170786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás MM-13902 antibiotikum-sók előállítására
25 170786 26 SS Oldható nem-melanoid pigmentek OM Törzs SS YM GA OM Melanin termelés* ATCC 12019 ATCC 3335 ATCC 15863 ATCC 3320 ATCC 3369 ATCC 11009 ATCC 13989 +, halvány rózsaszín +, halványbarna +, halvány narancs — — — + = pigmentet termel; — =nem termel pigmentet * pepton-élesztő-vas agáron (6. sz. ISP-közeg), tirozin-agaron (17. sz. ISP-közeg) és tripton-élesztő táptalajon(l. sz. ISP-közeg) vizsgálva 9. táblázat Streptomyces -törzsek szénforrás-hasznosítása Törzs Ramnóz Raffinóz Szacharóz Inozit Glükóz Xilóz Fruktóz Mannit |Arabinóz ATCC 21379 + _ _ ± + + + + + ATCC 31126 + — — + + + + + + ATCC 21380 + — — + + + + + + ATCC 21381 + — — — + + ± + + ATCC 21382 + + — — + + + + + NCIB 8238 + — — — + + + • + + NCIB 8509 + ± — — + + + ± + ATCC 21549 — — — + + + + + + ATCC 12019 + ± + + + + + + + ATCC 3335 + — ± + + + + + + ATCC 15863 + — — — + + + + + ATCC 3320 + — ± — + + + + + ATCC 3369 + — ± ± + + + + + ATCC 11009 + — — + + + + + + ATCC 13989 — + + + + + + + — + =a szénforrást hasznosítja; — =a szénforrást nem hasznosítja; ± =a szénforrás-hasznosítás kétséges, vagy igen kis mértékű 15. példa MM 13902 antibiotikum előállítása és elkülönítése Streptomyces olivaceus ATCC 31126 törzs spóráit felhasználásig zárt csőben, száraz talajon, exszikkátorban, 20 Cc -on tároljuk. A talaj körülbelül 20 mg-os mintáját aszeptikus körülmények között 500 ml-es Erlenmeyer-lombikba töltött 100 ml, alábbi összetételű táptalajhoz adjuk: glükóz monohidrát szójababliszt („Arkasoy 50") ionmentes víz 20,0 g/l 10,0 g/l ad 1 liter •A táptalaj pH-ját sterilizálás előtt 6,5-re állítjuk. A lombikot forgó rázógépen (240 fordulat/perc) körülbelül 30 órán át 28 C°-on inkubáljuk. Az így kapott tenyészet 2 ml-es mintáját használjuk fel az alábbi összetételű ferde, szilárd agar-lemez beoltására: V—8 zöldséglé (a Campbell's Soups Ltd. cég gyártmánya) 20,0 ml agar 20,0 g ionmentes víz ad 1 liter 50 55 55 60 A Roux-lombikokba helyezett agarlemezek pH-ját sterilizálás előtt 6,0-ra állítjuk. Az inokulumot rázogatással eloszlatjuk az agarlemez felületén, majd a lombikot 30 C°-on inkubáljuk. 2 nap elteltével a lombikból pipettával eltávolítjuk a folyadék fölöslegét, és az inkubálást további 4 napon át folytatjuk. Korábbi kísérleteinkben azt tapasztaltuk, hogy ha a Roux-lombikban végzett tenyésztési lépés során a fenti módszert követjük, visszaszoríthatjuk az aktinofágok termelődését. Az inkubálás befejezésekor 0,02% Tween 80-at tartalmazó 50 ml steril, ionmentes vizet töltünk a lombikba, és a spórákat rázogatással szuszpendáljuk a vizes közegben. Az így kapott spóraszuszpenzióval 100 literes rozsdamentes acél fermentorba töltött 75 liter sterilizált, alábbi összetételű oltóközeget oltunk be: szójababliszt („Arkasoy 50") glükóz-monohidrát csapvíz 10,0 g/l 20,0 g/l ad 1 liter A fermentációs közeghez a habzás megakadályozására a sterilizálás előtt 50 ml 10 térfogat%-os szója-65 olajas „Pluronic L81" oldatot adunk. 13
