171243. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új dotriakontapeptidamidok előállítására

23 171243 24 ml N-metil-morfolin elegyét 17 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyből ezután nagyvákuummal az oldószert eltávolítjuk, a maradékot etil-acetáttal eldolgozzuk, mossuk és az 1. példa a) eljárásában megadott módon szárítjuk. Az oldatot bepároljuk és a maradékot éter, petroléter elegyből átkristályosítjuk. A kapott termék 16 g. Olvadáspont: 104—106 °C. b) H—Ala—Thr(tBu)—Gly—OMe Az e) eljárás szerint előállított 10 g terméket 1 liter metanolban 2 g palládium-csontszénnel hidrogénezzük. A kapott 8,2 g anyagot azonnal továbbdolgozzuk. g) Z—Thr(tBu)—Phe—Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala— —Thr(tBu)—Gly—OMe Az f) eljárás szerint előállított 8,2 g termék, 8,3 g Z—Thr(tBu)—Phe—Pro—OH [Helv. Chim. Acta 53, 2135 (1970)] és 100 ml dimetil-formamid oldatához 4,0 g N-hidroxi-szukcinimidet és 4,2 g diciklohexil-karbodiimidet adunk és az elegyet 17 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük. A képződött diciklohexil-karbamidot leszűrjük, a szűrletet 1,3 1 jeges vízre öntjük, a csapadékot 2 óra után leszűrjük, szárítjuk és 120 ml etil-acetáttal elkeverjük. A nem oldódó porszerű anyagot leszűrjük, etil-acetáttal mossuk és szárítjuk. Az eljárással 8,5 g terméket kapunk. DS: Rf(121A)=0,78; Rf

(102A)=0,85; Rf(43C)=0,71. h)Z—Thr(tBu)—Phe—Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala— —Thr(tBu)—Gly—OH A g) eljárás szerint előállított 5,15 g terméket melegítés közben 110 ml 90%-os metanolban oldjuk, 23 °C hőmérsékletre lehűtjük és 13,5 ml 1,0 n vizes nátrium-hidroxid-oldatot adunk hozzá. A reakcióelegyhez 10 perc után 45 ml vizet és további 5 perc után még 25 ml vizet adunk. 20 perc után az oldatot 270 ml jéggel hűtött 0,05 n vizes sósav-oldatra öntjük, a csapadékot leszűrjük, jeges vízzel és víz, acetonitril (4:1) eleggyel mossuk és szárítjuk. A kapott termék 4,1 g. DS: Rf

(45) = 0,27; Rf(100)=0,33; Rf(43C) = 0,28. I) H—Asn—Lys(Boc)—Phe—His—Thr(tBu)—Phe— —Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly— 65 —Val—Gly—Ala—Pro—NH2—acetát Az a) eljárás szerint előállított 13,3 g terméket metanolban 1,5 g 10%-os palládium-csontszén jelenlétében hidrogénezzük. 9,4 g színtelen gyantát kapunk. c)Z—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly—OMe A b) eljárásban kapott 9,4 g terméket és 13,2 g Z—Thr(tBu)—OSu-t 100 ml dimetil-formamidban oldjuk és 17 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk. A terméket 500 ml jeges vízre öntve kicsapjuk, leszűrjük, szárítjuk és kevés víz hozzáadásával aceton és petroléter elegyből átkristályosítjuk. A kapott anyag 13,6 g. Olvadáspont: 193—195 °C. d) H—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly—OMe A c) pont szerint előállított 13,1 g terméket 750 ml metanolban 2,6 g palládium-csontszénnel hidrogénezzük. Az eljárással 9,95 g színtelen olajos terméket kapunk. e) Z—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly—OMe Ezt a vegyületet az 1. példa g) eljárásában leírt pentapeptid-származék előállításával analóg módon állítjuk elő. A terméket metanolból átkristályosítjuk és így 10,7 g anyagot kapunk. Olvadáspont: 198—202 °C. f) H—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly—OMe i) H—Thr(tBu)—Phe—Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala— —Thr(tBu)—Gly—OH 15 Ah) eljárás szerint előállított 3,65 g terméket 125 ml dimetil-formamidban szuszpendáljuk és 0,5 g 10%-os palládium-csontszén jelenlétében hidrogénezzük. A terméket (2,62 g) vízzel eldörzsöljük, leszűrjük és szárítjuk. 20 DS: Rf

(100) = 0,12;Rf(52) = 0,23. j) Z—Asn—Lys(Boc)—Phe—His^-Thr(tBu)—Phe— —Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly—OH 25 7,2 g Z—Asn—Lys(Boc)—Phe—His—NH—NH2-t [Helv. 53, 2135 (1970)] 80 °C hőmérsékleten 30 ml dimetil-formamidban oldunk, az oldatot — 30 °C hőmérsékletre lehűtjük és 7,74 ml 3,7 n sósav-oldatot (dioxánban) adunk hozzá. Az elegyhez ezután — 30 °C hőmér-30 sékleten 1,42 ml terc-butil-nitritet adunk, 10 percig —10 °C hőmérsékleten reagáltatjuk, ismét lehűtjük — 30 °C-ra és 70 ml dimetil-formamidban oldott 6,45 g H—Thr(tBu)—Phe—Pro—Gin-Thr(tBu)—Ala— —Thr(tBu)—Gly—OH-t és 7,8 ml N-etil-diizopropil-35 -amint adunk hozzá. A reakcióelegyet 18 óra hosszat 0 °C hőmérsékleten állni hagyjuk, majd 400 ml jéghideg 1%-os ecetsavra öntjük. A csapadékot leszűrjük, vízzel mossuk és vákuumban kalcium-kloridon szárítjuk. A terméket acetonitrillel digeráljuk, leszűrjük és 40 szárítjuk. DS: Rf(70) = 0,33; Rf(100) = 0,21. 5 10 k) Z—Asn—Lys(Boc)—Phe—His—Thr(tBu)—Phe— . —Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(tBu)—Gly— —Val—Gly—Ala—Pro—NH2 7,5 g Z—Asn—Lys(Boc)—Phe—His—Thr(tBu)— —Phe—Pro—Gin—Thr(tBu)—Ala—Thr(Btu)—Gly— 50 —OH, 0,99 g N-hidroxi-szukcinimid, 1,84 g H—Val— —Gly—Ala—Pro—NH2 [Helv. Chim. Actából már idézett rész] és 70 ml dimetil-formamid elegyéhez 1,11 g diciklohexil-karbodiimidet adunk és 5 óra hosszat 45 C

C hőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet ezután 1,2 1 55 jéggel hűtött éterre öntjük, a csapadékot leszűrjük és szárítjuk. A nyers terméket kétszer egyenként 200 ml acetonitril és metanol (9:1) eleggyel elkeverjük, lehűtjük és szárítjuk. Az eljárás kitermelése 8,5 g. DS: Rf(45)=0,50; Rf(96) = 0,46; Rf

(100)=0,29; 60 Rf

(121) = 0,80. 12