171517. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acne vulgaris kezelésére használható, orálisan adagolható készítmény előállítására

5 171517 6 enzimek mutathatók ki. Az acne-baktériumok levegőztetett körülmények között gyengén, oxigénmentes körülmények között a lehető legjobban növekszenek. Amíg a Vogel-törzs szigorúan anaerob körűimé- 5 nyék között csak lassan, a Beck-törzs még kevésbé szigorúan anaerob körülmények között is gyorsan szaporodik, feltűnő a szaporodás gyorsasága glicerinnel kiegészített, savanyú pH-jú táptalajokon (szelektív táptalaj). 10 A Beck-törzs specifikus antiszérumával a Gerrath- és Vogel-törzs szintúgy, de kisebb mértékben agglutinálódik. Ebből adódik, hogy a Beck- és a Gerrath-törzs között igen szoros antigenikus rokonság áll fent, míg a Vogel-törzs rokonsági foka 15 (közös részantigének) nyilvánvalóan kisebb. A specifikus antiszérummal létrejövő szérumagglutináció mértéke a Corynebacterium acne Beck-törzs esetén 1 :256, szemben a Gerrath-törzsnél mért 1:128-tól, 1:256-ig, illetve a Vogel- 20 -törzsnél mért 1 : 68-cal. A találmány szerinti eljárással előállított készítményben az egyes törzsek aránya tág határok között változhat. A Beck-, Gerrath- és Vogel-törzs aránya a készítményben előnyösen 25 1-3 : 1-3 :0,5-1,5, előnyösebben 2:2:1, a tenyészet előnyösen 5 • 109 sejtet tartalmaz. 10—20, előnyösebben 15 milliárdos csíraszámmal jellemezhető tenyészet adagolásával igen jó hatás érhető el. Az acnés megbetegedésben szenvedő betegekből 30 izolált friss törzsek bármelyikét felhasználhatjuk, hacsak nem rendelkeznek toxikus vagy allergiás tüneteket kiváltó hatással. Ez okból előnyösen gyengített törzseket használunk, előnyösen inaktivált alakban. 35 A Corynebacterium acnes törzseit az ismert módon tenyésztjük. A baktériumot először megfelelő táptalajon, például folyékony húskivonat-pepton-táptalajon, gyakorlatilag semleges pH-trtéken (pH 7 ± 0,2) a levegő kizárása közben tenyésztjük, majd 40 például hevítéssel 0,2%-os fenollal, vagy formaiinnal (0,2-0,4%), vagy csökkentett nyomáson, hidegen acetonnal kezelve és/vagy ultrahangos kezeléssel inaktiváljuk a sejteket. Az ultrahanggal kivitelezett kezelés azért elő- 4S nyös, mert az adott, és már inaktivált tenyészetben a szaporodás folyamán létrejött igen szilárd sejtcsoportok ilyenkor szétesnek. A centrifugálás után kapott inaktivált baktériumokból álló sejtmasszát fagyasztva szárítjuk, és szilárd halmazállapotú ké- 50 szítmény előállításakor előnyösen, egy a gyomron és a bélfalakon való felszívódást előnyösen befolyásoló hidrofil adalékkal, például karbamiddal «egészítjük ki, míg abban az esetben, ha folyékony halmazállapotú készítményt kívánunk előállítani 55 (emulzió vagy szirup), úgy cukrot és egy folyékony hordozóanyagot adagolunk hozzá. A találmány szerinti eljárás egyik előnyös kivitelezési változata szerint eljárva olyan készítményt állítunk elő, amely a Corynebacterium acnes in- 60 aktivált törzseit fagyasztva szárított alakban tartalmazza. Fentiek szerint eljárva a fagyasztva szárításhoz olyan peptont használhatunk, amelyet más eljárásoktól eltérően, előzőleg a Corynebacterium acnes 65 Gerrath táptalajába adagoltunk, és ami így tartalmazza a Corynebacterium acnes anyagcseretermékeit. Az előkezelt pepton felületaktív aminokat, továbbá az előzőekben megadott deszenzibizáló vegyületeket tartalmaz. A felületaktív aminők jelenléte biztosítja a bélrendszer limfatikus részeiben az antigének egyenletes eloszlását. A vérkeringésre gyakorolt mérgező hatásuk miatt oltóanyagokba nem adagolhatok biogén aminők. A készítmény orálisan adagoláskor toxikus hatásuk azonban nem jelentkezik. Az ezideig használt inaktivált Corynebacterium acnes törzsek oltóanyagban adagolva - mint már erről * szó volt - allergiás tüneteket okoztak és antitestek képződéséhez vezettek, így erősítették az artusz-tüneteket. Az allergiának ez a változata zavarja az immunizálódás folyamatát. Ugy találtuk, hogy az ilyen típusú allergiás tünetek megjelenése meglepő módon nem csak elkerülhető az antigén-összetevők orális adagolásával, hanem ezen túlmenően, a már fennálló Corynebacterium acnes-fertőzés okozta allergiás válasz is megszűnik a deszenzibilizálódás következtében. Deszenzibilizáló hatású összetevőként előnyösen a Corynebacterium acnes anyagcseretermékeit használjuk, amelyek anélkül, hogy az immunizálási kiváltó antigénhatást zavarnák, előnyösen hatnak. Ezeket a vegyületeket előnyösen acne-tenyészetek tenyészlevéből különítjük el. Előnyösen a Bacterium acnes tenyészlevének antigéneket tartalmazó frakcióját használjuk. A hatásért tulajdonképpen lipopoliszacharidok felelősek. A káros allergiás tünet orális adagolás után igen rövid idő alatt megszűnik. A részecskékből álló antigén hatású anyag, vagyis maguknak a baktériumoknak a szervezetbe kerülése szöveti-(sejt)-immunitáshoz vezet, és ez orális adagoláskor nem vált ki allergiás választ. A sejtek és a szövetek specifikus, szerzett ellenáilóképességből adódó reakciók megakadályozzák E baktériumok túlzott mértékű elterjedését és szaporodását. 21 napon belül a kórokozók eltűnnek a bőrből és gyógyulás következik be, ugyanakkor az oltóanyaggal való injekciós kezelésnél fellépő továbbterjedési folyamatok nem jelentkeznek. Orális adagoláskor tehát az injekciós kezeléstől különböző immunfiziológiás folyamatok következnek be. A deszenzibilizáló anyagok oldható antigének melyek a még feltáratlan baktériumokban is jelen vannak, és azokból például ultrahanggal végzett kezeléssel szabadíthatók fel. Ezek hatékonysága lényegében a Sulzberger-Chase-jelenség egy fajtáján alapul, mikor is egy antigénnek kis dózisokban hosszú időn keresztül vagy nagy dózisban, jó reszorbeálható alakban orálisan történő adagolása az Arthus-jelenségre depresszív hatású. Ez végezhető mind korpuszkuláris antigénekkel - melyeket azonban az organizmusból fel kell tárni -, mind oldható antigénekkel, melyek legalább négy napi tenyésztés után a tenyészetekben találhatók meg. A Corynebacteriumokban igen sok tipikus antigén van, melyek jelen esetben túlnyomórészt lipopoliszacharidokból és lipoproteidekből állnak. Ezen antigének molekulasúlya 15 000 felett van. 3