170583. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6alfa- metil-ciklohexáno [1',2',16alfa17alfa]-pregn-4-én- 3,20-dion előállítására
170583 A találmány szerinti vegyület antikonceptív hatásmechanizmusának vizsgálata kimutatta, hogy a vegyület patkányok esetén az oestrus-ciklust a dioestrus-fázis rovására lényegtelen ideig (0,5-0,8 napig) meghosszabbítja, miközben minden fázis változatlanul megmarad, és az uterus súlya továbbra is a ciklusoktól függ. Többek között ez is előnye a találmány szerinti vegyületnek a megestranollal szemben. Az ováriumnak (petefészek) a találmány szerinti készítmény hatására bekövetkező aktivitásgátlását a párzás előstádiumában a petefészek 10 súlyának csökkenése (35,4-42,6 mg/100 g súly lecsökken 25,1-28,9 mg/100 g-ra, P<0,01), valamint a corpus lutenum-szám csökkenése (12-ről 8-6-ra) igazolja. A gonadotrop hatékonyság vizsgálata azt mutatta, hogy a készítmény a párzás előstádiumában (Vorbrunststadium) a hipofizisban és a plazmában a luteinizáló hormon mennyiségét rövid ideig lecsökkenti. A találmány szerint előállított készítménynek a hipofízis gonadotrop hatékonyságára gyakorolt hatását az alábbi táblázatban szemléltetjük. Patkány csoportok Ciklusok v. fázisok Luteinizáló hormon Mg/hipofizis jig/100 ml plazma Kontroll dioestrus párzás előtt oestrus 5,3 27,8 0,52 26 18 11 A javasolt készítménnyel kezeltek dioestrus 4,28 32,3 párzás előtt 4-4,9 P<0,05 4-2,5 oestrus t5,4 P<0,05 10,0 P<0,05 A folliculus-stimuláló hipofizisaktivitás megbízhatóan nem változott. Megvizsgáltuk a készítménynek a hipotalamusban a noradrenalin nívóra kifejtett hatását. A java- 30 solt készítményt naponta ivarérett nőstény patkányoknak perorálisan antikonceptív dózisokban 14 napon át beadagolva a noradrenalin nívó valamivel lecsökkent. Ily módon a noradrenalin hipotalamus-tartalma intakt állatoknál (12) 1,12—1,36 35 /zg/g szövet és olyan állatoknál (6), amelyeknek a készítményt beadagoltuk 0,81-0,97 Mg/g (P = 0,05). A hipotalamus noradrenalin egyensúlyában kimutatott változások, a párzás előstádiumában a luteinizáló hormon kiválasztásának átmeneti gátlása 40 határozza meg a javasolt készítmény antikonceptív hatékonyságát. A készítmény toxicitásvizsgálata során megállapítottuk, hogy azt antikonceptív dózisban hosszú ideig adagolva a kísérleti állatok általános közérze- 45 tét, súlygyarapodását, vérképüket és egyéb látleletüket nem befolyásolja negatívan. A készítmény nem rendelkezik anabólikus, timoleptikus és gyulladásgátló hatással. A készítményt patkányoknak 14 napig beada- 50 golva, majd megszakítva, a szaporodási képesség gyorsan visszaállt, a kísérleti állatok a 8., 9. napon pároztak. A terhesség időtartama nem különbözött az intakt (kontroll) állatokétól. A magzat átlagos súlygyarapodása ugyancsak megfelelt a szokásosnak. 55 A találmány szerint előállított készítménnyel hosszabb ideig kezelt patkányok kölykein semmiféle anomália jegyei nem voltak láthatók. A találmány szerinti készítmény a dioestrus- és a párzás előstádiumában a mellékvese súlyát nem 60 befolyásolja jelentősen, csupán az oestrus-stádiumban mutatható ki csekély mellékvese-súlygyarapodás. A mellékvesében az aszkorbinsav-tartalom változásának gyorsaságából és a véreosinofíl lenkoeytáinak és -limfocytáinak meghatározásából meg- 65 állapítottuk, hogy a mellékvesekéreg funkcionális aktivitása nem változott észrevehetően. A javasolt készítmény hatóanyagát, a 6a-metil-ciklohexáno-[r,2',16a,17a]-pregn-4-én-3,20-diont, az alábbiak szerint állítjuk elő: Az [r,2',16a,17a]-ciklohexáno-pregn-5-én-3(3-ol-20-on-3-acetátot egy persawal reagáltatjuk valamely poláris szerves oldószerben. A kapott [l',2',16a,17a]-ciklohexáno-5a,6a-epoxi-pregnán-3/3-ol-20-on-acetátot metilmagnéziumjodiddal kezeljük szerves oldószerben, 100C° hőmérsékletre melegítve, majd a képződött 6j3-metil-[l',2',16a-17a] -ciklohexáno-pregnán-3/3,5a-diol-20-ont oxidáljuk krómtrioxiddal és kénsavval acetonban. A kapott 3-oxo-5a-hidroxi-6j3-metil-származékot klórhidrogénnel ecetsavban dehidráljuk, majd a végterméket elkülönítjük. Persavként előnyösen monoperftálsavat alkalmazunk. Célszerűen poláros szerves oldószerként kloroformot használunk. Szerves oldószerként előnyösen dietiléter és toluol vagy dietiléter és xilol keverékét alkalmazzuk. A kapott [l',2',16a,17a]-ciklohexáno-5a,6a-epoxi-pregnán-3/3--ol-20-on-acetátot metilmagnéziumjodiddal 70—90 C° hőmérsékleten kezeljük. A végtermék hozama az elméleti hozam 50 súly%-a. A találmány szerinti eljárás kiindulási vegyületét, az [ 1 ',2',16a, 17a]-ciklohexáno-pregn-5-én-3j3-ol-20--on-3-acetátot, illetve annak előállítását a 273 195 számú szovjet szerzői tanúsítvány és a Nachrichten der Akademie der Wissenschaften der UdSSR Serie-Chemie 1972.avi 6. számának 1358-63. oldalán megjelent közlemény ismerteti. A találmányt az alábbi példák kapcsán ismertetjük. 1. példa 6g [F,2',16a,l 7a]-ciklohexáno-pregn-5 -én-3-ol-20-ont 145 ml CHCl3 -ban hűtőszekrényben 25,4 ml 10%-os monoperftálsawal elegyítünk és 2
