170262. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az S-adenozil-L-metionin új kettős sóinak előállítására
170262 11 12 adagolás esetén > 6 g/kg, intraperitoneális adagolás esetén pedig 2,5 g/kg. Á vegyület tolerálhatóságát a krónikus toxicitását Wistar és Sprague-Dowley nembeli patkányokon vizsgáltuk. A patkányok 12 hónapon, át napi 10—12 mg/kg hatóanyagot adtunk be. A megfigyelési időszak elteltével végrehajtott vizsgálatok során sem szervi, sem funkcionális elváltozásokat vagy rendellenességeket nem észleltünk. A SAM teratogen hatását nyulakon és patkányokon vizsgáltuk. A vizsgálatok során még rendkívül nagy — a maximális terápiás dózis körülbelül tízszeresét kitevő - mennyiségű SAM adagolása esetén "sem észleltünk semmiféle teratogen hatást vágy koros elváltozást az embriókon, illetve az újszülötteken» J: A SÀM ,Óf^,—0,2 mg/ml dózisban túlélő emberi lymphocita-tenyészëteken vagy egér-májsejt-tenyészeteken nem; befolyásolja a sejtelemek blaszticitási indexét. , A SAM nyúlnak 40 mg/kg-os intravénás dózisban beadva nem vált ki pirogén hatást. Ha a hatóanyagot intravénás úton 40 mg/kg-os dózisban nyulaknak vagy macskáknak adjuk be, sem a carotis vérnyomásban, sem a pulzus- és légzésszámban, sem az elektrokardiográfiás képben nem tapasztalunk változást A hatóanyag intramuszkuláris injekciójának helyi tolerálhatósága még 180 napon át végzett ismételt beadás esetén is kiváló. A nyúl marginális fülvénájába adott intravénás injekció helyi intoleranciát nem vált A humán toxicitási kísérleteket önként jelentkező, egészséges, mindkét nembeli fiatal embereken végeztük. A hatóanyagot 10—300 mg mennyiségben, gyors intravénás injekció vagy infúzió útján adtuk be az átlagosan 70 kg testsúlyú kísérleti alanyoknak, és a hatóanyag beadása után 1, 5,15, 20, 30 és 60 perccel, < valamint, 2, 3, 6, 8, 10, 12 és 24 órával mértük a kísérleti alanyok minimális és maximális vérnyomását, pulzusszámát és légzésszámát. A normálistól való eltérést egyetlen esetben sem tapasztaltunk. A hatóanyag beadását követő 30 másodperc, illetve 1, 2, 31, 5,10 és 20 perc elteltével az elektrokardiogram PQ tartományának ST szekciójában nem észleltünk,változást, és sem extrasystolét, sem egyéb elváltozást nem tapasztaltunk. A vérképző rendszerek funkciójában, valamint a máj- és veseműködésben sem tapasztaltunk a normálistól statisztikusán szignifikánsan eltérő változásokat. Farmakológia Ismételten hangsúlyozzuk, hogy valahányszor SAM-ot említünk, ezen a megjelölésen a SAMf -HS0 4 -•H 2 S04-2CH3C 6 H4S03H és/vagy a SAM^HSC^ --HaSCVCHsCgí^SOsH képletű vegyületetértjük. A SAM szövetekben való eloszlásának meghatározása érdekében C14 -szénatommal jelzett metilcsoportot tartalmazó S-adenozil-metionint állítottunk elő. E termék eloszlását patkányok szervezetében vizsgáltuk. Az állatoknak intravénás úton 10 mg/kg hatóanyagot adtunk be, ami 24 juCi radioaktivitásnak felel meg. A termék fajlagos radioaktivitása 58 mCi/mmól. E kísérlettel párhuzamosan egéren autoradiográfiás vizsgálatot végeztünk. A két kísérlet eredményei azt mutat-^ ják, hogy a SAM valamennyi szövetben gyorsan eloszlik. Az egyes szervekre vonatkozó eloszlási adatokat a 2. táblázatban közöljük. 2. táblázat 5 ; SAM eloszlása patkány szöveteiben (jug/g) Szövet 15' ló 4ó 8ó 24 ó Máj 4,02 7,47 13,1 13,4 13,5 Mellékvese-mirigyek 4,26 8,46 11,7 10,8 10,9 Lép 3,15 2,96 8,1 6,2 6,7 Agyfüggelék 5,6 5,8 19,5 11,3 10,3 Hypothalamus 0,7 1,5 2,4 3,0 3,2 Kéregállomány 0,6 1,1 1,8 2,1 2,3 Vérplazma 18,6 5,2 5,3 4,5 3,1 A táblázat adataiból megállapítható, hogy a talál-25 many szerint előállított új sók valamennyi metiltranszferáz aktivitással rendelkező szövetnek leadják metilcsoportjukat. Más szavakkal, az új sók minden metiltranszferáz-rendszerrel rendelkező szövetben szelektíven lokalizálódnak. A patkányokon végrehajtott 30 teljes kísérletsorozat azt igazolja, hogy az új vegyületek a Handler módszerével, túlzott mennyiségű zsírt és fehérjét tartalmazó táplálékkal kiváltott májelzsírosodásban, valamint az akut alkoholmérgezéssel vagy más mérgező anyagokkal (széntetrakloriddal, bróm-35 benzollal stb.) kiváltott elzsírosodásban már 15 mg/kg-os intraperitoneális dózisban is jelentős védő és feloldó hatást fejtenek ki. A SAM morfohisztokémiai és analitikai szempontokból egyaránt jelentősen csökkenti a lipoidok felhalmozódását a májban, ugyan-40 akkor elősegíti a széntetraklorid-mérgezés hatására lecsökkent foszfolipoid-szint visszatérését a normális értékre. 3. táblázat 45 Máj foszfolipoid-szintje patkányon, széntetraklorid-mérgezés és SAM-kezelés után 50 Beadott anyag Összes foszfolipoid mg/g Fiziológiás sóoldat 30,5 7 (± 1,18) CCL, 18,87 (±1,06) 55 CC14 + 15 mg/kg i.p. SAM 27,20 (± 1,25) CCI4 + 150 mg/kg i.p. SAM ' 20,87 (± 0,42) CCI4 + 15 mg/kg i.p. Ad+Met 19,9 (± 0,92) A feltüntetett értékek 10 kísérlet átlagértékei. Záró-60 jelben megadtuk a mérés standard hibáját. A hatóanyag májvédő aktivitásának vizsgálata során patkányokon Ridout módszerével [Ridout és munkatársai: Biochem. J. 52, 99 (1952)] ún. máj-koleszterin degenerálódást váltottunk ki. E kísérletben, 65 megfelelő étrend alkalmazásával, feltűnő mértékben 6
