170053. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a mikroba-eredetű tejalvasztó enzim fermentációs úton történő előállítására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS SZOLGÁLATI TALÁLMÁNY Bejelentés napja: 1974. XII. 30. (PI-441) Közzététel napja: 1976. X. 28. Megjelent: 1977. XII. 31. 170053 Nemzetközi osztályozás: C12D 13/10 Feltalálók: dr. Vámos Endréné vegyész 20%, dr. Kiss Ernő vegyészmérnök 30%, Rátz Mária vegyészmérnök 16%, Knolmár Tibor biológus 12%, Pacsay Ágoston agrármérnök 12%, Pongrácz György technikus 5%, Wirt Károly technikus 5%, Budapest Tulajdonos: Phylaxia Oltóanyag- és Tápszertermelő Vállalat 50%, Budapest, Központi Élelmiszeripari Kutató Intézet 50%, Budapest Eljárás a mikroba-eredetű tejalvasztó enzim fermentációs úton történő előállítására 1 10 A találmány tárgya új eljárás a mikroba-eredetű tejalvasztó enzim fermentációs úton történő előállítására. Ismert, hogy a tejiparban a sajtgyártáshoz borjúgyomor-eredetű tejóltóport használnak, amelyben a tejalvasztó hatású enzim, a rennin található. Áz enzimkészítménynek a sajt gyártásánál az a feladata, hogy a sajttejet megalvassza és a sajtfehérjét az érési idő alatt bontsa. Az utóbbi időben hiány mutatkozott borjúgyomorból, illetőleg a belőle előállítható enzimkészítményből. Minthogy a tejtermelés növelésével növekszik a sajtgyártás is, több országban megindult a borjúgyomor-eredetű tejalvasztó enzim helyettesítésére irányuló kutatás. Sajtgyártási célra leginkább az egyes penésztörzsek 15 által termelt proteázok alkalmasak. A 3 151 039 sz. Amerikai Egyesült Államok-béli szabadalmi leírás szerinti eljárásban Mucor pusillus Lindt penésztörzset használnak fel enzimkészítmény előállításához. Jobb ízű sajt állítható elő az 20 1 035 897 sz. brit szabadalmi leírásban ismertetett eljárással kapott enzimkészítmény felhasználásával, ahol Endothia parasitica penésztörzset alkalmaznak az enzim előállítására. Az inokulumot 96 órán át készítik különleges táptalajban. 48 órás fermentáció 25 után a fermentlé pH-értéke 6,0 - 6,5 és 0,5 ml-e 5 ml tejet 2-3 perc alatt alvaszt meg. Tejpor-tej szubsztrátumon mérve a fermentlé tejalvasztó aktivitását, az 140—200 Soxhlet egységnek felel meg ml-enként. 30 Találmányunk alapja az a felismerés, hogy ha a fermentációhoz CBS 25051 jelzésű, 00126 MNG szám alatt letétbe helyezett Endothia parasitica törzset használunk, a törzsfenntartást és törzsspóráztatást merev, malátás agáron szűrt tenyészetben végezzük, az inokulum-készítést maximálisan két lépésben végezzük és speciális összetételű termelő táptalajt használunk, nagy tejalvasztó aktivitású oltóenzimet kapunk. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy 00126 MNG szám alatt letétbe helyezett Endothia parasitica törzset merevített, malátás agáron szűrt tenyészetben spóráztatunk, a spórákat 3-7% dextrózt, burgonyacukrot vagy szacharózt, 2-6% szójavagy mogyorólisztet j 0,2-1,0% KHaP0 4 -et és 0,2-0,6% étolajat tartalmazó inokulum-táptalajba oltjuk, 24-48 órán át 25-30 C°-on, előnyösen 28C°-on tenyésztjük, mimellett az inokulum-készítést maximálisan két lépésben végezzük, majd a kapott inokulumot 3-7% dextrózt, burgonyacukrot vagy szacharózt, 1-5% szója- vagy mogyorólisztet, 0,3- 1,5% CaCCM, MgS04 -et vagy KH 2 P0 4 -et és 0,2 - 0,6% étolajat, valamint adott esetben Ca(N03 ) 2 -t tartalmazó termelő táptalajba oltjuk és 42-64, előnyösen 48 órán át 25-30 C -on, előnyösen 28 C°-on fermentáljuk, majd a kapott enzimet a fermentléből ismert módon, előnyösen szűréssel, majd a szűrlet beíöményítésével és a kivált inaktív fehérje eltávolításával kinyerjük, vagy por-alakú 170053
