171233. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antibiotikus hatású figaroesav komplex előállítására

11 171233 roll állatokéhoz viszonyítva 29%-kal. A figaroesavkomplexet tartalmazó fermentlé vizsgálataink szerint rágcsálókon a Walker 256 carcinosarcoma-val (íntramuszkulárisan), P—388 lymphaticus leukémiával és B—16 melanomá-val szemben is hatásos. A szilárd figaroesav-komplex hatását is megvizsgáltuk, és külön-' böző tumor-rendszerekben hatásosnak találtuk. Az L—1210 leukemia és B—16 melanoma esetében egereken kapott eredményeket az alábbi V. táblázatban adjuk meg. L—1210 leukémia V. táblázat Figaroesav-komplex hatása átültetett egértumorokon B—16 melanoma Adag (fig/kg/nap Átlagos súlykülönbség (T—C, g) T/C Túlélők % 5 nap MST múlva Átlagos súlykülönbség (T-C, g) T/C % MST Túlélők 5 nap múlva 128 -5,2 Tox 1/6 -3,4 Tox 6/6 64 0 Tox 6/6 32 -2,8 150 6/6 -3,4 254(1) 6/6 16 -3,7 ^400(2) 6/6 8 -2,6 129 6/6 -0,9 206 6/6 4 + 3,6 160 6/6 2 -0,7 114 6/6 + 0,9 126 6/6 1 -1,7 129 6/6 Megjegyzések: Tsx = toxikus. Kezelés: naponta egyszer 9 napon át intraperitoneálisan. Kiértékelés: T kezelt; C kontroll; T/C% MST = közepes túlélési idő napokban: kezelt MST/kontroll X 100. Kritérium: ha T/C ^ 125, a tumorgátlás szignifikáns (a gazdaállat túlélési ideje meghosszabbodik). (1): 2/6 túlélő 60 nap múlva. (2): 4/6 túlélő 60 nap múlva. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az oltalmi kör korlátozása nélkül az alábbi kiviteli példákat adjuk meg. 1. példa Keverővel ellátott lombikban végzett fermentáció Streptosporangium sp. ATCC 31.129 törzset 2 g D-glükózt, 20 g zablisztet, 2 g szója-peptont és 20 g agart tartalmazó, desztillált vízzel 1 literre kiegészített ferde agar-táptalajon tenyésztjük. A törzset legalább 6 napon át tenyésztjük 27 °C-on, majd a spórákat 500 ml térfogatú, 100 ml steril táptalajt tartalmazó Erlenmeyer lombikba visszük át, a táptalaj 50 g gabonakeményítőből, 10 g szójalisztből, 10 g földimogyorólisztből és 3 g kalciumkarbonátból áll, desztillált vízzel 1 literre kiegészítve. Ezt a vegetatív kultúrát 27 °C-on inkubáljuk rotary-rendszerű rázógépen (Gyrotory rázógép, G 53 modell, gyártja a New Brunswick Scientific Co., Inc.), amelynek fordulatszáma percenként 210 és 5,1 cm átmérőjű kört ír le. 48 óra múlva a kultúra 4 ml-ét 500 ml térfogatú, 100 ml steril termelő táptalajt tartalmazó Erlenmeyer lombikba visszük át. A termelő táptalaj 50 g szacharózból, 20 g szójalisztből, 20 g földimogyorólisztből és 3 g kalciumkarbonátból áll, desztillált vízzel 1 literre kiegészítve. A kultúrát 170 órán 40 45 50 55 60 65 át inkubáljuk 27 °C hőmérsékleten 230 fordulat/perc sebességű rázógépen. Ekkor a kultúra szűrlete és a micélium a figaroesav-komplex jelenléte következtében antibiotikus hatást mutat, melyet agardiffúziós módszerrel határozunk meg. 2. példa Fermentorban végzett fermentáció 37,8 liter, 1. példa szerinti steril termelő táptalajt tartalmazó fermentort 1,89 liter, 1. példa szerinti vegetatív kultúrával inokulálunk, 375 fordulat/perc lapátkerék-sebességgel keverjük, 76,5 liter/perc sebességgel levegőztetjük és 27 °C-on inkubáljuk. 190 óra múlva az antibiotikum komplexet elkülönítjük. 3. példa Fermentorban végzett fermentáció 3030 liter, 1. példa szerinti termelő táptalajt tartalmazó fermentort 152 liter, 1. példa szerinti módon előállított vegetatív kultúrával inokulálunk, 155 fordulat/ perc lapátkerék-sebességgel keverjük, 1420 liter/perc sebességgel levegőztetjük és 27 °C-on inkubáljuk. 210 óra múlva elkülönítjük a íigaroesav-komplexet. 6