170513. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibakteriális pszeudotriszaccharidok előállítására
17 170513 18 keverjük és vákuumban bepároljuk. A terméket az a) lépés szerint 30 g szilikagélen kromatografáljuk. A kromatografálás eredményét vékonyrétegkromatogramon ellenőrizzük, a megfelelő frakciókat egyesítjük és koncentráljuk. 0,32 g címvegyületet kapunk. Op.: 121-129 C°, [aß6 = 121° (c = 0,3%, H20). Az analízis a CasH^NsOgFö összegképletre: számított: C =44,84%, H=6,17%, N = 10,46%, talált: C =44,94%, H =6,35%, N = 10,17%. C) 6'-N-trifluoracetil-sziszomicin 20 g sziszomicint 1,2 liter vízmentes metanolban feloldunk és 3 óra alatt keverés közben hozzáadjuk 6 ml etil-tiol-trifluoracetát 60 ml metanollal készített oldatát. A keveréket 18 órán át szobahőmérsékleten reagáltatjuk, majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk. 23,8 g körülbelül 95% tisztaságú terméket kapunk, amelynek fizikokémiai jellemzői a következők: a tömegspektrum adatai: m/e 543 M+ , más jellemző csúcsok: m/e 413, 395, 385, 362, 223 és 126. MMR spektrum: (60 MHz, D20) (Ő-értékek ppm-ben) 5,37 (dublett, J = 2 Hz, H-1'), 5,12 (dublett, J = 4Hz, H-1"), 4,96 (széles szingulett, H-4'), 2,57 (szingulett, N-CH3 ), 1,26 (szingulett, C-CH3 ). D) 6'-N-terc-butoxikarbonil-gentamicin Cia 2,69 g gentamicin Cia -t metanol-víz 1:1 keverékének 60 ml-ében feloldunk, az oldatot 5 C°-ra lehűtjük és 1,815 ml trietilamint adunk hozzá. Keverés közben cseppenként 1,91 g terc-butoxikarbonil-azidot adunk a keverékhez és 18 órán át 5 C°-on keverjük. Ezután a keverékhez 20 ml Amberlite IRA-401S gyantát (OH-forma) adunk, 30 percig keverjük, szűrjük és a szűrletet vákuumban szárazra pároljuk. A nyers terméket szilikagélen (350 g) kromatografáljuk, eluálószerként kloroform-metanol-konc. ammóniumhidroxid 2 : 1 : 1 keverékének alsó fázisát használva. 3 ml-es frakciókat veszünk és tartalmukat vékonyrétegkromatogramon ellenőrizzük. A főterméket tartalmazó frakciókat egyesítjük és bepárlással kapjuk a címvegyületet (0,42g,13%). [a]66 = +137° (CH3 OH). PMR spektrum: (ő-értékek ppm-ben) 1,23 (3H, s, C-CH3 ), 1,45 [9H, sX-iCUsh l 2,53 (3H, s, N-CH3 ), 5,08 (2H, átfedő dublettek, J^3,5 Hz, H-1' és H-1"). Tömegspektrum: m/e 550 [(M+l)+ ] és m/e 540 (M+ ). E) 6'-N-terc-butoxikarbonil-gentamicin B 1 g gentamicin B-t 30 ml 50%-os vizes metanolban feloldunk, és az oldatot 5 C°-ra lehűtjük. Az oldathoz cseppenként keverés közben 0,297 g terc-butoxikarbonil-azidot, majd 0,186 ml trietilamint adunk, és az így kapott oldatot 18 órán át keverjük. A reakciókeveréket vákuumban bepároljuk, és a maradékot 100 g szilikagélen kromatografáljuk, 5 eluálószerként kloroform-metanol tömény ammóniumhidroxid 2:1:1 oldószerrendszer alsó fázisát használva. 2 ml-es frakciókat veszünk és vékonyrétegkromatogramon ellenőrizzük. A megfelelő anyagot tartalmazó frakciókat (180-230.) egyesít-10 jük és bepároljuk. 0,830 g 6'-N-terc-butoxikarbonil-gentamicin B-t kapunk, amelynek fizikai jellemzői a következők: PMR spektrum: (60 MHz, D20) (ő-értékek ppm-ben) 1,21 (3H, s, C-CH3 ), 1,42 [9H s, 15 C(CH3 ) 3 ], 2,53 (3H, s, N-CH 3 ), 5,2 (1H, d, J = 4,5Hz, H-1"), 5,23 (1H, d, J = 3,0Hz, H-1'). II. példa 20 Aldehid-köztitermék előállítása A) 2-acetamido-3-hidroxi-oktanal 25 A 2-amino-3-hidroxi-oktánsav aminocsoportját megvédjük úgy, hogy azt acetamido-csoporttá alakítjuk, az így kapott 2-acetamido-3-hidroxi-oktánsavat metanollal észtérezzük, a képződött 2-acetamido-3-hidroxi-oktánsav-metilésztert ismert eljárá-30 sok szerint diizobutil-alumíniumhidriddel redukáljuk, és így kapjuk a 2-acetamido-3-hidroxi-oktanalt. B) 2-acetoxi4-(N-metilacetamido)-butanal 35 A 2-hidroxi4-amino-butanal-dietilacetált piridinben ecetsavanhidriddel kezeljük, majd az így kapott 2-acetoxi-4-acetamido-butanal-dietilacetált nátriumhidriddel és metiljodiddal kezelve kapjuk a 2 - ac e t o xi-4-(N-metilacetamido)-butanal-die tilacetált. 40 Az acetál-védőcsoportot savval eltávolítva kapjuk a 2-acetoxi-4-(N-metilacetamido)-butanalt. 1. példa 45 1-N-szubsztituált-sziszomicin A) 1-N-etil-sziszomicin 50 5 g sziszomicint 250 ml vízben feloldunk, és 1 n kénsavat adunk hozzá, amíg az oldat pH-értéke körülbelül 5 lesz. A sziszomicin így képződött kénsavaddíciós sójának oldatához 2 ml acetaldehidet adunk, az elegyet 10 percig keverjük, majd 55 0,85 g nátrium-cianobórhidridet adunk hozzá. A reakciókeveréket szobahőmérsékleten 15 percig keverjük, majd vákuumban körülbelül 100 ml térfogatra koncentráljuk, az oldatot bázisos ioncserélő gyantával. [például Amberlite IRA 40IS (OH )] 60 kezeljük, majd liofilizáljuk, az így kapott maradék az 1-N-etil-sziszomicin. Ezt' a terméket 200 g szilikagélen kromatografálva tisztítjuk, az eluálást kloroform-metanol 7%-os vizes ammóniumhidroxid 2:1:1 oldószer-65 rendszer alsó fázisával végezve. A vékonyréteg-9
