosítás után 139— 140 C°-on olvad. 8. példa A nyers mezilát 2,8 g-ját 100 ml jégecetben 5 g lítiumacetáttal 3 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alatt. Ezután az oldatot vákuumban bepároljuk. így 2,6 g 3a-acetoxi-D-homo-5a-pregnán-20-ont kapunk. Op. 152—153,3 C°. 9. példa 2,6 g 3a-acetoxi-D-homo-5a-pregnán-20-ont 150 ml metanolban 300 mg káliumhidroxiddal 5 órán át forralunk visszafolyató hűtő alatt. A reakcióelegyet 1 ml jégecet hozzáadása után vákuumban bepároljuk, a maradékot metilénkloridban oldjuk, az oldatot vízzel mossuk, majd szárazra pároljuk. Rétegkromatográfiás módszerrel 95: 5 arányú metilénklorid-ecetsavetilészter-rendszerbén 950 mg 3a-hidroxi-D-homo-5«-pregnán-20-ont nyerünk, melyet acetonból kristályosítunk át. Op. 161— 162 C°. 10. példa 1,9 g 21-acetoxi-D-homo-4-pregnén-3,20-diont [előállítható például Dodson szerint, JACS 75, 5132 (1953)] 5 400 ml dimetilformamidban 190 mg 10%-os palládium-szén-katalizátor hozzáadása után hidrogénezünk. A katalizátort kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk, a maradékot rétegkromatográfiás módszerrel 1: 1 arányú éter-pentán-rendszerben választjuk szét. Aceton-he-10 xán-elegyből történő átkristályosítás után 523 mg 21--acetoxi-D-homo-5oc-pregnán-3,20-diont (op. 168—169 C°) és 806 mg 21-acetoxi-D-homo-5ß-pregnan-3,20-diont kapunk, op. 127—128 C°. 11. példa Egy 2 literes Erlenmeyer lombikban levő 500 ml 1% kukoricalekvárt, 1% szójalisztet és 0,005% szójaolajat 20 tartalmazó és autoklávban 120 C°-on sterilizált tápoldatot, melynek pH értékét 6,2-re állítjuk, liofilizált Curvularia lunata tenyészettel beoltunk és 72 órán át rázatjuk 30 C°-on, forgó rázógépen. Ezzel az előtenyészettel beoltjuk és 72 órán át rázatjuk 30 C°-on, forgó rázógépen 25 egy 20 literes rozsdamentes fermentorban levő 15 liter, 1% kukoricalekvárt, 0,5% keményítőcukrot és 0,05% szójaolajat tartalmazó, 6,2 pH értékű, 121 C°-on és 1,1 atü nyomáson sterilizált táptalajt. Silicon SH jelű habzásgátlóanyagot adunk hozzá, majd 29 C°-on 10 li-30 ter/perc sebességű, 0,7 atü nyomású levegőárammal levegőztetve 220 ford./perc fordulatszámmal kevertetve 24 órán át inkubáljuk. A fermentlé 1 literével steril körülmények között beoltunk 14 liter sterilizált, 1% kukoricalekvárt, 1,25% szójalisztet és 0,005% szójaolajat tar-35 talmazó táptalajt, és a fent leírtak szerint fermentáljuk. 6 óra múlva 3 g 21-acetoxi-D-homo-4-pregnén-3,20-dion 150 ml dimetilformamidos oldatát adjuk hozzá. Az átalakulás lefolyását metil-izobutil-ketonnal extrahált fermentpróba vékonyrétegkromatográfiás analí-40 zisével követhetjük. A teljes átalakulás után (23 óra reakcióidő) a fermentor tartalmát kétszer 10-10 liter metil-izobutil-ketonnal kikeverjük, és az extraktumot 50 C°os fürdőhőmérsékleten vákuumban bepároljuk. A maradékot szilikagélen történő kromatografálással tisztít-45 juk, és aceton-éter-elegyből átkristályosítjuk. így 11 ß,21--dihidroxi-D-homo-4-pregnén-3,20-diont kapunk, melynek olvadáspontja 191—195 C°. 5,6 g llß,21-dihidroxi-D-homo-4-pregnen-3,20-dionhoz 50 ml dimetilformamidot, 10 ml ecetsavanhidridet és 50 5,5 g ólomdiacetátot adunk hozzá és 1,5 órán át keverjük 20 C°-on. Ezután jéghideg nátriumkloridoldatba öntjük, a kicsapódó terméket leszívatjuk, majd metilénkloridban oldjuk. Az oldatot vízzel mossuk, vákuumban bepároljuk, és a maradékot aceton-hexán-elegyből át-55 kristályosítjuk. így 5,2 g 21-acetoxi-llß-hidroxi-D-homo-4-pregnén-3,20-diont kapunk. 3,3 g 21-acetoxi-llß-hidroxi-D-homo-4-pregnen-3,20--diont hidrogénezünk a 10. példában leírt eljárás szerint. A C5-epimerek elválasztását vékonyrétegkromatográfiás 60 módszerrel 9: 1 arányú metilénklorid-etilacetát-rendszerben követhetjük. Aceton-hexán-elegyből történő átkristályosítás után 1,2 g 21-acetoxi-llß-hidroxi-D-homo-5«-pregnán-3,20-diont, op. 171—173 C° és 925 mg 21-acetoxi-llß-hidroxi-D-homo-5ß-pregnan-3,20-diont 65 kapunk, op. 136—138 C°. 3